瑞香狼毒的化学成分

陈健勇，刘光明，张 于，郝小江，何红平

（1.大理学院药学与化学学院，云南大理 671000；2.中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室，昆明 650201；3.云南中医学院药学院，昆明 650500）

瑞香狼毒的化学成分

陈健勇1，2，刘光明1，张 于2，郝小江2，何红平3*

（1.大理学院药学与化学学院，云南大理 671000；2.中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室，昆明 650201；3.云南中医学院药学院，昆明 650500）

目的：对瑞香狼毒（Stellera chamaejasme）的化学成分进行研究。方法：采用硅胶柱层析、C18反相柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和HPLC等方法分离瑞香狼毒的化学成分，采用波谱技术鉴定化合物的结构。结果：从中共分离鉴定了5个化合物，分别是：（2R，3S）-3-（3，4-二甲氧基苄基）-2-（3，4-亚甲二氧基苄基）丁内酯（1）、haplomyrfolin（2）、双氢芝麻素（3）、异新狼毒素A（4）和瑞香狼毒素B（5）。结论：化合物1～3为首次从该植物中分离得到。

瑞香狼毒；瑞香科；化学成分

瑞香狼毒（Stellera chamaejasme），为瑞香科狼毒属多年生草本植物，产我国北方各省区及西南地区〔1〕。其干燥根茎为中药“狼毒”的正品〔2〕。其性味苦平，有逐水祛痰，破疾杀虫之功效〔3〕。现代报道瑞香狼毒具有较强的抗肿瘤、抗HIV、抗菌和杀虫等多种生理活性〔4-8〕。瑞香狼毒的化学成分主要是双二氢黄酮、香豆素、木脂素和二萜等〔9〕。为了进一步发现其生物活性成分，我们对产于云南的瑞香狼毒药材进行了化学成分的研究。从瑞香狼毒根部的乙酸乙酯萃取部位中分离得到5个化合物，分别为（2R，3S）-3-（3，4-二甲氧基苄基）-2-（3，4-亚甲二氧基苄基）丁内酯（1）、haplomyrfolin（2）、双氢芝麻素（3）、异新狼毒素A（4）和瑞香狼毒素B（5）。其中，化合物1～3为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

1.1仪器与试剂Bruker AM-400核磁共振仪，以四甲基硅烷（TMS）为内标；ESI质谱由Waters 2695 HPLC–Thermo Finnigan LCQ Advantage型离子阱质谱仪测定；HPLC为Agilent 1100；凝胶Sephadex LH-20（Pharmacia）；柱色谱用硅胶和GF254型薄层层析硅胶均为青岛海洋化工厂产品；所用有机试剂均为工业纯，使用前重蒸；显色剂有碘显色剂和2% H2SO4的乙醇溶液（喷洒后加热显色）。

1.2试验材料瑞香狼毒于2011年10月采自云南省香格里拉县，由中科院昆明植物研究所陈渝老师鉴定为瑞香狼毒（Stellera chamaejasme L.），样品标本（No.H20111006）存放于中国科学院昆明植物研究所。

2 提取与分离

瑞香狼毒根干燥，粉碎，取样8.0 kg用甲醇回流提取3次，每次4 h；合并提取液后进行减压蒸馏回收甲醇得到浸膏，将浸膏加水稀释后用乙酸乙酯萃取4次，得浸膏500 g。将浸膏用500 g硅胶（60～80目）拌样，2.5 kg硅胶（200～300目）装柱，依次用石油醚∕丙酮（v/v=9∶1，8∶2，7∶3，6∶4）和氯仿∕甲醇（v/v=9∶1，8∶2，0∶1）分为A-M等13段，在经过硅胶柱层析、C18反相柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析以及HPLC等分离手段反复分离纯化，从F段中分离得到化合物1（23.2 mg），2（9.6 mg），3（5.3 mg），5（20.3 mg）；从K段中分离得到化合物4（5.2 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：淡黄色油状；C21H22O6；ESIMS m/z 371〔M+H〕+，393〔M+Na〕+，409〔M+K〕+，763〔2M+Na〕+；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.75（1H，d，J=8.1 Hz，H-5"），6.70（1H，d，J=7.7 Hz，H-5'），6.60（1H，d，J=1.7 Hz，H-2'），6.57（1H，d，J=7.7 Hz，H-6'），6.56（1H，d，J=8.1 Hz，H-6"），6.47（1H，d，J=1.7 Hz，H-2"），5.92（2H，s，3'-OH2O-4'），4.14（1H，dd，J=9.2，7.1 Hz，Ha-4），3.87（1H，dd，J=9.2，7.4 Hz，Hb-4），3.84（3H，s，-OCH3），3.82（3H，s，-OCH3），2.95（1H，dd，J=14.0，5.1 Hz，Ha-5），2.84（1H，dd，J=14.0，7.0 Hz，Hb-5），2.52（4H，m，H-2，3，6）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：178.5（s，C= O），149.0（s，C-3"），147.8（s，C-3'，4"），146.4（s，C-4'），131.3（s，C-1'），130.4（s，C-1"），122.2（d，C-6'），120.6（d，C-6"），111.6（d，C-2"），111.2（d，C-5"），109.4（d，C-2'），108.1（d，C-5'），101.0（t，3'-OCH2O-4'），71.2（t，C-4），55.9（q，-OCH3），55.7（q，-OCH3），46.4（d，C-2），41.2（d，C-3），38.2（t，C-6），34.7（t，C-5）。以上数据与文献〔10〕的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为（2R，3S）-3-（3，4-二甲氧基苄基）-2-（3，4-亚甲二氧基苄基）-丁内酯。

