水貂肉毒梭菌毒素中毒的诊治



水貂肉毒梭菌毒素中毒的诊治

李昆朋 （山东省青州市畜牧局 262500）

2012年3月初，山东省潍坊市一水貂养殖场的水貂突然发病。该养殖场现共有1800只貂，其中300只为种貂。此次发病半月左右，已死亡20~30只。死亡情况与水貂的日龄及性别差异无明显关联性。初期，病貂有咳嗽现象，2~3d后开始不食，不食3~6d后出现死亡。从发生不食情况开始到死亡为止，病貂粪便颜色依次呈黄绿色，黄色，棕色。大多数病貂死后身体不发生僵硬。该养殖场饲喂用料为冻鱼、冷冻鸡肠、膨化玉米，冻鱼仅用水冲洗，冷冻鸡肠解冻后不清洗，并且在制成湿料后添加了少量食用保鲜剂。

此次发病后曾在潍坊市不同地区就诊过2次，首次检查确诊为血虫病及肠炎。二次检查，经解剖观察诊断为肠炎。曾用大观霉素、黄芪多糖、电解多维、磺胺甲氧嘧啶，无明显药效。氨苄西林钠与地塞米松磷酸钠合用，仅对部分病貂有一定疗效，且出现病情反复。经两次诊治后疗效不佳，特送来进行检验。本病通过临床症状、病理解剖及实验室检查，疑似水貂肉毒梭菌毒素中毒病。

1 临床症状

病貂精神沉郁，不食，被毛杂乱无光泽，口腔黏膜略有苍白，咳而不喘，粪便呈黄绿色、棕色，尿液颜色偏黄，大多病貂死后身体不发生僵硬。

2 剖检症状

肺部充血水肿，局部淤血坏死；肝脏肿胀，呈土黄色；肾脏肿胀，苍白；脾脏肿胀；膀胱内有尿液潴留，色泽偏黄；机体各处淋巴结未见明显的病理性变化；胃肠轻微鼓气，未见明显出血点。

3 实验室诊断

3.1 细菌分离培养 取水貂吃剩的饲料及胃内容物，用灭菌的缓冲液稀释，均分为2份。一份不加任何其他处理，另一份90℃加热30min以杀死细菌而非芽孢。待处理过的样品冷却至室温后，将两份样品同时接种于已制备好的庖肉培养基，经12h后观察，石蜡冲起，肉渣变黑腐败恶臭。第5d后挑取具有典型特点的菌落接种于卵黄琼脂平板，进行分离纯化，35℃厌氧培养48h，挑取48h培养后的单菌落进行涂片镜检，观察并记录菌落形态等。

3.2 生化反应 取分离纯化后的培养物进行明胶穿刺培养，同时使用葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、乳糖、蔗糖生化管进行生化实验，观察并记录试验结果。

3.3 动物接种 取病死水貂胃内容物及剩余饲料按照1：2用量加入缓冲液，无菌环境下充分研磨，室温下放置1~2h充分浸出后，滤纸过滤，将滤液分为两份。一份不加任何处理，作为试验组，另一份100℃加热30min灭活毒素，作为对照组。

取体况相似的健康小白鼠6只，3只腹腔注射实验组液体0.5ml/只，3只腹腔注射对照组液体0.5ml/只。将6只小鼠置于同一适宜的环境下饲养，观察并记录试验结果。另取体况相似的公鸡2只(体重约为2kg)，分别于左眼内接种试验组液体，右眼内接种对照组液体，用量均为0.2ml，观察并记录试验结果。

4 诊断

4.1 细菌分离培养结果 卵黄琼脂平板上生长出的菌落具有典型的形态特点，其菌落及周围培养基表面覆盖着特有的虹彩样(或珍珠层样)薄层。挑取厌氧培养48h后的典型单菌落染色镜检，可见革兰氏阳性大杆菌，两端纯圆，芽胞位于菌体近端呈网球拍状，带芽胞的菌体呈半透明状，单个或成短链排列存在。

4.2 生化结果 细菌能沿穿刺线生长，培养基出现液化，产气。生化管反应结果见表1。

4.3 接种动物的反应 （1）小白鼠接种后2h，试验鼠出现肌肉麻痹并逐渐进入瘫痪状态，3只试验组小鼠分别于腹腔注射后4、4.5h后死亡，剖检观察，病变典型。（2）小公鸡接种后约3h，一只左眼因麻痹呈半闭合状，用小棒敲击刺激仍无法睁开，右眼正常。接种后约4h另一只鸡也出现上述症状，直至次日中午才恢复正常。

