不同性别BALB/c裸小鼠血液学及脏器系数观测

刘 科, 刘盛来, 杨 林, 邱毅文, 邝少松, 王 刚

(广东省医学实验动物中心, 佛山 528248)

不同性别BALB/c裸小鼠血液学及脏器系数观测

刘 科, 刘盛来, 杨 林, 邱毅文, 邝少松, 王 刚

(广东省医学实验动物中心, 佛山 528248)

目的 测定SPF级BALB/c裸小鼠血液学参数，脏器重量、脏器系数，并进行性别间比较。方法 选取10周龄SPF级BALB/c裸小鼠80只，雌雄各半。40只采集血液，运用血液分析仪测定血液常规指标；40只活体称重，采集血液，运用全自动生化分析仪测定血生化指标，并采集脏器测定脏器重量，计算脏器系数。结果 雌雄裸小鼠测定项目比较，①雄性白细胞数、平均血红蛋白量、血小板、淋巴细胞显著高于雌性、红细胞显著低于雌性(P＜0.01)，红细胞平均体积、血小板压积与雌性差异达到显著水平(P＜0.05)。②雄性碱性磷酸酶、肌酸激酶、天门冬氨酸氨基转移酶显著高于雌性(P＜0.01)，白蛋白显著高于雌性(P＜0.05)。③雄性体质量、肾、膀胱脏器重量显著高于雌性，差异达到极显著水平(P＜0.01)，肝脏器重量显著高于雌性，差异达到显著水平(P＜0.05)；雌雄裸小鼠脏器系数相比较，雄性裸鼠的心、脾脏器系数显著低于雌性，差异达极到显著水平(P＜0.01)，雄性肾的脏器系数显著高于雌性，肺、肾上腺的脏器系数显著低于雌性(P＜0.05)。结论 性别对SPF级BALB/c裸小鼠血液学参数、脏器重量和脏器系数有一定的影响。

裸小鼠; 血液学参数; 脏器重量; 脏器系数

裸小鼠是先天性的免疫缺陷动物，目前已成为医学、生物学研究领域不可缺少的实验动物模型，特别在肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等实验方面，有重要的应用价值[1，2]。BALB/c裸小鼠发现较早，使用量较多的小鼠品系，也是我国使用最广泛的裸小鼠品系。本中心2007年从国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心引进BALB/c裸小鼠，通过保种和扩群繁育，已建立裸小鼠规模化生产种群，并向科研、企事业单位规模化生产和供应。目前，有关SPF级BALB/c裸小鼠血液学指标和脏器系数报道较少。为建立成年SPF级BALB/c裸小鼠生物特性数据，本研究测定了10周龄不同性别裸小鼠的血液学指标、脏器重量、脏器系数，并进行了比较分析，以供医学、生物学研究时参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SPF级BALB/c 裸小鼠80只，10周龄，雌雄各半，由广东省医学实验动物中心提供[SCXK(粤) 2008-0002]。饲养在屏障设施中，空气洁净度7级,室温20℃～25℃, 湿度40%～70%, 每日光照12 h,动物自由采食和饮水。饲料主要营养成分: 粗蛋白23.5%, 粗纤维3.8%, 粗灰分7.3%, 粗脂肪5.4%，钙1.2%，磷0.85%，钠0.25%。饲料60Co辐照灭菌、垫料经高压消毒处理，饮用水是净化水系统制备的纯净水(RO水)，添加盐酸酸化处理，pH=2～3。

1.2 主要仪器

德国赛多利斯电子分析天平(BS223S), 上海安亭科学仪器厂生产的低速大容量离心机(TDL-5-A),日本光电公司生产的全自动血液分析仪(CelltacEMEK-7222K)和意大利爱康公司生产的全自动血液生化分析仪(ECHO)，用激光计数法检验。

1.3 测定方法

血液生化值测定: SPF级BALB/c裸小鼠40只，10周龄，雌雄各半，空腹12 h，麻醉后摘眼球采血，静置0.5 h，然后3 000 r/m in离心10 m in，取血清，测定血液生化指标; 血液学指标测定: SPF级BALB/c 裸小鼠40只，10周龄，雌雄各半，空腹12 h，然后活体称重，麻醉后摘眼球采血，放入EDTA 抗凝管，立即测定血常规参数值; 体质量和脏器系数测定: 血液学指标采集裸小鼠颈椎脱臼处死，迅速解剖取出主要脏器(心、肝、脾、肺、胃、肾、肾上腺、膀胱、睾丸、子宫、卵巢)，剔除脂肪和筋膜，用滤纸吸干表面的液体，心脏需剪开，用滤纸吸干血液，称重并计算脏器系数。脏器系数(%)=脏器重量(g)/体质量(g)×100。

1.4 统计方法

所有测定值均以(x-± s)表示，采用独立样本t检验，取α=0.05作为检验水平。

2 结果

2.1 血液常规值

血液常规值测定结果如表1和表2所示，22个测定项目，雄性裸鼠的白细胞数(WBC)、平均血红蛋白量(MCH)、血小板(PLT)、淋巴细胞(LY)显著高于同龄雌性，红细胞显著低于雌性，差异达到极显著水平( P＜0.01)，雄性裸鼠的红细胞平均体积(MCV)、血小板压积(PCT)于雌性差异达到显著水平(P＜0.05)，其余差异无显著性(P＞0.05)。