化合物2：淡黄色无定形粉末；C20H20O6；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.74（1H，d，J=7.9 Hz，H-5），6.65（1H，d，J=7.4 Hz，H-5'），6.53（1H，brs，H-2'），6.52（1H，d，J=7.4 Hz，H-6'），6.45（1H，d，J= 7.9 Hz，H-6），6.39（1H，brs，H-2），5.87（2H，s，3-OCH2O-4），5.51（1H，s，-OH），4.08（1H，t，J=7.3 Hz，Ha-9'），3.81（1H，overlapped，Hb-9'），3.71（3H，s，3'-OCH3），2.89（1H，dd，J=13.5，4.8 Hz，Ha-7），2.83（2H，dd，J=13.7，6.7 Hz，Hb-7），2.48（4H，m，H-7'，8'，8）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：178.5（s，C-9），147.8（s，C-3），146.5（s，C-3'），146.4（s，C-4），144.4（s，C-4'），131.3（s，C-1），129.7（s，C-1'），122.2（d，C-6），121.2（d，C-6'），114.5（d，C-5'），110.9（d，C-2'），109.5（d，C-2），108.2（d，C-5），101.0（t，3-OCH2O-4），71.2（t，C-9'），55.8（q，3'-OCH3），46.4（d，C-8），41.3（d，C-8'），38.3（t，C-7'），34.7（t，C-7）。以上数据与文献〔11〕的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为haplomyrfolin。

化合物3：淡黄色油状；C20H20O6；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.86（1H，s，H-2），6.78～6.65（5H，m，arom.H），5.97（2H，s，-OCH2O-），5.95（2H，s，-OCH2O-），4.82（1H，d，J=6.2 Hz，H-7），4.07（1H，dd，J=8.5，6.7 Hz，Ha-9'），3.92（1H，dd，J=10.7，7.0 Hz，Ha-9），3.78（2H，m，Hb-9，9'），2.90（1H，dd，J=14.0，5.3 Hz，Ha-7'），2.72（1H，m，Hb-7'），2.55（1H，dd，J=13.4，10.6 Hz，H-8），2.39（1H，m，H-8'）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ:147.8（s，C-3），147.7（s，C-4），146.8（s，C-3'），145.9（s，C-4'），137.0（s，C-1'），134.1（s，C-1），121.4（d，C-6'），119.0（d，C-6），108.9（d，C-5'），108.3（d，C-5），108.0（d，C-2'），106.2（d，C-2），101.0（t，3-OCH2O-4），100.9（t，3'-OCH2O-4'），82.8（d，C-7），72.9（t，C-9'），60.8（t，C-9），52.6（d，C-8），42.3（d，C-8'），33.2（t，C-7'）。以上数据与文献〔12〕的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为双氢芝麻素。

化合物4：淡黄色无定形粉末；C30H22O10；ESIMS m/z 431〔M-H〕-；1H NMR（400 MHz，acetone-d6）δ：11.98（2H，s，5，5′′-OH），7.13（4H，d，J=8.4 Hz，H-2′，6′，2′′′，6′′′），6.85（4H，d，J=8.4 Hz，H-3′，5′，3′′′，5′′′），5.94（2H，d，J=1.8 Hz，H-8，8′′），5.83（2H，d，J=1.8 Hz，H-6，6′′），5.06（2H，brs，H-2，2′′），3.81（2H，brs，H-3，3′′）；13C NMR（100 MHz，acetone-d6）δ：196.5（s，C-4，4′′），167.8（s，C-7，7′′），165.3（s，C-5，5′′），164.0（s，C-9，9′′），159.4（s，C-4′，4′′′），130.6（d，C-2′，6′，2′′′，6′′′），128.5（s，C-1′，1′′′），116.4（d，C-3′，5′，3′′′，5′′′），102.5（s，C-10，10′′），97.1（d，C-6，6′′），95.8（d，C-8，8′′），81.9（d，C-2，2′′），48.4（d，C-3，3′′）。以上数据与文献〔13〕的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为异新狼毒素A。

