佳米驴消化道寄生虫感染情况的调查研究

丁常根，秦凯星，冯 平

（ 榆林学院，陕西 榆林 719000 ）

佳米驴是我国著名的中型驴品种，主要分布于榆林市佳县、米脂县以及绥德县一带[1]。近年来，驴寄生虫病对驴养殖的影响日渐突出，其寄生虫种类繁多，且不同地区、不同年龄段的驴感染情况也各有不同。国外驴消化道感染马副蛔虫及梨形虫病较严重，其次为圆线虫。有调查指出，埃塞俄比亚的马副蛔虫感染率较高，达到96%，马副蛔虫达到40%[2]；巴西圣保罗梨形虫感染率较高，其中泰勒虫感染率为73.68%，驽巴贝斯虫为93.2%[3]；罗马尼亚圆线虫属感染较为突出，达到74%[4]。孔繁瑶等[5]在研究驴寄生虫时发现了新种三齿线虫（Triodontophorus）和新种盅口属线虫（Cyathostomum）等多种线虫。周婉丽[6]调查马、驴、骡体内寄生虫时共发现62种寄生虫，线虫种类最多，占82.26%（51/62），其次是蜘蛛昆虫，占11.29%（7/62），吸虫和绦虫最少，各占3.23%（2/62）。杨军威等[7]发现，马副蛔虫感染叶城县驴的感染率为17%左右。王时伟等[8]对塔里木盆地的60头驴胃肠道寄生虫进行调查，发现胃肠道寄生虫感染率高达100%，均为混合感染，且感染3种及以上的最多，达到了95%，其中圆线属占100%。因此，需加强对寄生虫病学的深入研究，并在临床中采取综合防治措施，降低寄生虫病带给动物的危害以及动物因寄生虫病导致死亡的比例[9]。基于此，为了解佳米驴消化道内寄生虫病的感染情况，本试验对米脂县某驴场内佳米驴消化道常见寄生虫病病原进行了调查和种属的鉴定、归类，检测、鉴定其常见寄生虫优势种虫、感染率及感染强度等，以期为降低寄生虫病在佳米驴消化道的流行和发生提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 仪器与试剂

BA400Digital 生物显微镜（麦克奥迪实业集团有限公司）、BCD-209S/E 冰箱（海信容声（广东）冰箱限公司）；载玻片、烧杯、镊子、标本袋、电子天平等。

氯化钠（批号为20100324）购自天津市瑞金特化学品有限公司；氢氧化钠（批号为20190104）购自天津市科密欧化学试剂有限公司。

1.1.2 样品采集

随机采取米脂县某驴场佳米驴新鲜粪便样品30 g 左右，将所采的样品放入干净透明的一次性封口袋中进行标记编号，总计采集了32份佳米驴粪便，其中成年和幼年佳米驴各16份。采回后进行显微镜虫卵检查，未检查完的保存在4 ℃冷藏室中待检。

1.2 试验方法

1.2.1 饱和食盐水漂浮法

取少量佳米驴粪便样品，将其置于干净的青霉素小瓶内，加入适量饱和食盐水，用镊子将粪便捣碎，搅拌均匀。之后加入少量饱和食盐水使液面形成半球形，用小镊子夹去上清液杂质。静置15～20 min 后，用干净载玻片轻微蘸取上清液液面，盖上盖玻片，置于显微镜下观察。

观察时应按照“弓”字形逐个观察，避免漏掉或重复。观察寄生虫时，应该通过其内部形态特征，辨别其种类，并测定其长度、宽度。对于观察到寄生虫卵的样本放回4 ℃冰箱中保存，然后进行重点观察[10]。

1.2.2 离心沉淀法

取粪便样品约5 g，加入清水10～15 mL，搅拌均匀，用纱布将其过滤到15 mL 离心管内，2 000 r/min 离心2 min。倒去上层液体，再加清水，用吸管吹打均匀后再离心，重复2～3 次，直到清液清亮为止。倒掉上层液体，留下沉淀物2倍的液体量，用吸管将剩下的沉淀物吹打均匀，取1滴滴到载玻片上，在显微镜下观察[11]。

1.2.3 虫卵计数方法

本试验采用斯陶尔氏法进行卵囊计数：在自行标记为56、60 mL两个刻度的小三角烧瓶中加入56 mL 0.4%氢氧化钠水溶液，再加入4 g待检粪便样品，使液面与60 mL处平齐；再加10个小玻璃珠，盖上橡皮塞，充分振荡，使粪便完全破碎混匀，之后使用吸管吸取0.15 mL 粪汁滴于载玻片上，盖上盖玻片，在显微镜下进行虫卵的计数。

计数时要按照“弓”字形逐个视野计数，以免漏掉或者重复计算，将观察后所得到的虫卵数乘以100，即为1 g 粪便中含有的卵囊。为使试验数据更加精确，本试验将每份粪便样品检查3 个玻片，将3 个玻片上卵囊数平均后乘以100作为每克粪便中所含的卵囊数（OPG）值[12]。

