复方丹参片与丹参片对冠状动脉粥样硬化患者血小板活化抑制作用的比较

姬晓鹏，蒋 斌，潘 琳，黄 河，宋其贵，冯中培

（四川大竹县人民医院，大竹县 635100）

血小板活化在冠心病、心肌缺血、动脉粥样硬化的发生、进展、转归中具有重要作用。冠状动脉内血栓主要由血小板组成，其不仅可以减少冠状动脉内血流或造成缺血，而且对缺血后梗死范围的扩展及预后有着不可忽视的作用。血小板活性的增加是引起动脉粥样硬化和造成斑块不稳定的重要危险因素[1，2]。环磷酸腺苷（cAMP）、血栓素A2（TXA2）、前列腺环素（PGI2）与血小板功能密切相关，丹参可提高cAMP、PGI2含量，降低TXA2含量[3]，抑制血小板聚集。目前，临床上广泛使用的丹参制剂主要有复方丹参片、复方丹参滴丸和丹参片等。本试验拟观察复方丹参片和丹参片对冠状动脉粥样硬化患者血小板活化的作用并进行比较，为临床合理用药提供试验依据。

1 临床资料

1.1 病例选择

90例入选病例来自本院心血管内科2007年1月～2009年7月住院患者，有明确症状、体征，并经冠状动脉CT血管造影确诊为冠状动脉粥样硬化。分为复方丹参片组、丹参片组和对照组。3组年龄、性别、病情程度、伴发疾病及既往史的评分差异无显著性（P＞0.05），具有可比性。剔除了肿瘤、病危和药物不能耐受者。另设正常组30例，系本院健康体检者，未发现心、肺、肝、肾及内分泌或新陈代谢疾病。本试验经过本院学术委员会批准。

1.2 治疗方法

复方丹参片组：口服复方丹参片（四川省某制药有限公司，规格：每片600 g，国药准字Z20020119）3 片，tid；丹参片组：口服丹参片（河南省某制药股份有限公司，规格：每片0.48 g，国药准字Z20073141）3 片，tid；对照组：给予安慰剂。疗程为2个月。

1.3 检测仪器与方法

低温离心机（美国Sigma公司）；Light CyclerⅡ型实时荧光定量基因扩增系统（德国Roche公司）；放射免疫计数器（成都中宇仪器有限公司）。试剂Trizol（德国Roche公司）；Rnasin（宝生物工程（大连）有限公司）；逆转录试剂盒、荧光定量Realtime PCR试剂盒（上海东洋坊科技有限公司）；cAMP、TXA2、PGI2放免试剂盒（南京凯基生物技术有限公司）。

方法采用realtime RT-PCR法检测全血中前列腺环素I2合酶（PTGIS）信使核糖核酸（mRNA）的表达及放射免疫法检测血清中cAMP、TXA2、PGI2的表达[4]。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 复方丹参片与丹参片对冠状动脉粥样硬化患者血浆中cAMP、TXA2、PGI2表达的影响

本试验采用放射免疫法测定血浆中cAMP、TXA2、PGI2的表达。结果如表1所示，与正常组比较，对照组冠状动脉粥样硬化患者血浆中cAMP、PGI2表达明显降低，TXA2明显升高；复方丹参片和丹参片能明显升高冠状动脉粥样硬化患者血浆中cAMP、PGI2表达，明显降低血浆中TXA2中的表达（P＜0.01）；复方丹参片组的升高和降低幅度均明显大于丹参片组（P＜0.01）。

表1 复方丹参片与丹参片对冠状动脉粥样硬化患者血浆中cAMP、TXA2、PGI2表达的影响（±s，n＝30）Tab 1 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the expression of cAMP，TXA2，PGI2in patients with coronary atherosclerosis（±s，n＝30）

表1 复方丹参片与丹参片对冠状动脉粥样硬化患者血浆中cAMP、TXA2、PGI2表达的影响（±s，n＝30）Tab 1 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the expression of cAMP，TXA2，PGI2in patients with coronary atherosclerosis（±s，n＝30）

与正常组比较：＊P＜0.01；与丹参片组比较：#P＜0.01；与对照组比较：ΔP＜0.01vs.normal group：＊P＜0.01；vs.danshen tablets group：#P＜0.01；vs.control group：ΔP＜0.01

PGI2/pg·mL-1 474.31±84.08185.63±38.51＊298.31±70.36#Δ 241.38±58.79Δ组别正常组对照组复方丹参片组丹参片组cAMP/pg·mL-1 17.23±3.344.26±1.08＊9.87±2.13#Δ 7.16±1.62Δ TXA2/pg·mL-1 11.39±2.9534.95±7.62＊20.72±5.06#Δ 25.74±6.11Δ

2.2 复方丹参片与丹参片对冠状动脉粥样硬化患者全血中PTGIS mRNA表达的影响

本试验采用realtime RT-PCR法检测全血中PTGIS mRNA的表达。结果如表2所示，与正常组比较，对照组冠状动脉粥样硬化患者全血中PTGIS mRNA表达明显降低；复方丹参片和丹参片能明显升高冠状动脉粥样硬化患者全血中PTGIS mRNA表达，2组分别升高了171.19%、86.44%（P＜0.01）。