化合物5：褐色无定形粉末；C33H28O10；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：11.96（1H，s，-OH），11.92（1H，s，-OH），7.06（4H，d，J=8.2 Hz，H-2′，6′，2′′′，6′′′），6.90（4H，d，J=8.1 Hz，H-3′，5′，3′′′，5′′′），6.08（1H，d，J=2.2 Hz，H-6′′），5.99（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），5.97（1H，d，J=2.2 Hz，H-8′′），5.88（1H，d，J=1.8 Hz，H-8），5.97（2H，d，J=11.1 Hz，H-2，2′′），3.79（6H，s，4′，4′′′-OCH3），3.88（3H，s，7-OCH3），2.84（2H，d，J= 12.0 Hz，H-3，3′′）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：196.6（s，C-4′′），196.0（s，C-4），167.9（s，C-7′′），164.6（s，C-7），164.2（s，C-5′′），164.0（s，C-5），162.9（s，C-9′′），162.5（s，C-9），160.4（s，C-4，4′′），129.2（d，C-2′，6′，2′′′，6′′′），128.4（s，C-1′，1′′′），114.2（d，C-3′，5′，3′′′，5′′′），103.1（s，C-10′′），103.0（s，C-10），96.7（d，C-6′′），95.3（d，C-6），95.2（d，C-8′′），94.1（d，C-8），83.4（d，C-2，2′′），55.7（q，4′，4′′′-OCH3），55.4（q，7-OCH3），49.6（d，C-3，3′′）。以上数据与文献〔14〕的波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为瑞香狼毒素B。

〔1〕中国科学院中国植物志编委会.中国植物志:52卷〔M〕.北京:科学出版社，1999:397.

〔2〕卓兆莲，高英，李卫民，等.中药狼毒的本草考证:为“瑞香狼毒”正名〔J〕.时珍国医国药，2007，18（12）:3119–3122.

〔3〕江苏新医学院.中药大辞典:下册〔M〕.上海:上海人民出版社，1977:1898.

〔4〕冯威健，川哲郎，吉田光二.瑞香狼毒提取物尼地吗琳的抗癌活性〔J〕.中华肿瘤杂志，1995，17（1）:24-26.

〔5〕ASADA Y，SUKEMORI A，WATANABE T，et al.Stell⁃eralides A-C，novel potent anti-HIV daphnane-type diter⁃penoids from Stellera chamaejasme L〔J〕.Organic Letters，2011，13（11）:2904-2907.

〔6〕ASADA Y，SUKEMORI A，WATANABE T，et al.Isolation，structure determination，and anti-HIV evaluation of tigli⁃ane-type diterpenes and biflavonoid from Stellera chamae⁃jasme〔J〕.Journal of Natural Products，2013，76（5）:852-857.

〔7〕刘耀红，李福华，周乐，等.瑞香狼毒根丙酮提取物对几种动物病原菌的抑制作用〔J〕.西北农业学报，2008，17（6）:184-186.

〔8〕张国洲，王亚维，徐汉虹，等.瑞香狼毒提取物对昆虫的生物活性研究〔J〕.湖南农业大学学报，2000，26（3）: 190-192.

〔9〕裴月湖，冯宝民，华会明，等.瑞香狼毒化学及药理研究进展〔J〕.中草药，2001，32（8）:764–766.

〔10〕LOPES L M X，YOSHIDA M，GOTTLIEB O R.Dibenzyl⁃butyrolactone lignans from Virola sebifera〔J〕.Phyto⁃chemistry，1983，22（6）:1516-1518.

〔11〕TAKAKU N，CHOI D H，MIKAME K，et al.Lignans of Chamaecyparis obtusa〔J〕.Journal of Wood Science，2001，47（6）:476-482.

〔12〕陈玉琪，苏娟，沈云亨，等.丝毛瑞香化学成分研究〔J〕.中国药学杂志，2008，43（19）:1453-1456.

〔13〕杨国红.瑞香狼毒等三种药用植物的生物活性成分〔D〕.上海:复旦大学，2005.

〔14〕徐志红，秦国伟，李晓玉，等.瑞香狼毒中新的双黄酮和活性化合物〔J〕.药学学报，2001，36（9）:668-671.

*通信作者：何红平，教授，博士.

（责任编辑 李 杨）

Chemical Constituents of Stellera chamaejasme

CHEN Jianyong1，2,LIU Guangming1,ZHANG Yu2,HAO Xiaojiang2,HE Hongping3*
（1.College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China;2.State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources Sustainable Utilization in West China,Kunming Institute of Botany,Chinese Academy of Sciences,Kunming 650201, China;3.School of Pharmacy,Yunnan University of Traditional Chinese Medicine,Kunming 650500,China）

Objective:To research the chemical constituents ofStellera chamaejasme.Methods:The constituents were isolated from the plant by silica gel column chromatography,C18 reversed phase chromatography,Sephadex LH-20 gel filtration chromatography and HPLC.Their structures were elucidated by spectroscopic methods.Results:Five known compounds were isolated and identified as (2R,3S)-3-(3,4-dimethoxybenzyl)-2-(3,4-methylenedioxybenzyl)-butyrolactone(1),haplomyrfolin(2),dihydrosesamin(3), isoneochamaejasmine A(4)and ruixianglangdusu B(5),respectively.Conclusion:Compounds 1-3 were isolated from this plant for the first time.

Stellera chamaejasme;thymelaeaceae;chemical constituents

R284.1

A

1672-2345（2014）08-0001-03

10.3969∕j.issn.1672-2345.2014.08.001

云南省中青年学术技术带头人后备人才资助项目（2010CI047）

2014-04-21

2014-04-28

陈健勇，硕士研究生，主要从事天然药物化学研究.