特应性皮炎患者ECP、tIgE、sIgE、EOS的检测及意义

赵俊芳，李桂珍，赵宏丽，李孟娟

（天津市中医药研究院附属医院，天津300120）

特应性皮炎（atopic dermatitis,AD）是皮肤科常见的过敏性疾病之一，与遗传因素相关，患者及家族成员多具有异位素质，可伴哮喘、过敏性鼻炎、枯草热等病，尚有血清IgE增高及外周血EOS增高等特征，其发病机制尚不清楚。在这类疾病中，EOS被各种因素激活并释放某些强碱性颗粒蛋白，主要有嗜酸细胞阳离子蛋白(eosinophil cationicprotein，ECP)、主要碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）等，其中ECP的毒性作用最强，是EOS激活和过敏性疾病病情活动的标志之一[1]。但ECP在AD患者中是否增高及其与病情、IgE和外周EOS增高是否相关，各家报道不一。本研究通过测定AD患者ECP 水平，及血清总 IgE（total IgE,tIgE）、特异性 IgE（specific IgE,sIgE）、外周血EOS计数水平，探讨其在AD发病中的作用及其临床应用中的意义。

1 对象与方法

1.1 对象 AD患者101例，均来自我院2008年6月—2009年10月门诊及住院患者，其中男48例，女53例，平均年龄（31.2±11.7）岁，病期 5个月～35年，平均（15.3±11.5）年，均符合AD诊断标准[2]。AD病情严重度分值标准参照欧洲AD特别工作组确定的SCORAD（severe scoring of atopic dermatitis）系统，观察其主要症状（包括瘙痒、睡眠、皮损面积、皮损严重程度），记录SCORAD积分。人选患者20d内未用过糖皮质激素或其他抗组胺类药物，无寄生虫感染史，无自身免疫性疾病等。40名健康献血者为正常对照组，均无过敏史，于2008年10月取血,男21名，女19名，年龄在4～71岁之间，平均年龄（35.21±12.21）岁。

1.2 实验方法

1.2.1 血清ECP测定 真空管静脉取血3mL，室温下放置60min后，3 000r/min离心15 min，血清放-20℃冰箱保存。采用美国ADL公司的ECP双抗夹心ELISA检测试剂盒进行检测。

1.2.2 血清tIgE检测 采用天津沃克生物技术公司IgE双抗夹心试剂盒对AD患者及正常对照组进行血清tIgE的检测。

1.2.3 EOS计数 采用EOS直接计数法。

1.2.4 血清sIgE的检测 采用德国MEDIWISS公司出品的变应原检测试剂盒，体外半定量免疫印迹法分析检测，可同时独立的检测各种常见的变应原。Ⅰ级以上即为阳性，分级标准见表1。

表1 sIgE的分级标准

1.3 统计学处理 数据应用SPSS10.0软件，患者的ECP、tIgE、EOS测定值用±s表示，两样本测定值比较采用均数t检验，计数资料组间比较采用χ2检验，血清ECP与tIgE值、EOS、sIgE、SCORAD积分之间的关系采用相关性检验。

2 结果

2.1 AD患者及正常对照组血清ECP、tIgE、EOS检测结果 见表2，经组间t检验显示AD患者的血清ECP值明显高于正常对照组（P<0.01），血清tIgE亦明显高于正常对照组（P<0.05），均有统计学意义，而101名AD患者EOS计数结果为0.05～0.75×109/L，与正常对照组相比无统计学意义（P>0.05）。

2.2 血清sIgE检测结果 见表3。101例患者中69例患者至少对一种变应原呈阳性反应（68.31%），有45例患者检出对2～7种变应原呈阳性反应（44.56%），正常对照组的sIgE检测全部为阴性，两组比较差异有统计学意义（χ2=10.96，P<0.05）。吸入性变应原中，户尘螨（35.64%），柏、蟑螂的阳性率（20.79%）较高，而食物变应原中腰果（18.82%）的阳性率较高。另外，吸入性变应原阳性率高于食物变应原阳性率（χ2=8.73，P<0.05）。

表2 AD患者的ECP、tIgE、EOS检测结果 （±s）

表2 AD患者的ECP、tIgE、EOS检测结果 （±s）

组别AD患者组正常对照组t ECP（ng/mL）15.33±6.03 8.96±3.74 9.32 TIgE（IU/mL）213.44±64.67 201.5±20.21 2.03 EOS(×109/L)0.296±0.171 0.305±0.181 0.166