表2 复方丹参片与丹参片对冠状动脉粥样硬化患者全血中PTGIS mRNA的影响（±s，n＝30）Tab 2 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the mRNAexpression of PTGIS in patients with coro nary atherosclerosis（±s，n＝30）

表2 复方丹参片与丹参片对冠状动脉粥样硬化患者全血中PTGIS mRNA的影响（±s，n＝30）Tab 2 Effect of Compound danshen tablets and Danshen tablets on the mRNAexpression of PTGIS in patients with coro nary atherosclerosis（±s，n＝30）

与正常组比较：＊P＜0.01；与丹参片组比较：#P＜0.01；与对照组比较：ΔP＜0.01vs.normal group：＊P＜0.01；vs.danshen tablets group：#P＜0.01；vs.control group：ΔP＜0.01

组别正常组对照组复方丹参片组丹参片组PTGIS/-actin 0.28±0.0480.059±0.0092＊0.16±0.033#Δ 0.11±0.029Δ

3 讨论

急性冠状动脉综合征（ACS）是由于冠状动脉内粥样斑块破裂、血小板聚集和血栓形成导致冠状动脉完全或不完全阻塞引起的一组临床综合征，是严重危害人类健康的一大类疾病。大量的研究结果表明，冠脉缺血后血小板聚集和黏附功能增强，血小板功能变化最明显的是 TXA2-PGI2系统[5，6]。TXA2、PGI2均为花生四烯酸（AA）的代谢产物，TXA2可使冠脉收缩和血小板聚集；PGI2的作用则可使冠脉扩张、血小板解聚；PGI2/TXA2的平衡是维持正常血小板功能和血液凝固的重要机制，也是保护内皮细胞免疫损伤的重要环节。cAMP作为血小板的第二信使对血小板功能的调节起重要作用。激活血小板的物质如凝血酶、TXA2、前列腺素内过氧化物（PGH2、PGG2）等可抑制腺苷环化酶（AC），降低血小板内cAMP水平，而升高cAMP的药物能抑制诱聚剂诱导的血小板聚集。cAMP主要通过降低细胞内Ca2+水平、抑制血小板肌球蛋白磷酸化、促进PGE2和PGI2的合成、抑制TXA2合成以及抑制凝血酶与其受体结合等抑制血小板的活化。

丹参（Salvia miltiorrhiza）为唇形科鼠尾草属多年生草本植物，具有扩张微血管，降低血液黏稠度，改善血液黏、浓、聚、滞状态，从而改善微循环的作用。复方丹参片主要由丹参、三七和冰片组成。丹参活血化瘀、清心安神、通脉止痛，为君药；三七活血化瘀、通经止痛，为臣药；冰片辛香走窜，能通窍止痛、醒神化浊、引经入药，为佐使药，三药共奏活血化瘀、理气止痛之功。复方丹参片有抗心肌缺血、改善血流变学、抗动脉硬化、抗心律失常、抗脑缺血损伤等作用。本试验发现，相对于正常组，冠状动脉粥样硬化患者血浆中cAMP、PGI2、PTGIS mRNA表达明显降低，TXA2表达明显升高。说明冠状动脉粥样硬化患者血小板的活化程度比正常人高，这与既往研究结果相符。复方丹参片组和丹参片组能明显升高冠状动脉粥样硬化患者血浆中cAMP、PGI2、PTGIS mRNA表达，降低血浆中TXA2的表达，且复方丹参片组的升高和降低幅度均明显大于丹参片组。说明二者均能抑制血小板的活化，对ACS的发病均具有防治作用，但复方丹参片抑制血小板的活化强于丹参片。总之，复方丹参片能更好地防治冠状动脉粥样硬化患者ACS的发生。

[1]Hamilton JR，Cornelissen I，Mountford JK，et al.Atherosclerosis proceeds independently of thrombin-induced platelet activation inApoE-/-mice[J].Atherosclerosis，2009，205（2）：427.

[2]Schafer A，Bauersachs J.Endothelial dysfunction，impaired endogenous platelet inhibition and platelet activation in diabetes and atherosclerosis[J].Curr Vasc Pharmacol，2008，6（1）：52.

[3]范卫明，张金凤，王连文，等.复方丹参滴丸预防治疗TIA的临床观察及对血浆cAMP、cGMP的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志，2003，1（10）：571.

[4]Matsumoto H，Naraba H，Murakami M，et al.Concordant induction of prostaglandin E2synthase with cyclooxygenase-2 leads to preferred production of prostaglandin E2over thromboxane and prostaglandin D2in lipopolysaccharide-stimulated ratperitoneal macrophages[J].Biochem Biophys Res Commun，1997，230（2）：110.

[5]Struthmann L，Hellwig N，Pircher J，et al.Prothrombotic effects of diclofenac on arteriolar platelet activation and thrombosis in vivo[J].J Thromb Haemost，2009，7（10）：1727.

[6]Maugeri N，Baldini M，Rovere-Querini P，et al.Leukocyte and platelet activation in patients with giant cell arteritis and polymyalgia rheumatica：a clue to thromboembolic risks[J].Autoimmunity，2009，42（4）：386.