原发性肝癌的中医药治疗机制研究

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(南京中医药大学基础医学院，江苏 南京 210046)

原发性肝癌(Primary Hepatic Carcinoma，PHC)是常见的恶性肿瘤之一，其死亡率在消化系统恶性肿瘤中列第三位。其起病隐匿，发展迅速，生存期短，严重危害人类的健康，手术存活率很低，而中医药治疗本病在控制病情发展，改善生存质量，延长生存期方面有独特的优势。尤其治疗机制更是倍受关注，现就中医药在抑制肝癌细胞增生、诱导肝癌细胞分化和凋亡、抑制肿瘤细胞活性、抑制肿瘤血管生成、逆转多药耐药等方面的作用作一概述。

1 中医药在抑制肝癌细胞增生中的作用

因为肿瘤细胞无限增殖是造成肿瘤生长、转移的主要原因，所以通过抑制肝癌细胞增殖或杀伤肝癌细胞可达到治疗肝癌的目的。李好好等[1]研究发现蛇床子素能够抑制人肝癌细胞生长，可起到治疗肝癌的效果。Auyeung等[2]发现黄连的抗癌作用，其主要成分小檗碱在肝癌细胞中激活基因酶(NAG-1),抑制细胞增殖。邹满意等[3]用0.25 mmol/L-8.00 mmol/L3-溴丙酮酸(3-BrPA)溶液处理SMMC-7721细胞，采用MTT法检测细胞增殖抑制情况,发现3-BrPA对SMMC-7721细胞的增殖有明显抑制作用。鲁玉辉等[4]研究显示不同浓度的叶下珠复方药物血清处理HePG2细胞后，Bcl-2、STAT3的rnRNA水平明显下调，阻断STAT3信号通路，抑制细胞增殖。另有研究[5-7]表明，化痰药皂荚，蝎毒多肽(PESV)、Salirasib(S-戊烯半胱氨酸类似物)也能抑制细胞增殖,起到治疗肝癌的作用。

2 中医药在诱导肝癌细胞分化或凋亡中的作用

张丰华等[8]发现柴胡皂甙D(SSD)显著诱导分化SMMC-7721细胞,且将其细胞周期明显阻滞于G0/G1期，其机制与上调P38MAPK，下调NF-κB表达有关。郭霞等[9]研究人肝癌BEL-7402细胞，发现随着黄芩苷浓度增加和作用时间的延长，BEL-7402细胞G1/G0期比例逐步增高，S期细胞减少，提示黄芩苷能诱导肝癌细胞分化。程向东等[10]将苦参碱作用人肝癌细胞HepG2后发现：苦参碱呈时间剂量依赖性诱导HepG2细胞凋亡，同时降低Bcl-2基因表达，提高Bax基因表达，促进Bax由胞质向线粒体移位，降解Caspase-3、Caspase-9。Wang N等[11]研究表明黄连素同时诱导细胞自噬和肝癌细胞凋亡，激活肝癌细胞凋亡的线粒体,提高MHCC97-L细胞Bax蛋白表达，细胞色素C释放到细胞质中，激活Caspase-3、Caspase-9。Yu YX等[12]发现熊果酸(UA)能抑制SMMC-7721细胞生长，诱导细胞周期停滞和细胞凋亡。DNA微阵列分析表明,64个基因表达明显上调或下调，p53的凋亡蛋白和Bax表达上调，而抗凋亡蛋白Bcl-2下调。江远等[13]对比研究斯芬与扶正解毒抗癌复方的抑瘤作用,发现二者通过上调p53蛋白的表达来抑制肿瘤细胞DNA合成,使细胞周期停滞在G0/G1期,阻滞细胞进入G2/M期,导致肝癌细胞凋亡。Auyeung KK等[14]研究发现黄芪总皂苷酶(AST)抗肿瘤特性，能诱导细胞凋亡，抑制肝癌细胞生长的表达，造成Caspases活性,下调抗凋亡蛋白Bcl-2和bcl-xL表达。王伟章等[15]发现Chk1siRNA能有效提高姜黄素诱导Huh7细胞的凋亡率,提示Chk1可以作为姜黄素治疗肝癌的有效增敏靶点。刘伟[16]研究发现中药晚癌康2号能影响人肝癌细胞Bet27402凋亡相关基因，Bcl22(抗凋亡因子)表达减少，Fas(死亡受体)表达增加,通过募集FADD和胱天蛋白酶原8，激活下游的胱天蛋白酶原3，导致病毒感染的细胞凋亡。另有研究[17-18]表明，马尾松树皮提取物(PMBE)和As2O3也能诱导肝癌细胞凋亡,达到治疗肝癌的目的。