表3 101例AD患者血清sIgE检测结果 例

2.3 AD患者疾病症状评分与ECP水平、tIgE、sIgE、EOS计数的相关性 AD患者SCORAD积分为48.12±13.24；tIgE与SCORAD积分的相关系数r=0.089；EOS与SCORAD积分的相关系数r=0.093；血清ECP与EOS相关系数r=0.065；它们之间的相关均无统计学意义（P>0.05）。AD患者组血清ECP水平与SCORAD积分的相关系数r=0.612，说明ECP值与其症状体征评分呈正相关趋势，且相关具有统计学意义（P<0.01）。ECP与tIgE的相关系数r=0.210，其相关性也具有统计学意义（P<0.05），ECP与sIgE的相关系数r=0.571，说明ECP值与sIgE呈正相关趋势，且相关具有显著性意义（P<0.01）。

3 讨论

AD是皮肤科常见的过敏性疾病之一，与遗传因素相关，IgE、EOS和肥大细胞在其发病过程中起着十分重要的作用。

不少学者[3]认为患者的ECP水平、病情与外周血的EOS数量无关，升高的ECP水平反映了整个EOS池的活化状态，而在炎症反应部位聚集的EOS与升高的ECP水平有关，反映了皮肤的EOS的活化状态。因此，血清ECP水平被认为是一个更为有效而可靠的反映AD患者病情的指标。本研究AD患者血清ECP较正常对照组显著增高，与国外报道[4]结果一致，反映了AD患者外周血和皮损炎症部位的EOS处于激活状态，另外ECP可能参与了皮损的炎症损伤过程。本研究还显示，AD患者外周血EOS计数无明显增高，而血清ECP水平较正常对照组显著增高，且两者的相关性无统计学意义，提示AD患者中ECP变化可能较EOS计数变化更灵敏，更能反映EOS的激活状态和脱颗粒分泌蛋白的能力，ECP是EOS激活后分泌物质的表达形式，同时局部炎症部位的EOS浸润也可能引起血清ECP水平的增高。

AD组血清tIgE虽比正常组升高，但与症状严重程度无相关性，表明tIgE不能反映机体已被致敏的程度，打破了传统上认为tIgE、EOS是变态反应性疾病病情活动指标的观念。变应原sIgE在AD的发病过程中起重要作用，Ⅰ型变态反应的机制为变应原通过皮肤、黏膜屏障进入机体，刺激单核巨噬细胞系统，产生特异性反应素IgE，后者吸附于肥大细胞或嗜碱粒细胞表面的IgE受体，使这些细胞处于致敏状态，当被致敏的肥大细胞再次暴露于同一致敏物时，则在肥大细胞或嗜碱粒细胞发生抗原抗体反应，细胞脱颗粒、释放组胺等介质，作用于靶器官，发生变态反应，测定变应原sIgE对该病的病因诊断和治疗具有重要意义。我们研究发现，68.31%的患者对某种变应原过敏，吸入性变应原阳性率较高，而sIgE与ECP水平成正相关（P<0.05），说明sIgE与EOS的活化状态密切相关。检测变应原sIgE可了解病因及发病机制，同时可使患者有目的地规避变应原，从而得到更好的治疗。

ECP与SCORAD积分呈正相关，说明ECP才真正可能作为AD病情活动及治疗监测的有效指标。测定ECP血清浓度的增高和变化，有助于了解EOS的活化程度，干扰EOS的激活可能是改进对这类疾病治疗的一种方式。但Murat-Susic＇等[5]检测AD患儿ECP水平、EOS、tIgE时发现AD严重程度与ECP水平、EOS、tIgE的相关性较弱，这些指标只能作为病情监测的辅助手段。故ECP水平与AD病情的相关性还有待于进一步探讨。

[1]Heil PM,Maurer D,Klein B,et al.Omalizumab therapy in atopic dermatitis:depletion of IgE does not improve the clinical course-a randomized,placebo-controlled and double blind pilot study[J].J Dtsch Dermatol Ges,2010,8:990-998.

[2]顾恒，金泓.特应性皮炎诊断标准的评价[J].中华皮肤科杂志，2000，33(4):222-226.

[3]Kato M,Yamada Y,Maruyama K,et al.Serum eosinophil cationic protein and 27 cytokines/chemokines in acute exacerbation of childhood asthma[J].Int Arch Allergy Immunol,2010,152:62-66.

[4]Park JH,Choi YL,Namkung JH,et al.Characteristics of extrinsic vs.intrinsic atopic dermatitis in infancy:correlations with laboratory variables[J].Br J Dermatol,2006,155:778-783.