一种新型的通用型检测器——电喷雾检测器(2)

刘立洋 刘 肖

(戴安中国有限公司，北京，100029)

一种新型的通用型检测器
——电喷雾检测器(2)

刘立洋 刘 肖

(戴安中国有限公司，北京，100029)

续上期

3 几类典型应用

电喷雾检测器的应用范围广泛，可以用于正相、反相、超临界流体、体积排阻、HILIC等多种模式，检测小分子、大分子、极性化合物、非极性化合物、阴离子、阳离子、两性离子等多种物质.

3.1 无紫外吸收或弱紫外吸收化合物的检测

很多无紫外吸收的物质之前检测非常复杂，如糖、氨基酸等需要先进行衍生处理，但改用CAD则可直接测定，灵敏度高且可用于超高效液相进行快速分离，如图5.而那些弱紫外吸收的物质，尤其是成分复杂的生化样品(如脂质体［1］、血样、尿样)，通过CAD检测可直接全部测定且灵敏度高.比如过去对磷脂的分析多采用HPLC-ELSD法，其特点是散射光的对数响应值与组分的质量的对数呈线性关系，但此对数关系变异性较大，且灵敏度较低，最低检测限在50—100 ng之间.而CAD在磷脂的分析检测方面显示出了非凡的能力，文献报道甘油三酯、胆固醇等类脂物质的最低检测限可达1 ng［2］，如图6所示.

图5 CAD检测3种单糖

图6 CAD检测脂质体中的磷脂

3.2 天然产物的测定

海藻油作为一种天然产物用途广泛，既可作为保健品食用又可作为工业用燃料.但由于其成分复杂且相似组分较多很难用一种检测器同时检测，CAD的出现解决了这一难题，如图7.类似的还有芥末油、核桃油等油脂也开始采用CAD进行油类指纹图谱的分析.

图7 海藻油CAD检测图

3.3 生物活性物质的检测

自然界有很多物质具有天然的生物活性，可起到抗菌、抗癌、延缓衰老等作用，如皂苷、大豆异黄酮、花青素等.人们也已开始研究这些活性成分加工、提取的相应方法［3］.而这些活性物质也大都没有紫外吸收，CAD的出现使检测较之前使用 ELSD更加准确、方便，见图8［4］.

图8HPLC检测10种柴胡皂苷CAD(A)和ELSD(B)对比图

3.4 混合物中的降解产物和微量杂质

混合物中含有多种成分，除主要组分外，还有少许微量杂质，另外这些成分中可能有些性质不稳定，而产生部分降解物，要将这些组分同时检测，可以选用CAD来完成，如图9.另外，有些杂质和降解产物很难找到标准品，也可以利用CAD对化合物响应的一致性，通过其它标准品来对这些降解物进行相对定量.

图9 CAD检测托普霉素(上样量4 μg)、氨基羟丁基卡那霉素(上样量6 μg)、新霉素(上样量6 μg)及其杂质

3.5 同时检测阴阳离子

同一样品中的阴阳离子同时检测，使得药物中的活性成分和反离子可以一次测定，如图10［5］，大大提高了检测效率.这对很多加入赋形剂和平衡离子的药物分析具有重要意义，如盐酸乙胺丁醇片中盐酸乙胺丁醇的含量［6］.

图10 CAD同时检测25种常见药物离子

3.6 配合质谱定量分析

很多物质的降解或代谢产物没有紫外吸收也难以找到标准品进行定性定量，这时可以利用CAD联合质谱共同测定.如图11，红霉素没有发色基团无法用紫外检测器检测，可以选用CAD对红霉素及其代谢产物进行检测，如在被测物中加入内标还可以根据CAD进样质量相同响应值相似的特性通过内标的响应值按比例推算代谢物的相对质量，并通过质谱确定其结构，更好地摸清红霉素在体内代谢变化的全过程，为后续的研究奠定基础.

图11 CAD与质谱配合检测红霉素

［1］姜庆伟，杨瑞，梅兴国.HPLC-电雾式检测器(CAD)检测法测定脂质体中磷脂含量［J］.中国药学杂志，2007，42(23):1794-1796

［2］MOREAU R A.The analysis of lipids via HPLC with a Charged Aerosol Detector［J］.Lipid Technology，2009，21(8/9):191-194

［3］白长财，柴兴云，高晓燕，等.HPLC-CAD联用于三七药材皂苷类成分提取工艺优化［J］.中国中药杂志，2009，34(6):677-680

［4］Han Young Eoma，So-Young Parkb，Min Kyung Kima，et al.Comparison between evaporative light scattering detection and charged aerosol detection for the analysis of saikosaponins［J］.Journal of Chromatography A，2010，1217:4347-4354

［5］Zhang K，Dai L，Chetwyn N P.Simultaneous determination of positive and negative pharmaceutical counterions using mixed-mode chromatography coupled with charged aerosol detector［J］.Journal of Chromatography A，2010，1217:5776-5784

［6］高维，方平飞，李焕德，等.HPLC-CAD法测定盐酸乙胺丁醇片中盐酸乙胺丁醇的含量［J］.中南药学，2008，7(5):338-340