一氧化氮对‘贵长’猕猴桃果实的保鲜效果

聂娇娇 彭俊森 万璇 黄世安 罗登灿 朱守亮 董晓庆

摘 要： 为探讨一氧化氮（nitric oxide，NO）处理对猕猴桃果实的保鲜效果，以‘贵长猕猴桃（Actinidia deliciosa ‘Guichang）为材料，测定了常温贮藏条件下NO处理对猕猴桃果实生理、食用品质和营养成分的影响。结果表明，NO处理不仅可以延缓果实硬度的下降，降低呼吸速率及失重率的上升，还能减缓可溶性固形物含量、固酸比、总酚含量的上升以及可滴定酸、类黄酮、花青素和Vc含量的下降，从而减缓猕猴桃果实的衰老，保持果肉组织中的水分和营养物质。该研究结果可为NO应用于猕猴桃果实贮藏保鲜提供理论依据。

关键词：一氧化氮；‘贵长猕猴桃；保鲜

中图分类号：S663.4

文献标识码：A

文章编号：1008－0457（2023）02－0023－06

国际DOI编码：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2023.02.004

猕猴桃（Actinidia deliciosa），别称奇异果，为猕猴桃科猕猴桃属植物，因其营养丰富、口味独特以及维生素C（Vc）含量较高而受到人们的青睐［1］。猕猴桃属于呼吸跃变型浆果类果实，具有较高的呼吸高峰和乙烯释放高峰，采后果实易出现品质下降、腐烂和霉变等问题，从而影响商品价值和经济价值。目前‘贵长猕猴桃的贮藏保鲜还存在较多的问题，其中保鲜剂的滥用导致猕猴桃后熟品质严重下降甚至不能后熟是比较突出的问题之一。因此，探究适宜的保鲜剂更好地保鲜‘贵长猕猴桃，延长贮藏期，保持较高的果实品质，减少腐烂损耗，是‘贵长猕猴桃产业亟待解決的问题。

一氧化氮（nitric oxide，NO）作为具有多种功能的信号分子，在植物体内起着重要的调控作用［2］，且广泛存在于生物体各组织内，可以较好地维持果蔬的采后品质［3］。研究表明，一定浓度的NO处理对园艺产品有较好的保鲜作用，但是不同园艺产品对NO的敏感性不同［4］。NO处理对杏［5］、哈密瓜［6］、番茄［7］、苹果［8］、‘布鲁诺猕猴桃［9］、火龙果［10］、芒果［11］等果蔬均有一定的保鲜作用。目前‘贵长猕猴桃的保鲜技术有二氧化氯保鲜［12］、紫外辐照保鲜［13］、复合膜保鲜［14］、生物保鲜剂保鲜［15］和乙烯吸附剂［16］。上述保鲜技术都能延长‘贵长猕猴桃果实的贮藏保鲜期，但存在保鲜技术成本高、卫生安全等方面的缺陷。已有较多的证据表明，NO通过延缓组织衰老进程、抑制乙烯合成来提高果蔬贮藏过程中抵御逆境的能力［17］，可以解决目前‘贵长猕猴桃因保鲜技术不足而造成的浪费。

硝普钠（SNP）可作为NO的供体，且低浓度SNP溶液呈无色，可以延长采后园艺产品的保鲜期以及改善果实品质，对果蔬产品无残留毒性，使用时仅需低浓度的溶液，成本较低[18]。硝普钠（SNP）作为一种新型果蔬保鲜剂，在部分果蔬中已有相关研究报道且效果较好[19-23]。因此，本研究采用NO供体硝普钠（SNP）处理‘贵长猕猴桃，通过对‘贵长猕猴桃采后贮藏期间的外观变化和品质及生理指标的观测，探讨NO处理对‘贵长猕猴桃贮藏保鲜的效果，为猕猴桃的贮藏保鲜提供理论依据和技术支撑。

1  材料与方法

1.1  试验材料

供试‘贵长猕猴桃采自贵州省修文县龙场镇干坝村修文长兴种植专业合作社基地（106.33°E，26.47°N），采摘可溶性固形物为6.5%～7.5%、大小均匀、成熟度相对一致、无病虫害和机械损伤的果实，采后2 h内运回贵州大学园艺实验室，摆放于空旷的桌面上，放置12 h散去田间热，将果实分为两组，每组60个，分别放入硝普钠（SNP）试剂（购于贵州省赛兰博科技有限公司）配制的溶液和清水中浸泡10 min，取出后自然晾干，贮藏于室温（23±2）℃下。每一组分别随机选出两组果实（每组10个），用于呼吸速率和失重率的测定，分别在第0、5、10、15、20、25、30天于每组剩下的果实中随机选取3个进行硬度、可溶性固形物、可滴定酸、固酸比等指标的测定。每个处理设置3个重复。