3 中医药在抑制肿瘤细胞活性中的作用

端粒酶在癌细胞中表达率高达80%～90%，对维持癌细胞增殖有着重要作用。将源于端粒酶hTERT的抗原表位导入肝癌细胞中,能诱导hTERT特异性CTL免疫反应，有效杀死肝癌细胞[19-20]，因而端粒酶被认为是癌治疗的新靶标。张振宇等[21]实验研究表明皂荚提取物显著抑制人肝癌细胞bel-7402的增殖,抑制细胞端粒酶活性，调控癌基因活化与抑癌基因失活，阻止肿瘤细胞的无限繁殖。高浓度组对肿瘤细胞增殖的抑制作用更显著。其作用机制可能是：抑制活化的端粒酶，阻止细胞DNA的无限繁殖，提升抑癌基因活性,促进癌细胞凋亡。Moon DO等[22]研究表明萝卜硫素(SFN)具有防癌作用，通过SFN抑制端粒酶逆转录酶(hTERT)表达，下调细胞活性和端粒酶活性,同时也抑制Akt磷酸化(丝氨酸-473),从而抑制端粒酶逆转录酶的磷酸化。张晓春等[23]建立小鼠肝癌H22移植瘤模型,发现咖啡酸锗能显著抑制H22细胞端粒酶的活性,抑制其细胞增殖,诱导其细胞凋亡。谢长生等[24]发现养阴清热方安体优Ⅰ号也能抑制615小鼠HCa-F肝癌的端粒酶活性。另有报道[25]，瘦素(leptin)能通过端粒酶调控肝癌基因，发挥抗肝癌作用。GRN163及其类似物GRN163L是极其成功的寡核苷酸类模版抑制剂,其对肿瘤显示出很好的抑制作用，尤其对人体肝癌细胞[26]。此外研究表明一些以毒攻毒药物的有效成分如三氧化二砷、蝎毒亦发现对肝癌细胞端粒酶有较强的抑制作用[27]。

4 中医药在抑制肿瘤血管生成中的作用

任蕊等[28]研究发现膈下逐瘀汤联合环磷酰胺作用于Hca-f肝癌小鼠后，提高小鼠免疫功能，抑制肿瘤血管生成，具有抗肿瘤作用。有报道[29]复方苦参注射液通过抑制肿瘤血管形成，发挥抑癌作用。孙中杰等[30]发现白藜芦醇(Resveratrol,Res)可以抑制肿瘤组织中的新生血管的形成,降低肿瘤组织MVD,遏制肿瘤生长。樊讯等[31]研究发现麝黄消瘤方能抑制肝癌H22细胞的局部侵袭和淋巴系统转移,通过增强机体免疫力，减少肿瘤血管生成，抑制肿瘤的微血管密度(MVD)发挥作用。Song CC等[32]发现蜂毒素能够抑制裸鼠肝癌BEL-7402细胞移植瘤的生长，下调血管内皮生长因子,通过FGF和NF-κB的表达，抑制肝癌肿瘤血管的生成，达到治疗肝癌的目的。李松涛等[33]发现姜黄中3种姜黄色素单体能够抑制内皮细胞生长,抑制肿瘤血管生成。

5 中医药在逆转多药耐药中的作用

内在性肿瘤细胞对抗肿瘤药物的多药耐药(MDR)是肿瘤化疗失败的主要原因之一，因此,研究引起MDR的相关因素、作用机制及逆转MDR，提高肝癌化疗效果成为目前肝癌研究的热点[34]。孟晓燕等[35]观察蟾毒灵对人肝癌多药耐药BEL27402/52FU细胞增殖活性的影响，发现蟾毒灵对肝癌多药耐药BEL27402/52FU细胞无交叉耐药性,有增殖抑制作用，且有时间依赖性，其作用可能通过阻滞细胞周期进程和诱导细胞凋亡实现的。尹蓓等[36]研究耐5-氟尿嘧啶的人肝癌MDR细胞株BEL-7402/5-Fu使用0.23 mg/mL肝力注射液，结果提示肝力注射液可发挥逆转MDR的作用,主要是通过抑制细胞膜载体蛋白的药物外排机制。另有报道，血红素加氧酶(HO)能影响肝癌耐药细胞化疗敏感性，对治疗起到很好的作用[37]。魏莉等[38]也发现五味子可改变P-gp构象，从而逆转肝癌细胞株HepG2对长春花碱和阿霉素的耐药，达到治疗肝癌的效果。此外,目前已发现补骨脂、防己、橄香烯、丹参、贝母、川芎嗪等中药都具有逆转肿瘤多药耐药的作用[39-40]。

6 结语

综上所述，中医药治疗原发性肝癌的机制是多方面的。如何发挥中医药在肝癌治疗中的优势，寻找更有效的抗肝癌药物，并深入探讨其作用机制，将是今后研究的重点内容。相信随着更多的中医药抗肝癌机制被发现，必将在中医传统辨证论治的基础上提高中医药治疗肝癌的疗效。

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