1.2.4 虫卵鉴定方法

显微镜下观察虫卵的形态结构特征，依据虫卵的形态、大小、颜色等形态特点，参照文献[13]进行种类鉴定。

1.3 数据统计与分析

试验数据采用SPSS 统计学软件进行差异性分析，LSD法进行多重比较。结果以平均值表示，P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 佳米驴寄生虫检出情况

检测结果显示，32份佳米驴粪便样本中检出其消化道存在3种寄生虫感染：马圆线虫、毛细线虫和马副蛔虫。佳米驴消化道寄生虫虫卵镜检结果见图1，3种寄生虫的基本形态见表1。

2.2 佳米驴消化道寄生虫感染率

通过对虫卵进行鉴定，发现佳米驴消化道内主要有马圆线虫、毛细线虫和马副蛔虫3 种寄生虫，总感染率达到100%。其中，18 份样品存在混合感染，混合感染率为56.25%，混合感染的种类最多为3种。成年和幼年佳米驴马圆线虫感染率均较高。

2.3 佳米驴消化道不同寄生虫感染率（见表2）

由表2可知，佳米驴马圆线虫、毛细线虫和马副蛔虫感染率分别为56.25%、46.88%和50.00%。成年佳米驴3 种寄生虫的感染率均显著高于幼年（P＜0.05）。

2.4 佳米驴消化道不同寄生虫感染强度（见图2）

图2 佳米驴消化道寄生虫感染强度Fig.2 Infection intensity of different parasites in alimentary canal of Jiami donkey

由图2可知，成年佳米驴马副蛔虫、毛细线虫、马圆线虫OPG值分别为266、234、634个/g；幼年佳米驴马副蛔虫、毛细线虫、马圆线虫OPG 值分别为299、170、571 个/g。成年佳米驴和幼年佳米驴马圆线虫感染强度均较强。

3 讨论

本研究采集了32头成年和幼年佳米驴粪便进行检测，结果显示，所有样本均检出寄生虫，说明佳米驴消化道内寄生虫感染情况比较严重，应引起广泛关注。

李斌等[15]研究发现，马圆线虫、毛细线虫、马副蛔虫为南疆地区驴消化道的优势虫种。卜艳珍等[16]对河南省34 头驴的体内圆线虫种类进行了调查与分析，共发现了22种圆线虫，总感染率为100%；且感染病例中大多数是多种圆线虫混合感染，同一头驴肠道中混合感染的寄生虫种类最多可达15种。本试验共发现1种圆线虫（马圆线虫），其感染率为56.25%，佳米驴消化道内也只有马圆线虫与毛细线虫和马副蛔虫的混合感染，未出现圆线虫之间的混合感染，与卜艳珍等[16]的结果有所不同。卡丽比努尔·尔肯[17]调查了南疆254 头驴的粪样，发现驴消化道感染的寄生虫有毛细线虫、球虫、马圆线虫和马副蛔虫，其中马圆线虫的感染率和感染强度均较强。本试验中发现的寄生虫有马圆线虫、毛细线虫和马副蛔虫，成年佳米驴和幼年佳米驴的马圆线虫感染率和感染强度均较强，与卡丽比努尔·尔肯等[17]的结果非常相似。本研究中，成年佳米驴马副蛔虫比幼年佳米驴更易感，与赵璐等[18]的调查结果相反。本试验中并未发现球虫，与卡丽比努尔·尔肯等[17]的结果不同。造成这些结果差异的原因可能是地理位置不同，也有可能是本试验样品数较少，无法更加全面地观察寄生虫的感染情况。

本试验发现的3 种寄生虫中，马圆线虫虫卵不需要中间宿主，在外界环境下发育为感染性第三期幼虫，之后经口感染宿主；毛细线虫虫卵中间宿主为蚯蚓，佳米驴吞食含第二期幼虫的蚯蚓后被感染，虫体在其体内逐渐发育为成虫；马副蛔虫虫卵也不需要中间宿主，在外界环境下发育为感染性幼虫，再经口感染。由于不同虫卵感染途径不同，必须采取综合的预防策略，对不同虫种采取不同的防治措施。针对马圆线虫的感染，应采用抗线虫药品，对驴舍内马圆线虫进行定期驱虫；针对毛细线虫的感染，应搞好驴舍的卫生管理，及时清除粪便并进行发酵处理以杀灭虫卵，感染比较严重的地区可进行预防性驱虫；针对马副蛔虫的感染，应确保草料、饮水等卫生，粪便堆积发酵，定期消毒，以减少驴消化道内寄生虫感染的危害。

4 结论

本研究结果显示，佳米驴消化道内存在包括马圆线虫、毛细线虫和马副蛔虫等3种寄生虫感染，无论是成年佳米驴还是幼年佳米驴，马圆线虫的感染率均最高（成年佳米驴感染率为75.00%，幼年佳米驴感染率为37.50%），毛细线虫的感染率均最低（成年佳米驴感染率为62.50%，幼年佳米驴感染率为31.25%）；成年佳米驴和幼年佳米驴马圆线虫感染强度均最强（成年佳米驴为634个/g，幼年佳米驴为571个/g）。因此，养殖过程中应重视预防马圆线虫感染，定期开展驱虫，从而降低马圆线虫对佳米驴的危害。