表1 生化管反应结果

5 确诊

综合临床诊断以及实验室诊断结果，确诊这起水貂发病致死的原因为肉毒梭菌毒素中毒。

6 防治

（1）立即停喂已变质或疑似变质的饲料。（2）鸡肠、鱼、肉在饲喂前，用0.3%KMnO4浸泡3~5min，沥干水分后，用清水冲洗一遍。（3）在饲料中拌入一定量的解毒剂。按照1kg/50kg饲料的浓度，向饲料中拌入葡萄糖。并按照临床使用量加入氟苯尼考、强力霉素。另外，添加一定量的复合VB，在饲料临近饲喂时加入VC，不可过早加入，防止其失效。（4）及时清理、清洗绞肉设备。每次使用后，先用清水冲洗干净，再用季铵盐类消毒剂进行清洗。

7 讨论

水貂肉毒梭菌中毒是由于食入了含有肉毒梭菌毒素的动物性饲料所引起的一种急性中毒病，该病以呈现运动中枢神经麻痹及延脑麻痹为特征的症状，若不及时地采取治疗措施，易引发患病动物的大批死亡。

肉毒梭菌是一种能够产生芽胞的革兰氏阳性大杆菌，并能产生多种外毒素。肉毒梭菌的芽孢分布广泛，动物肠道、粪便、腐败的尸体、变质的饲料中都经常含有肉毒梭菌及其芽孢。肉毒杆菌芽胞抵抗力很强，干热180℃5~15min、湿热100℃5h、高压蒸气121℃ 30min才能被杀死。该菌能在动物尸体、肉类、饲料中繁殖，并能在繁殖过程中产生6种外毒素，毒力相当，但抗原性不同。肉毒梭菌主要依靠其强烈的外毒素致病。据报道，肉毒毒素是已知最强烈的毒素，毒性比氰化钾强104倍。其对酸的抵抗力特别强，胃酸溶液24h内不能将其破坏，故可被胃肠道吸收。本病的潜伏期为4~20d，患病动物多数突然发病，迅速死亡。

本病主要发生在气温较高的夏季，但并无明显的季节性。水貂肉毒梭菌中毒的传染源主要是被该菌污染的饲料。水貂吃了含有肉毒梭菌及其毒素的饲料就会发生中毒现象。然而含有毒素的饲料在外观上并无明显变化，不易被发现。这种被污染的饲料即使被存放于低温冷库中也不能破坏其中的毒素，后期饲喂的时候仍然会引起中毒。因此，该病发病无明显的季节性，亦不分年龄、性别，均易感。

处理肉毒梭菌中毒病的关键在于预防，动物性饲料要保证新鲜、无污染。对于冷藏的肉类及其副产品，在冷藏前应保证无污染，购买回来后要快解冻、快加工，防止二次污染。

饲料加工所使用的机械设备等应及时清洗干净，经常消毒。通过对饲养员的询问了解到，该养殖场饲喂用料为冻鱼、冷冻鸡肠、膨化玉米，冻鱼仅用水冲洗，冷冻鸡肠解冻后不清洗，并且在制成湿料后添加了少量食用保鲜剂。首先，冷冻的鱼、鸡肠均未经过彻底的清洗消毒，简单的冲洗并不能去除其中可能存在的细菌与毒素，而后又不经过高温煮熟直接饲喂生食，给水貂患病带来很大隐患。其次在未确认解冻后的鸡肠、鱼是否被污染时就添加了保鲜剂，保鲜剂对动物性饲料新鲜度的维持的同时，也为可能存在的病原菌提供了良好的生存、繁殖环境，因此，在水貂饲养过程中，不要仅凭想象进行操作，要考虑清楚操作的利弊。有条件的养殖场可于每年定期进行一次预防接种。倘若发生此病，应立即停止饲喂可以饲料，对症治疗，避免造成更大的损失，有条件的可以使用对应抗原型的抗毒素进行肌肉注射。

（2012–07–31）

S828.92

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1007-1733(2012)11-0065-02