硒对黄曲霉毒素B1中毒雏鸭血清抗氧化功能的影响

石达友，廖申权，郭铭生，刘 念，李鹏飞，郭世宁，唐兆新＊

（1.华南农业大学兽医学院，广东广州510642；2.广东省农业科学院兽医研究所，广东广州510640）

硒对黄曲霉毒素B1中毒雏鸭血清抗氧化功能的影响

石达友1，廖申权2，郭铭生1，刘 念1，李鹏飞1，郭世宁1，唐兆新1＊

（1.华南农业大学兽医学院，广东广州510642；2.广东省农业科学院兽医研究所，广东广州510640）

为观察黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1，AFB1）对试验雏鸭血清抗氧化功能的影响及亚硒酸钠对AFB1的颉颃效应，选用7日龄雏鸭90只，随机分为3组，每组30只。Ⅰ组为空白对照组，灌胃同等量二甲基亚砜；Ⅱ、Ⅲ组为试验组。Ⅱ组、Ⅲ组每天按0.1mg/kg体重剂量灌胃AFB1，同时给Ⅲ组每天按1mg/kg剂量灌胃亚硫酸钠，连续投药21d。试验期间，分别在给投药后7、14、21d采血，检测雏鸭血清抗氧化功能主要指标。结果显示，Ⅱ、Ⅲ组雏鸭血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶及谷胱甘肽还原酶活性与总抗氧化能力均显著低于Ⅰ组（P＜0.05），而丙二醛含量显著高于Ⅰ组（P＜0.05）；与Ⅱ组相比，经灌胃投用亚硒酸钠的Ⅲ组雏鸭血清抗氧化指标均得到明显的改善（P＜0.05）。结果表明，黄曲霉毒素B1可导致雏鸭血清抗氧化功能发生显著的变化，而硒能明显改善其引起的氧化损伤。

黄曲霉毒素B1；抗氧化功能；雏鸭；亚硒酸钠

＊通讯作者

黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）癌症研究机构划定为Ⅰ类致癌物，是一种毒性极强的剧毒物质，其中以黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1，AFB1）的毒性最强，长期摄入含有此类毒素的饲料可使动物发生肝癌等病变。研究结果表明，黄曲霉毒素B1对肝等主要脏器损伤的原因之一与AFB1造成机体自由基代谢发生变化有密切的关系。自由基与许多疾病的发生和发展联系密切，主要病理机制是通过生物膜中的多价不饱和脂肪酸的过氧化反应，导致脂质过氧化物增多，引起细胞损伤，致使细胞代谢功能障碍，并最终引起器官功能发生改变［1］。本试验旨在研究雏鸭灌胃一定剂量黄曲霉毒素B1后，对血清总抗氧化能力（total－antioxidant capacity，T－AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化氢酶（satalase，CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH－Px）、谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase，GR）、丙二醛（malondialdehytra，MDA）等抗氧化指标的影响，以及亚硒酸钠对黄曲霉毒素B1中毒的颉颃效应，为硒在兽医临床上防治畜禽黄曲霉毒素B1中毒提供理论依据。

1材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验用动物 1日龄三水白鸭商品代肉用雏鸭饲养至7日龄。

1.1.2 主要试剂与药品 二甲基亚砜、黄曲霉毒素B1均为美国Sigma公司产品；无水亚硒酸钠（Na2SeO3）由广州华农大实验兽药有限公司提供；T－AOC、SOD、CAT、GSH－Px、GR、MDA 检测试剂盒为南京建成生物工程研究所产品；其他试剂均为国产分析纯。

1.2 方法

1.2.1 试验用动物的分组处理 将饲养至7日龄的健康雏鸭，随机选90只分为3组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组），每组30只，公母各半。Ⅰ组为空白对照组，同等剂量二甲基亚砜灌胃；Ⅱ、Ⅲ组为试验组，每天以0.1 mg/kg黄曲霉毒素B1灌胃1次，连续投药21d，试验期间给Ⅲ组雏鸭每天以1mg/kg亚硒酸钠（Na2SeO3）灌胃1次。黄曲霉毒素B1以二甲基亚砜溶解，亚硒酸钠以水溶解，试验期共21d。

1.2.2 血样采集 试验雏鸭投药后第7、14、21天分别从各实验组中随机取5只雏鸭，用戊巴比妥麻醉，心脏采血分离血清待测。

1.2.3 检测方法 SOD活性采用黄嘌呤氧化酶法；T－AOC活性采用FRAP法；CAT活性采用紫外分光光度法；GSH－PX活性和GR活性采用DTNB法；MDA含量采用硫代巴比妥酸比色法。严格按检测试剂盒说明的操作步骤进行。

