孔雀痛风并发败血性大肠杆菌感染的诊断

陈 蓉，张建荣，邓长林，李明杰，程家球，金 铃，陈 楠，章小小，王国栋

（江苏省南京市红山森林动物园兽医院，江苏 南京210028）

孔雀具有较高的观赏价值，成为动物园主要饲养的禽类之一。2009年，某动物园出现孔雀痛风［1］。2011年12月，该园刚引进一群3月龄孔雀，突然出现呼吸症状并迅速死亡，发病率为100%，死亡率为50%。经临床剖检和实验室诊断，初步诊断为禽痛风并发败血性大肠杆菌感染。

1 病史

2011年12月，某动物园引进的48只3月龄孔雀，突然出现甩脖、张口呼吸、嗜睡等临床症状，发病率达到100%。病死孔雀剖检后，均发现气管有痰样栓塞，心脏、肝脏和肾脏有大量石灰样沉着物，心冠脂肪出血，肌胃内膜条状出血，肾脏肿大，肠道少量出血点。连续5d注射阿米卡星、肾肿解毒药添加于饮水，并减少蛋白质饲料比例后，基本控制住病情。至此，其死亡率达到50%（24/48）。

2 实验室诊断

2.1 细菌分离鉴定及药敏试验 无菌取肝、脾、心接种至血平板中，37℃培养24h。从心脏分离出表面光滑，边缘整齐，白色、中等大小的溶血菌落。该菌在麦康凯平皿上为红色菌落。经革兰染色镜检，为阴性杆菌；经生化试验，该菌发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇，并产酸产气，M.R.试验阳性，V－P试验阴性，不分解尿素，不产生硫化氢。以上结果，表明分离出溶血性大肠杆菌。

将病菌接种至血平皿，并选取常规药敏纸片贴于平皿上，37℃培养16h后观察。结果显示，只有阿莫西林、阿米卡星能产生较为明显的抑菌圈，其他药敏纸片均没有形成抑菌圈。

2.2 病毒检测 无菌取心脏、肝、脾和肾等病料研磨离心后，接种11日龄SPF鸡胚37℃孵育，另设无菌生理盐水接种鸡胚为对照。每6h照蛋1次，收取尿囊液并观察鸡胚病变。盲传鸡胚4代，结果显示，均未出现鸡胚出血、死亡、蜷曲胚、侏儒胚等异常现象，收取尿囊液也无血凝性。

2.3 病理切片观察 无菌取心、肝和肾脏等病料用10%甲醛溶液进行固定后，制作石蜡切片，H.E.染色并在光学显微镜下观察各脏器的病理变化。切片观察结果，显示心肌细胞形态结构正常，心外膜见片状炎性渗出及炎症细胞浸润（见中插彩版图1）。肝脏组织内见多处团块状分布的红色絮状物，周围见多核巨细胞反应，局部见淤胆（见中插彩版图2）。肾组织也见多处团块状分布的红染絮状物，周围也见多核巨细胞反应，局部出现肉芽肿，多数肾小管内见红染的蛋白管型（见中插彩版图3、4）。

3 讨论

3.1 禽痛风是由于机体尿酸产生或排泄异常，导致高尿酸血症，并以尿酸盐沉积在关节、胸腹腔等脏器表面和其他间质组织中的一种疾病，临床有内脏型和关节型两种［3］。孔雀痛风的报道中以内脏型为主［1－2］。该群孔雀均发现肾脏肿大明显，同时尿酸盐主要沉积于心、肝和肾等内脏器官，并未在关节处沉积。在肾脏病理切片中，局部出现肉芽肿，这与禽痛风病理切片的报道相同［7］，表明该群孔雀患有内脏型痛风。

引起禽痛风的病因较多，如遗传因素、高蛋白质饲料、传染性因素等［3］。而引起孔雀痛风多因摄入过多的蛋白质饲料［1－2］。此次，饲料的粗蛋白含量正常（不高于17%）。该群孔雀隔离饲养，不与游客接触，不存在之前该动物园报道游客投喂高蛋白食物的现象［1］。圈养孔雀常为终生饲养，活动场所较小，导致运动少，容易囤积脂肪。因此，其饲料中蛋白质比例是否需要降低标准；由于刚从外地引进，是否存在潜在的传染性因素导致痛风的发生，都还有待探查。

3.2 孔雀感染大肠杆菌的报道较多，临床上多与新城疫混合感染，并造成严重损失［4－5］。该园区在孔雀发病前，已注射禽流感、新城疫疫苗，但未曾监控抗体水平。2005年，Shengwang Liu等从健康孔雀体内分离出鸡传染性支气管炎病毒［6］，而该病毒是禽痛风的主要病因之一［3］。此次，群体均表现呼吸道症状和尿酸盐沉积，发病率、死亡率较高，因此及时排除病毒病是本次诊断的关键之一。本次病毒检测，主要通过传统鸡胚分离方法，排除以上禽流感、新城疫、鸡传染性支气管炎3种病毒病，对于疾病治疗明确了方向。

3.3 此次运用细菌分离培养及病理切片的方法进行诊断，了解了病菌在脏器中的分布。肝、肾存在红色絮状物，结合细菌培养结果，表明该絮状物为大肠杆菌。该菌引起心、肝脏、肾脏炎症反应，其中肾脏炎症较严重。以上表明，大肠杆菌在感染孔雀后，已经通过血液侵入到全身，形成较为严重的败血症。另外，由存在红染的蛋白管型现象，这表明肾功能障碍较为严重。这种肾功能障碍，一方面加重机体负担，另一方面不利于抗生素治疗，使得本次混合感染的发病率、死亡率均高于孔雀单独感染大肠杆菌或禽痛风的报道［4－5］。在平时饲养过程中，控制饲料蛋白质比例，适当增加粗纤维，增强动物抵抗力，同时做好环境卫生工作。在暴发大肠杆菌病时，要根据药敏试验制定用药方案，避免耐药性的产生。在治疗禽痛风时，要注意保肝护肾。

［1］ 邓长林，马小萍，李明杰，等.孔雀痛风的诊治［J］.养禽与禽病防治，2010，9：39.

［2］ 王玉田，巴宏宇，石英男，等.孔雀痛风的诊断与治疗［J］.养禽与禽病防治，2008，4：23.

［3］ 雷鹏，郭小权，曹华斌，等.禽痛风的研究进展［J］.中国家禽，2011，33（20）：48－51.

［4］ 崔焕忠，周佰祥，张辉，等.孔雀致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验［J］.中国兽医杂志，2011，47（10）：33－34.

［5］ 贾松涛，刘星，宋庆华，等.孔雀新城疫继发大肠杆菌病的诊治［J］.中国畜牧兽医，2011，38（12）：205－206.

［6］ Shengwang Liu，Jianfei Chen，Jinding Chen，etal.Isolation of avian infectious bronchitis coronavirus from domestic peafowl（Pavo cristatus）and teal（Anas）［J］.Journal of General Virology，2005，86：719－725.

［7］ 王龙涛，葛晨霞，贾博寅，等.肉鸡痛风病的诊断及病理形态学观察［J］.中国畜牧兽医，2010，37（10）：181－182.