1.2  指标测定

1.2.1  硬度测定

从每组待测样品中分别随机抽取3个猕猴桃果实，在果实的赤道部位，间隔等距离的3个位置各削去厚度约为1 mm的果皮，使用GY-4型数显果实硬度计（购于浙江托普云农科技股份有限公司），用相同的力度将探头刺入选好的点，深度到探头的刻度线（10 mm）处即读数并记录。

1.2.2  可溶性固形物、可滴定酸、固酸比测定

取一定量（5.0 g）果实样品放入研钵中磨碎后，经过滤取适量汁液滴入PAL-BX/ACID 12型数显糖酸度计的仪器棱镜，按下START键，Brix（可溶性固形物）测量值即显示出来；用移液枪将样品稀释50倍后，搅拌均匀。 按下START键，Acid酸度（可滴定酸）测量值即显示出来；固酸比的测量显示方法在测量值显示（Brix测量值和酸度值）后，直接按R键，即显示固酸比数值，读数记录，重复3次。

1.2.3  呼吸强度测定

参考董晓庆等［24］方法。用TEL-7001型呼吸仪测定：将干燥器放入（23±2）℃的实验室内，每个处理随机取10个猕猴桃果实（单果质量80 g左右），放入9.0 L的干燥器中，同时放入CO2分析仪，密封，每10 min记录1次。结果以CO2计，单位mg/（kg·h）。

1.2.4  失重率测定

采用称重法CP213型电子天平进行称量。失重率（%）=（m1-m2）/m1×100，式中：m1为采收当天果实的初始重量（g）;m2为试验当天果实的重量（g）。

1.2.5  总酚、类黄酮、花青素测定

参考曹建康等［25］方法。使用FA-2104型分析天平称取2.0 g果肉组织， 加入少许经预冷的1%HCl-甲醇溶液，在冰浴条件下研磨匀浆后，转入20 mL刻度试管中，用1%HCl-甲醇溶液冲洗研钵，一并转移到试管中，定容至刻度线，混匀后于4 ℃避光提取20 min，期间摇动数次，然后放入YG16W型台式高速冷冻离心机，在4 ℃下离心15 min后收取上清液待用，以1%HCl-甲醇溶液作空白参比调零，取上清液分别于波长280、325、600和530 nm处测定溶液的吸光度值，重复3次。此方法仅能判断测定样品之间总酚、类黄酮和花青素的相对含量， 以每克样品在波长280 nm处吸光度值表示总酚含量，即OD280nm/g； 以每克样品在波长325 nm处吸光度值表示类黄酮含量，即OD325nm/g；以每克样品在波长530 nm和600 nm处吸光度值之差表示花青素含量（U），即U= （OD530nm-OD600nm）/g，从标准曲线中得出准确含量。

1.2.6  Vc含量测定

参考曹建康等［25］方法。采用2，6-二氯酚靛酚滴定法测定Vc含量。称取10.0 g果实样品置于研钵中，加入少量20 g/L草酸溶液，在冰浴条件下研磨成浆状，转入到100 mL容量瓶中，用20 g/L草酸溶液冲洗研钵后，倒入容量瓶中，再用20 g/L草酸溶液定容至刻度，摇匀，提取10 min后，过滤收集溶液备用。用移液器吸取10.0 mL滤液置于100 mL的三角瓶中，用已标定的2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至出现微红色、且15 s不褪色为止，记下染料的用量。同时，以10 mL 20 g/L草酸溶液作为空白，按同样方法进行滴定。重复3次。

1.3  数据分析

采用Microsoft Excel 2013软件处理实验数据及制作折线图，DPS软件进行单因素方差分析，Duncans多重差异比较，P值表示差异显著性。

2  结果与分析

2.1  NO对猕猴桃果实硬度的影响

果实的硬度是指果肉抗压能力的强弱，抗压力越强，果实的硬度就越大［26］。从图1可以看出，随着贮藏时间的延长，两组猕猴桃果实的硬度均下降，在贮藏的第30天，处理组的硬度从4.82 N下降到1.54 N，下降了68%，对照组的硬度从4.82 N降到0.98 N， 下降了79.60%，且在整个贮藏期间，NO处理组的硬度的下降幅度小于对照组，具有显著性差异（P＜0.05）。

