临床化学检测系统比色杯携带污染检测及其处理措施

李清祥,雷 震,钟以文

(1.南昌市第三医院检验科,南昌 330009;2.南昌市第九医院检验科,南昌 330002;3.上犹县妇幼保健院检验科,江西 上犹 341200)

全自动化学分析仪是临床化学检测系统的重要组成部分,其比色杯的携带污染是临床化学检测不正确度的来源之一。笔者对南昌市第三医院检验科2009年11-12月开展的41项检测项目进行了比色杯携带污染检测,对严重污染项目进行了处理,取得了满意的效果,报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器及检测前准备

日本OLYMPUS公司的AU640全自动化学分析仪。检测前样品探针、试剂探针、混匀棒用10%的次氯酸钠及10%盐酸各浸泡20 min,用去离子水冲洗后用擦镜纸擦拭干净。比色杯经仪器W2冲洗程序用10%的次氯酸及10%盐酸各浸泡冲洗1遍,然后进行光电校准。

1.1.2 试剂与分析方法

ALT、AST、ALP、GGT、CHE、MAO、AFU、ADA 、CK 、α-HBDH 、LDH 为酶动力法 ,Urea、CRE、UA 、CO2、TC 、TG 、HDL-C、LDL-C 为酶法 ,GLU为葡萄糖氧化酶法,TBA为循环酶法,FRU为NBT法,AMY为糖苷底物法,CK-MB为抗体抑制、酶动力法,TP、ALB、Ca、Mg为化学比色法,P为紫外法,PA 、ApoA1、ApoB、Lp(α)、β2-MG 为免疫比浊法,以上产品均由山东潍坊三维生物工程集团有限公司提供;TBIL、DBIL为化学氧化法,由宁波美康生物科技有限公司提供;5′-NT为酶动力法,由宁波瑞源生物科技有限公司提供;GPDA、LAP、AAP为酶动力法,由长春汇力生物技术有限公司提供;RBP为免疫比浊法,由上海景源医疗器械有限公司提供;共41项检测项目。

1.2 混合血清

选取混合血清40 mL,充分混匀备用。

1.3 比色杯携带污染的筛检

以去离子水为试剂和样本检测10个单项,再检测41项检测项目各1遍,如此重复3次。仪器共153个比色杯全部使用1次,然后检测3项(如A、B、C项目)检测项目各连续检测 51次(如 A 1、A 2…A 51,B 1、B 2…B 51,C1、C 2…C 51)。各检测项目使用的比色杯前1次对应的检测项目分别是:前10个(如A1-A10)对应去离子水为参比项,后41个(如A11-A51)对应41项检测项目为筛检项。参比项前3个(如A1-A3)有试剂探针及混匀棒的携带污染,选择后7个(如A4-A10)测定值计算均值作为参比值(认为未受污染的对照值)。根据以下公式计算各项目携带污染率:

比色杯携带污染率=[(筛检项测定值-参比值)/参比值]×100%

比色杯携带污染率绝对值小于该项目室内质控变异系数(CV),被认为携带污染可接受;大于该项目室内质控变异系数,则需对污染进行确认。

1.4 比色杯携带污染的确认检测

以A项目为例,假如A项目要对来源于B、C、D、E项目的污染进行确认。以去离子水为试剂和样本检测 10个单项,连续检测B、C、D、E项目各10次(B1-B10、C1-C10、D1-D10 、E1-E10),再检测其他项目的污染来源项目,直到153个比色杯全部使用1次,然后连续检测A项目50次。以A4-A10的测定结果计算均值作为参比值;以A11-A20的测定结果计算均值作为污染来源于B项目的测定值,记为AB;以A21-A30的测定结果计算均值作为污染来源于C项目的测定值,记为AC;以A31-A40的测定结果计算均值作为污染来源于D项目的测定值,记为AD;以A41-A50的测定结果计算均值作为污染来源于 E项目的测定值,记为AE。根据以下公式计算携带污染率:

N为污染来源项目:比色杯携带污染率绝对值小于该项目室内质控变异系数(CV),被认为携带污染可接受;大于该项目室内质控变异系数,被认为携带污染严重,需进行处理。

1.5 比色杯携带污染的处理

进入全自动化学分析仪使用程序,设置比色杯前1次检测污染来源项目,下1次用于被污染项目检测时增加冲洗次数,冲洗液用去离子水、酸性洗液或碱性洗液。然后再用携带污染的确认检测方法检测处理效果。

2 结果

2.1 比色杯携带污染检测结果

在41项检测项目比色杯携带污染检测中,有2项携带污染率绝对值大于其室内质控CV,认为携带污染不能接受(表 1)。其余项携带污染率-2.1%～1.9%,绝对值均小于室内质控CV,认为携带污染可以接受。

2.2 比色杯携带污染的处理后检测结果

2项携带污染严重项,经设置增加2次去离子水冲洗后,携带污染率均降至可接受范围。见表1。

表1 携带污染严重项处理前后携带污染检测结果

3 讨论

临床化学检测系统试剂携带污染主要包括试剂探针、混匀棒及比色杯的携带污染(试剂探针及混匀棒携带污染检测另文报道)。因比色杯数量多(153个比色杯),严重污染常单个发生,重现性差,日常工作中不易被发现,必须设计特定的检测实验才能被检出[1]。

比色杯的携带污染不仅与化学分析仪的冲洗效率有关,同时还与相关检测项目的检测方法及试剂成分有关[2-3]。对于污染严重项目,可以通过加强冲洗,或者更换试剂或实验方法以减少污染,也可以通过固定比色杯使用范围避免污染[1]。但调整检测顺序的方法不能解决比色杯污染问题。

临床化学检测系统,随着使用时间的延长,比色杯内表面的黏附作用会增加,冲洗能力也会下降,其携带污染就会相应地增加[1]。因此,携带污染的检测与处理不是一劳永逸的。笔者认为可用如下方法监测:选择1个严重污染项目(如B项目对A项目产生污染),取消处理措施后进行携带污染的确认检测,以第一次携带污染的确认检测结果AB1、AB2…AB10分别计算携带污染率,然后计算携带污染率的均值)和标准差(s),以本次携带污染的确认检测结果分别计算携带污染率(x1、x2… x10),如果 x-2 s＜xn＜+2 s(xn表示 x1、x2… x10)认为携带污染率在可接受范围。总之,比色杯的携带污染可以实验检测,采用科学的处理方法可有效地降低携带污染的影响程度。

[1]邱玲,程歆琦,刘茜,等.自动生化分析仪携带污染来源检出及处理[J].医学研究杂志,2007,36(6):64-67.

[2]顾光煜,张葵.临床化学自动分析的携带污染与解除[J].临床检验杂志,2007,25(6):401-403.

[3]沈振亚,李智,左玫,等.M odular-PPI全自动生化分析仪试剂携带污染及其解决措施[J].临床检验杂志,2008,26(3):219-220.