1.2.4 数据处理 采用SPSS13.0统计软件处理，数据以平均值±标准误（±SE）表示，应用Ducans新复极差检验法（DMRT法）比较各组间差异性。

2 结果

2.1 黄曲霉毒素B1对雏鸭血清T－AOC的影响

结果见表1，由表1可以看出，Ⅱ、Ⅲ组雏鸭血清T－AOC显著低于Ⅰ组（P＜0.05）；Ⅱ组雏鸭血清T－AOC显著低于Ⅲ组（P＜0.05）。

表1 各组雏鸭血清T－AOC变化（U/mL）Table 1 Changes of serum T－AOC in each group of ducklings

2.2 黄曲霉毒素B1对雏鸭血清SOD活性的影响

结果见表2，由表2可以看出，Ⅱ、Ⅲ组雏鸭血清SOD活性显著低于Ⅰ组（P＜0.05）；Ⅱ组雏鸭血清SOD活性显著低于Ⅲ组（P＜0.05）。

表2 各组雏鸭血清SOD活性变化（U/mL）Table 2 Changes of serum SOD activity in each group of ducklings

2.3 黄曲霉毒素B1对雏鸭血清CAT活性的影响

结果见表3，由表3可以看出，Ⅱ、Ⅲ组雏鸭血清CAT活性显著低于第Ⅰ组（P＜0.05）；Ⅱ组雏鸭血清CAT活性明显低于Ⅲ组，并在雏鸭投药14d后开始呈显著性差异（P＜0.05）。

2.4 黄曲霉毒素B1对雏鸭血清GSH－Px活性的影响

结果见表4，由表4可以看出，Ⅱ、Ⅲ组雏鸭血清GSH－Px活性显著低于Ⅰ组（P＜0.05）；Ⅱ组雏鸭血清GSH－Px活性显著低于Ⅲ组（P＜0.05）。

表3 各组雏鸭血清CAT活性变化（U/mL）Table 3 Changes of serum CAT activity in each group of ducklings

表4 各组雏鸭血清GSH－Px活性变化（U/mL）Table 4 Changes of serum GSH－Px activity in each group of ducklings

2.5 黄曲霉毒素B1对雏鸭血清GR活性的影响

结果见表5，由表5可以看出，Ⅱ、Ⅲ组雏鸭血清GR活性显著低于Ⅰ组（P＜0.05）；Ⅱ组雏鸭血清GR活性明显低于Ⅲ组，并在雏鸭投药14d后开始呈显著性差异（P＜0.05）（表5）。

表5 各组雏鸭血清GR活性变化（U/mL）Table 5 Changes of serum GR activity in each group of ducklings

2.6 黄曲霉毒素B1对雏鸭血清MDA含量的影响

结果见表6，由表6可以看出，Ⅱ、Ⅲ组雏鸭血清MDA含量显著高于Ⅰ组（P＜0.05）；Ⅱ组雏鸭血清MDA含量显著高于Ⅲ组（P＜0.05）。

表6 各组雏鸭血清MDA含量变化（nmol/mL）Table6 Changes of serum MDA content in each group of ducklings

3 讨论

自由基在化学上也称"游离基"，是指能独立存在，具有未配对电子的分子、原子、原子团、离子和功能基。正常生理状态下，机体内自由基不断地产生，也不断地被自由基清除系统清除，维持着动态平衡。但如果机体处于病理条件下，自由基的产生超出了自由基清除体系的能力时，就会造成自由基蓄积，给机体带来损伤。自由基通过与细胞和亚细胞器膜磷脂中多不饱和脂肪酸（PUFA）经链式或支链式反应生成一系列脂质过氧化产物，引起细胞结构和功能的破坏，其反应终产物MDA可与类脂、蛋白质形成交联物［2］。因此，测定 MDA含量及抗氧化系统功能可评估机体组织脂质过氧化损伤程度和氧自由基的生成情况［3－4］。史莹华等［5］等用含黄曲霉毒素0.1 mg/kg的日粮长期饲喂猪，结果显示，黄曲霉毒素使猪血清SOD、CAT、GSH－Px及 GR的活性均显著降低，脂质过氧化产物MDA的含量均显著增加。为减轻黄曲霉毒素对机体脏器自由基代谢系统的损伤，有关硒作为一种有效的抗氧化剂研究报道较多。硒存在于体内各种组织和体液内，它具有保护机体肝脏等重要脏器免受损伤的功能，因此硒也称为抗肝坏死保护因子，是阻止肝坏死的因素之一［6］。作为一种抗氧化剂，硒本身也可以清除体内代谢产生的氧自由基离子等，保护细胞膜及细胞器膜免受氧自由基的干扰和损害［7］。刘家国等［8］研究表明，富硒麦芽较亚硒酸钠能更显著地提升黄曲霉毒素B1中毒大鼠全血、肝等组织中GSH－Px活性，提高SOD水平。本试验结果显示，黄曲霉毒素B1导致雏鸭血清 T－AOC、SOD、CAT、GSH－Px和 GR活性显著降低，脂质过氧化产物MDA含量显著增高，表明黄曲霉毒素B1中毒后雏鸭血清抗氧化功能显著降低，自由基生成增多，导致机体血液及脏器脂质过氧化损伤。在给雏鸭灌胃投用亚硒酸钠后，其血清各项抗氧化指标均得到明显的改善，表明亚硒酸钠具有明显改善AFB1中毒雏鸭血清抗氧化功能受损的功效。