2.2  NO对猕猴桃果实可溶性固形物、可滴定酸、固酸比的影响

可溶性固形物是判定果实采收时间、 耐贮藏性能及加工制品质量的重要指标。 由图2-a可以 看出，整个贮藏期间对照组和NO处理组的可溶性 固形物均呈上升趋势，到第30天时，对照组的可溶性固形物上升了60.66%，处理组上升了55.55%，在贮藏期的第25天，处理组的可溶性固形物含量显著低于对照组（P＜0.05），且对照组的含量上升趋势较平稳。可见NO處理可以延缓猕猴桃果实可溶性固形物的上升。果实的可滴定酸是由苹果酸、琥珀酸、柠檬酸等组成，在后熟过程中逐渐下降，是影响果实风味的重要指标之一［27］。从图2-b可知，整个贮藏期间，两组猕猴桃果实的可滴定酸含量均下降，但处理组的猕猴桃果实较对照组下降较慢，在贮藏第30天，处理组的可滴定酸为1.04%，比对照组高0.13%，从第5天开始，处理组的可滴定酸含量下降趋势趋于平缓，且显著高于对照组（P＜0.05）。固酸比是评价水果果实风味和成熟程度的重要指标，固酸比越大，果实风味越浓［28］。由图2-c所示，随着贮藏期的延迟，猕猴桃果实的固酸比逐渐上升，到第30天，处理组的固酸比为17.63，而对照组的固酸比为18.93，从第5天开始，处理组的固酸比相较于对照组低，上升趋势也较对照组平缓。贮藏的第10～25天处理组的固酸比显著低于对照组（P＜0.05）。

2.3  NO对猕猴桃果实呼吸强度的影响

呼吸作用是生物体进行生命活动的基本代谢过程，也是采收后果蔬进行的最重要的生理活动之一，在果蔬呼吸过程中，所释放的呼吸热是影响果蔬贮运性的重要因素［25］。猕猴桃属于呼吸跃变型果实，如图3所示，在贮藏的第10天出现了呼吸高峰，处理组和对照组的猕猴桃果实的呼吸高峰值分别为4.40 mg/（kg·h）和5.47 mg/（kg·h），处理组比对照组降低了19.51%，且两组之间具有显著性差异（P＜0.05）。

2.4  NO对猕猴桃果实失重率的影响

当失水率达到一定程度后果实便会产生严重的皱缩，失去商品价值。由图4可知，随着贮藏时间的延长，处理组和对照组的失重率均呈上升趋势。在贮藏末期，处理组果实和对照组果实的失重率分别为5.22%和7.54%，处理组果实的失重率极显著低于对照组（P＜0.01）。

2.5  NO对猕猴桃果实总酚物质、类黄酮、花青素含量的影响

总酚类物质为植物次生代谢产物，与果蔬成熟、衰老、抗逆、抗病性代谢密切相 关［29］。由图5-a   可以看出贮藏过程中，两组猕猴桃果实的总酚均在下降，贮藏第30天，处理组果实的总酚为0.36 mg/g， 对照组的总酚为0.44 mg/g，在整个过程中处理组的总酚下降速度速率低于对照组，但差异不显著（P＞0.05）。类黄酮是植物体内重要的植保素类物质，具有抗病性［30］。由图5-b可知，贮藏过程中猕猴桃果实的类黄酮含量在不断下降，在贮藏的第30天，对照组猕猴桃果实的类黄酮下降了91.11%，而处理组果实的类黄酮下降了77.54%，相比对照组低了13.58%，在贮藏的第0天到第15天，处理组的类黄酮下降趋势大于对照组，但在第15天到第30天，处理组的类黄酮下降趋势显著低于对照组（P＜0.05）。花青素是大部分植物自身合成的天然色素，在植物生长发育中具有重要作用［31］，也是一种植物次生代谢产物，大量存在于果蔬组织中，与果蔬的色泽发育、品质和风味形成、成熟衰老过程等作用密切相关，对果蔬的贮藏具有重要的影响［25］。从图5-c可以看出，在贮藏的30天内，两组猕猴桃果实的花青素含量均逐步降低，贮藏30天，对照组果实和处理组果实的花青素含量分别下降了83.72%和66.67%，处理组相比对照组低了17.05%，且处理组果实花青素含量下降趋势较平缓，两组之间具有显著性（P＜0.05）。

2.6  NO对猕猴桃果实Vc含量的影响

在贮藏过程中，果实的Vc极易分解，因此，Vc含量是评价猕猴桃营养和商品价值的一个重要指标［32］。由图6可知，随着贮藏时间的延长，处理组与对照组果实的Vc含量均呈下降趋势，第30天时， 处理组果实的Vc含量从169.07 mg/100 g下降到 114.30 mg/100 g，下降了32.34%， 对照组果实的Vc 含量则从175.85 mg/100 g下降到112.42 mg/100 g， 下降了36.07%，处理组下降速率较为平缓，但在贮藏第30天两者差异不显著（P＞0.05）。

