免疫学快速检验技术的应用与进展

李燕琼

免疫学检验是指将免疫学方法应用于医学领域, 通过抗原和抗体的反应原理, 利用各种标记和示踪技术来检测和分析人体的免疫功能和疾病的一门学科［1］。传统的免疫学检验即血清学实验, 在鉴定病原菌和检测血清抗体方面有出色表现, 但由于操作步骤繁琐, 耗时较长, 易受干扰而出现误判［2］。为了克服这些缺点, 人们不断改进血清试验, 并将分子生物学等各种科学理论和技术应用到免疫学检验中来, 使免疫学快速检验技术得到了极大的发展。作者就此做一些总结和回顾, 现报告如下。

1 传统的免疫学快速检验技术

传统的免疫学检验采用的抗体来源和检测标本多是血清, 故也称血清学试验, 是通过观察和测定待测样品中沉淀物的形成、扩散、凝集及溶血现象, 来分析抗原或抗体的有无及含量［3］。传统的免疫学快速检验技术有很多种, 其中比较有代表性的是梅毒快速诊断试验, 比如快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)和甲胺苯红不加热血清反应素实验(TRUSR)。这些实验方法简单快速, 应用性好, 但容易受到其他疾病的干扰而呈现假阳性, 因此需要做确证试验后才可做最后的诊断。

2 免疫胶体金技术

胶体金的原理是利用胶体金的吸附功能, 蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面, 从而完成胶体金标记。胶体金对各种蛋白质都有很好的吸附效果, 试验不需要特殊设备、操作简单、检测快速、灵敏度高。但胶体金技术只能定性,不能定量, 容易出现假阴性；严重溶血、脂血标本、黄疸等疾病会对结果产生干扰, 影响判断, 因此应注意试剂的质量控制和确证试验。较常见的免疫胶体金技术有快速免疫层析试验(ICA)(如早孕诊断条)和快速斑点免疫渗滤试验(DIFA)。

3 化学发光免疫分析技术(CLTA)

传统的化学发光免疫分析技术(CLTA)是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的检测分析方法。该技术有灵敏度高、特异性强、线性范围宽, 标记物稳定、无放射性污染、检测速度快等优点。但因化学分析本身的不特异性, 制约了整个方法的使用。

电化学发光免疫分析(ECLIA)直接以［Ru(bpy)3］2+标记抗体, 反应时标记物在电极表面由电化学引发的特异性化学反应发光, 且此反应过程可以周而复始进行, 从而实现循环发光和多次发光, 具有控制精确、重复性好的优点［4］。而且该方法使用电磁场自动分离结合态和游离态, 从而简化了检测步骤, 明显提高了检测速度。不足的是试剂价格偏高,很难在基层医疗机构中普及开来。

4 免疫荧光技术

免疫荧光技术又称荧光抗体技术, 是将荧光物标记在抗体上, 在抗原抗体反应后, 呈现荧光反应, 从而对抗原进行定位的技术。其与化学发光的区别在于：化学发光是利用化学反应产生光, 无需光源；荧光是光致发光, 需要外加光源。荧光抗体技术特异性强、灵敏度高、速度快。但因存在非特异性染色, 影响判定结果的客观性, 且实验步骤复杂, 推广上还有一定难度。

5 免疫酶技术

免疫酶技术是以酶为标记物, 在抗原抗体反应后, 加入底物, 使底物与酶发生显色反应, 以此对抗体或抗原进行定性和定量分析。最常用的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA), 它将抗原或抗体固定到某种固相载体表面, 使抗原抗体反应在载体表面进行, 使步骤简化, 灵敏度提高。酶联免疫吸附实验是目前免疫法快速检验领域的前沿课题。

6 生物传感器技术

生物传感器是一门将生物活性材料与物理化学换能器有机结合的交叉学科。生物传感器用感受器感应生物物质并将其浓度用转换器转换为电信号, 根据电信号进行快速、微量的分析。生物传感器具有灵敏度高、速度快、成本低等优点,得到了广泛的应用。目前常见的生物传感器有酶电极传感器、DNA传感器等。

7 生物芯片技术

生物芯片技术是通过微缩技术, 将大量生物识别分子按预先设置的排列固定于硅芯片或玻璃芯片等载体表面, 利用生物分子的特异性的相互作用(如核酸杂交反应, 抗原抗体反应等), 对蛋白质、细胞等生物分子进行准确、快速的分析,以测定其组分和存量的检测技术。生物芯片技术常用于疾病筛查和早期诊断。

综上所述, 随着科学的进步, 各种新技术新材料被运用到医学领域, 免疫学检验技术也得到了飞快的发展。更快速、更准确、更简单的免疫学快速检验技术将不断涌现并得到广泛的临床应用。

［1］ 惠小夏, 王东霞.免疫学快速检验技术的应用与进展.内蒙古中医药, 2011, 10(15):104-109.

［2］ 李晓军, 武建国.关于免疫学检验定位的思考.临床检验杂志,2011, 33(05):114-119.

［3］ 尹东光, 贺佑丰, 刘一兵, 等.标记免疫分析技术的发展点评.标记免疫分析与临床, 2011, 15(21):47-51.

［4］ 谭顺莲, 庄健海.罗氏MODULAR全自动电化学发光免疫分析仪应用评价.国际医药卫生导报, 2010, 14(5):44-47.