［1］ 唐兆新，高 洪，马吉飞，等.山羊内毒素休克时山莨菪碱对肾脏自由基代谢的影响［J］.南京农业大学学报，1998，21（1）：91－95.

［2］ Farber J L，Kyle M E，Coleman J B.Mechanisms of cell injury by activated oxygen species［J］.Lab Invest，1990，62（6）：670－679.

［3］ 王友令，唐兆新.氨基胍对内毒素血症肉鸡肝自由基损伤的影响［J］.中国兽医科学，2007，37（7）：610－613.

［4］ 唐兆新，李培英，王炫英，等.山羊内毒素休克诱发脂质过氧化作用及山莨菪碱对其影响的研究［J］.畜牧兽医学报，1998，29（2）：179－185.

［5］ 史莹华，许梓荣，王成章.黄曲霉毒素对猪生长性能及免疫和抗氧化指标的影响［J］.中国兽医学报，2007，27（5）：733－736.

［6］ 张革红，张成琰，赵和平.亚硒酸钠对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏抗氧化能力的影响［J］.中国药物与临床，2009，9（8）：707－708.

［7］ 刘永旺，刘海舰，王宝琴，等.富硒麦芽对链尿佐菌素诱发糖尿病大鼠糖脂代谢的影响［J］.南京农业大学学报，2004，27（3）：81－84.

［8］ 刘家国，赵 圣，刘海舰，等.富硒麦芽对黄曲霉毒素B1致肝肿瘤大鼠抗氧化作用及γ－GT酶活性的影响［J］.南京农业大学学报，2005，28（1）：85－89.

Effects of Selenium on Serum Antioxidant Function in Poisoning Ducklings Induced by Aflatoxin B1

SHI Da－you1，LIAO Shen－quan2，GUO Ming－sheng1，LIU Nian1，LI Peng－fei1，GUO Shi－ning1，TANG Zhao－xin1

（1.CollegeofVeterinaryMedicine，SouthChinaAgriculturalUniversity，Guangzhou，Guangdong，510642，China；
2.InstituteofVeterinaryMedicine，GuangdongAcademyofAgriculturalSciences，Guangzhou，Guangdong，510640，China）

In order to observe the influences of aflatoxin B1（AFB1）on serum antioxidant function in ducklings and study the antagonistic effect of sodium selenite on AFB1，seven day－old ducklings were used as experimental animals.All animals were divided into three groups（30animals each）.The ducklings in groupⅠwas only administrated in the same volume of DMSO with the other group as control.The ducklings in groupⅡand groupⅢ were administrated intragastrically in AFB1at a dose 0.1mg/kg body weight respectively.The ducklings in groupⅢ was administrated in sodium selenite at a dose 1mg/kg.All treatments were given once daily during 7－28day－old.The antioxidant function indicators were detected in ducklings serum on 7th，14th，21th day after treatment.The results showed that the activity of superoxide dismutase，satalase，glutathione peroxidase，glutathione reductase and total－antioxidant capacity significantly decreased in duckling's seral of groupⅡ，Ⅲcompared with groupⅠ（P＜0.05），and the level of malondialdehytra significantly increased（P＜0.05）.It showed a significant improvements in seral antioxidant function in ducklings of sodium selenite treated groupⅢcompared with groupⅡ（P＜0.05）.The results revealed that sodium selenite could ameliorate the duckling's seral antioxidant function change induced by aflatoxin B1.

aflatoxin B1；antioxidant function；duckling；sodium selenite

S859.8

A

1007－5038（2011）10－0032－04

2011－04－07

广东省农业攻关项目（2008B20700004）

石达友（1977－），男，四川成都人，讲师，博士，主要从事中兽医医药教学、科研工作。