2.2 血液生化值

血液常规值测定结果如表3所示, 12个测定项目, 雄性裸鼠的碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)显著高于雌性，差异达到极显著水平(P＜0.01), 雄性裸鼠的白蛋白(ALB)显著高于雌性，差异达到显著水平(P＜0.05), 其余8项生化指标差异无显著性(P＞0.05)。

2.3 脏器重量和脏器系数

裸小鼠脏器重量、脏器系数测定结果见表4，雌雄裸小鼠体质量相比较，雄性裸小鼠体质量显著高于雌性, 差异达到极显著水平(P＜0.01)。雌雄裸小鼠脏器重量相比较, 雄性裸鼠的肾、膀胱显著高于雌性, 差异达极到极显著水平(P＜0.01), 雄性裸鼠的肝显著高于雌性, (P＜0.05), 其他脏器差异无显著性(P＞0.05)。雌雄裸小鼠脏器系数相比较, 雄性裸鼠的心、脾显著低于雌性(P＜0.01), 雄性裸鼠的肾显著高于雌性, 肺、肾上腺显著低于雌性。差异达到显著水平(P＜0.05), 其他脏器系数差异无显著性(P＞0.05)。

表1 10周龄SPF级BALB/c 裸小鼠血液学常规数值测定结果

表2 10周龄SPF级BALB/c裸小鼠白细胞分类测定结果

表3 10周龄SPF级BALB/c裸小鼠血液生化值测定结果

表4 10周龄SPF级BALB/c 裸小鼠脏器重量、脏器系数测定结果

3 讨论

目前，国内报道有关SPF级BALB/c裸小鼠的主要脏器系数，血液及血生化等指标正常值的文献报道较少，而这些指标是实验动物重要的生物特性，是实验所需的基础数据及科学研究与应用的重要依据，对病理、毒理、药理等相关实验有重要的参考意义[3～4]。其中血液生理生化指标与代谢、营养及健康状况有着密切的联系，能反映动物机体生理机能，健康状况[5]。本实验对不同性别成年SPF级裸小鼠血液生理生化值测定结果显示，雌、雄裸小鼠之间大多血液学指标趋于一致，但有一些指标差异有显著性。其中雄性裸小鼠的白细胞数、红细胞、平均血红蛋白量、血小板显著高于雌性(P＜0.01), 这可能与雌雄裸小鼠生长快慢，生理状态有关。3周龄后, 雄性增长速度高于雌性, 10周龄时雄性体质量显著高于雌性，差异达到显著水平。生化指标碱性磷酸酶、肌酸激酶、天门冬氨酸氨基转移酶、白蛋白差异有显著性，且雌性均值低于雄性，可能与雌雄裸小鼠营养水平差异或测定样本个数偏少有关。张修彦等[6]对6～8周SPF级BALB/c小鼠血常规和血生化测定结果也表明，雌雄白细胞数、红细胞、血红蛋白、白蛋白差异达到极显著水平。以上结果说明，性别对裸小鼠血液学指标有一定的影响。

动物脏器重量及脏器系数可衡量动物功能状态，并能反映动物发育状况[7～8]。本实验10周龄雌性裸小鼠体质量显著小于雄性，差异达到极显著水平，雌性心、肝、肺、胃、肾、膀胱脏器重量小于雄性脏器重量，雌雄脏器重量与体质量大小之间相一致，一些研究也表明实验动物的体质量与主要脏器存在线性关系[9～10]。雌雄裸鼠脏器系数心、脾差异达到极显著水平，肾、肺、肾上腺差异达到显著水平。练有文等[11]报道, 5～6周龄SPF级BALB/c裸小鼠雌雄脏器重量体质量、心、肝、肾差异达到显著水平，脏器系数肾、肾上腺差异达到显著水平, 与本文一致, 脏器重量和脏器系数其他差异指标变化与本文有所不同，可能是动物年龄、饲养方式、动物数量、检测方法不同有关。

本实验测定10周龄雌雄SPF级裸小鼠血液生理生化值、脏器重量、脏器系数, 并进行了统计分析。实验结果表明, 不同性别对血液生理生化值、脏器重量、脏器系数有一定的影响。实验实测数据及差异比较结果提供给科研人员参阅、参考。而动物血液生理生化值、脏器重量、脏器系数除受性别的影响, 还受年龄、营养水平、生活环境、生理状况等影响[12], 这些影响因素有待进一步研究。

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Q95-33

B

1674-5817(2014)01-0065-03

10.3969/j.issn.1674-5817.2014.01.015

2013-06-13

广东省科委啮齿类实验动物种子中心-华南分中心的建设(2008A060202002)

刘 科(1981-), 男, 畜牧师, 硕士, 现从事实验动物研究工作, E-mail: kygene123@126.com

王 刚, 高级兽医师, E-mail: wangzhy2005@21cm.com