ERK 2的表达与宫颈癌的生物学行为的关系

马志刚，安 燕

（1.河北省保定市第三医院骨二科，河北保定 071000；2.河北大学附属医院妇产科，河北保定 071000）

ERK 2的表达与宫颈癌的生物学行为的关系

马志刚1，安 燕2

（1.河北省保定市第三医院骨二科，河北保定 071000；2.河北大学附属医院妇产科，河北保定 071000）

宫颈肿瘤；免疫组织化学；细胞外信号调节MAP激酶类

细胞外信号调节激酶（extracellular singnalregulated kinase，ERK）是丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）的一个主要亚族。该酶被激活后成为磷酸化的ERK（p-ERK），其持续激活是细胞通过G1期和G1/S转化所必需的。p-ERK介导信号由胞浆传递到胞核，通过转录调节激活多种癌基因，引起细胞的恶性转化［1］。p-ERK可能通过重组细胞支架、改变细胞形态［2］及促进细胞质中基质金属蛋白酶和尿激酶纤维蛋白酶原激活剂的表达［3］，从而促进肿瘤细胞的浸润和转移。本研究应用免疫组织化学SP法检测ERK2在宫颈癌中的表达，并分析其与宫颈癌临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取70例河北省保定市第三医院2006年1月—2012年5月经手术切除、术后病理证实为宫颈癌组织标本，术前均未经放化疗。患者年龄28～69岁，平均（46.5±9.3）岁，≤45岁21例，＞45岁49例。其中Ⅰa期6例，Ⅰb期44例，Ⅱa期20例；鳞癌56例，腺癌14例；高分化癌19例，中分化癌30例，低分化癌21例；伴淋巴结转移13例，无淋巴结转移57例。同时收集22例因子宫肌瘤行全子宫切除术，术后证实为慢性宫颈炎组织标本作为对照，患者年龄35～53岁，平均（44.0±5.3）岁。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂：兔抗人ERK2多克隆抗体购于武汉博士德公司。二氨基联苯胺显色试剂盒和SP（光谱纯试剂）免疫组织化学试剂盒均购于福州迈新生物技术开发有限公司。

1.2.2 结果判定：免疫组织化学染色按SP试剂盒说明书进行，PBS代替一抗作阴性对照，已知阳性片作阳性对照。将石蜡包埋的蜡块制成4μm切片，ERK2的阳性表达为在细胞质中出现棕黄色颗粒，采用半定量积分法，每片随机选取具有代表性的10个高倍视野（×400）进行计数，每个视野计数100个肿瘤细胞，阳性细胞数≤10％、＞10％～30％、＞30％～75％、＞75％分别记为0分、1分、2分、3分。根据着色程度无黄色记0分、淡黄色1分、黄色2分、棕黄色3分。综合判定取着色程度和阳性细胞百分数分值之积，≤1分记为阴性，＞1～2分记为弱阳性＞2～4分记为阳性，＞4分记为强阳性。

1.3 统计学方法：应用SPSS16.0软件进行数据分析，计数资料比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

ERK2在慢性宫颈炎组织中阳性表达率13.6％（3/22），在宫颈癌组织阳性表达率为74.3％（52/70），主要表达于胞质中。ERK2在宫颈癌组织中的阳性表达率明显高于慢性宫颈炎组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。

ERK2表达与患者宫颈癌临床分期、组织分化程度及淋巴结是否转移有关（P＜0.05），而与患者年龄、病理类型无关（P＞0.05），见表1。

表1 ERK2阳性表达与宫颈癌临床病理特征的关系

3 讨论

在细胞的增殖、分化和肿瘤形成过程中，Ras/Raf/MEK/MAPK通路发挥了重要作用，而Ras/Raf/MEK/ERK是研究最多、最经典的级联。ERK家族由ERK1～7［4］等7位成员组成。ERK通过磷酸化为p-ERK而被活化。国外研究［5］发现，活化的ERK可调节多种癌基因和细胞周期基因的表达，阻止细胞凋亡，促进细胞增殖。ERK蛋白在除了脑组织以外的各种上皮组织来源的肿瘤中表达水平均高于正常组织［6］。ERK2蛋白在多种肿瘤组织中均有表达，如鼻咽癌、乳腺癌、胃癌及卵巢癌等，并与肿瘤的发生发展密切相关。本研究结果显示，ERK2在宫颈癌组织中的阳性表达率为74.3％，明显高于正常宫颈组织的13.6％，差异有统计学意义（P＜0.05）；随宫颈癌分期的增加，其阳性表达率明显增高（P＜0.05）；有淋巴结转移者阳性表达率明显高于无淋巴结转移者（P＜0.05）；随宫颈癌组织分型的降低，ERK2的阳性表达率明显增高（P＜0.05）。说明ERK2与宫颈癌的发生发展有关。同时也发现ERK2的阳性表达率与年龄及病理分型无关，这与周建维等［7］在上皮性卵巢组织中的研究结果相似。

总之，肿瘤的发生是多种因素相互作用的结果，宫颈癌也不例外。ERK级联通路涉及的基因较多，作用机制复杂，产生较多的生物学效应，可能通过多种途径、多步骤促进肿瘤细胞的增殖和转移。随着对ERK2的深入研究，ERK2有望成为判断宫颈癌预后的肿瘤标志物，并为宫颈癌治疗的靶基因奠定基础。

［1］DELMASC，MANENTI S，BOUDJELAL A，et al.The p42/p44 mitogen-antivated protein kinase activation triggers p27Kip1 degradtion independently of CDK2/cyclin E in NIH 3T3 cells［J］. JBiol Chem，2001，276（37）：34958-34965.

［2］SEGER R，KREBSEG.The MARK signaling cascacle［J］.FASEB J，1995，9（9）：726-735.

［3］SHIN EY，MA EK，KIM CK，etal.Src/ERK but not phospholipase D is involved in keratinocyte growth factor-stimulated secretion of matrixmetalloprotease-9 and urokinase-type plasminogen activator in SNU-16 human stomach cancer cell［J］.J Cancer Res Clin Oncol，2002，128（11）：596-602.

［4］POSAS F，TAKEKAWA M，SAITO H.Signal transduction by MAP kinase cascades in budding yeast［J］.Curr Opin Microbiol，1998，1（2）：175-182.

［5］MORIM，MIMORI K，SHIRAISHI T，et al.p27 expression and gastric carcinoma［J］.Nat Med，1997，3（6）：593-596.

［6］孙秀娣，牧人，周有尚，等.中国胃癌病死率20年变化情况分析及其发展趋势预测［J］.中华肿瘤杂志，2004，26（1）：4-9.

［7］周建维，干宁悦，张伟江，等.上皮性卵巢肿瘤组织MKP-1及p-ERK1/2蛋白表达的研究［J］.分子生物学报，2009，6（3）：3-4.

（本文编辑：刘斯静）

R711.74

B

1007-3205（2013）11-1460-02

2012-11-05；

2013-02-17

马志刚（1975-），男，河北顺平人，河北省保定市第三医院主治医师，医学学士，从事骨外科疾病诊治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.11.040