3  结论与讨论

本研究表明，0.25 mmol/L NO供体硝普钠（SNP）处理延缓了‘贵长猕猴桃果实软化速率，显著抑制了失重率的上升，有效保持猕猴桃果实果肉组织中的水分，这一结论与NO处理延缓了李［33］、芒果［34］、番茄［35］和马铃薯［36］的硬度下降以及抑制失重率上升的结论相一致。侯晓东等［37］研究表明芒果的失重是由于果皮水分的散失而不是果肉，NO处理也有可能通过抑制猕猴桃果实果皮的水分散失从而抑制果实失重率的上升，这种推断有待进一步证实，也有可能是降低了猕猴桃果实的呼吸速率、蒸腾作用，减少了果实营养物质的消耗，从而减缓了猕猴桃果实重量的损失。

呼吸作用是生物体进行生命活动的基本代谢过程，也是采收后果蔬进行的最重要的生理活动之一，在果蔬呼吸过程中， 所释放的呼吸热是影响果蔬耐贮性的重要因素，NO处理显著降低了猕猴桃果实的呼吸速率，进而减少贮藏期间猕猴桃果实营养物质的消耗，达到保鲜的作用，与NO处理降低脐橙［38］和‘布鲁诺猕猴桃［9］呼吸速率的结果相一致。

可溶性固形物、可滴定酸和固酸比是决定果实品质的重要因子，NO处理抑制果肉中淀粉的代谢，从而使果实的可溶性固形物含量上升幅度降低，同時减缓可滴定酸的下降以及固酸比的上升，保持了猕猴桃果实良好的口感和风味，与马海燕等［4］研究的NO处理降低砀山酥梨的可溶性固形物含量的上升幅度这一结论相一致。

酚类物质、类黄酮类和花青素是果蔬组织中大量存在的植物次生代谢产物，与果蔬的色泽发育、风味形成、成熟衰老和组织褐变等作用密切相关。在该研究的贮藏过程中，猕猴桃果实中的总酚物质、类黄酮含量和花青素含量均下降，但NO处理的果实中这3类物质的下降趋势较为平缓，说明NO处理能够延缓猕猴桃果实的总酚物质、类黄酮含量和花青素含量的下降，有助于猕猴桃果实的保鲜；王欣等［39］和周春丽等［40］的研究表明，NO处理可有效抑制双孢蘑菇和韭菜中Vc含量的下降，但本研究结果表明，NO处理对降低猕猴桃果实中的Vc含量下降速率没有起到显著的作用，其具体原因，有待进一步研究。

本研究表明，0.25 mmol/L NO供体硝普钠（SNP）处理‘贵长猕猴桃果实可以起到良好的保鲜效果，有效保持果实中的水分，抑制失重率和硬度的下降，同时降低呼吸速率，减少营养物质的消耗，减缓可溶性固形物含量的上升、可滴定酸的下降以及固酸比的上升，且延缓猕猴桃果实的总酚物质、类黄酮、花青素和Vc含量的下降，有助于猕猴桃果实的贮藏保鲜。可见适当浓度的NO处理可以延长‘贵长猕猴桃的贮藏期，维持较好的果实品质。从生理生化、分子生物学以及组学角度等进一步探索NO延缓‘贵长猕猴桃衰老的机制是我们今后研究的方向。

（责任编辑：胡吉凤）

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Effect of Nitric Oxide on Preservation of Actinidia deliciosa ‘Guichang Fruit

Nie Jiaojiao1，Peng Junsen1，Wan Xuan1，Huang Shian1，Luo Dengcan1，Zhu Shouliang2，Dong Xiaoqing1*

（1.College of Agriculture，Guizhou University，Guiyang，Guizhou 550025，China; 2.Fruit and Vegetable Work Station of Guizhou Province，Guiyang，Guizhou 550025，China）

Abstract：

In order to explore the effect of nitric oxide（NO） on the preservation of kiwifruit，Actinidia deliciosa ‘Guichang，and the physiology，edible quality and nutritional composition of kiwifruit treated by NO were determined under room temperature.The results showed that NO treatment could not only delay the decrease of fruit firmness of ‘Guichang kiwifruit，reduce the respiration rate and increase of weight loss rate，but also slow down the increase of  soluble solid content（SSC），SSC/TA，total phenolic content and the decline of titratable acids（TA），flavonoids，anthocyanin and Vc contents.Thus，the senescence of kiwifruit was inhibited，and the water and nutrients in the pulp tissue were maintained.The results of this study could provide a theoretical basis for the application of NO in the storage and preservation of kiwifruit.

Keywords：

nitric oxide; Actinidia deliciosa ‘Guichang; preservation