甲硝唑缓释片处方优化研究

揭 晶* 李 霞 姚 旭

（武汉生物工程学院制药工程系，湖北 武汉 430415）

甲硝唑缓释片处方优化研究

揭 晶* 李 霞 姚 旭

（武汉生物工程学院制药工程系，湖北 武汉 430415）

目的 优化甲硝唑缓释片的处方。方法 采用正交试验设计，以体外累积释放度为指标，以羟丙基甲基纤维素（HPMC）的规格、HPMC和乳糖的用量为考察因素，筛选甲硝唑缓释片的最佳处方。结果 最佳处方为HPMC的规格为K4M、HPMC 20 %、乳糖10 %；优化后所制制剂可持续释药12 h。结论 甲硝唑缓释片处方合理，具有良好的缓释效果。

甲硝唑；缓释片；处方优化；累积释放度；正交试验

甲硝唑（Metronidazol，MNZ）为人工合成的硝基咪唑类药物，在 水中 微溶 ，临 床常 用 于 治 疗肠 道和 肠外 阿米 巴 病[1]、阴 道滴 虫病[2,3]和厌氧菌感染[4]等疾病治疗，还有人在临床应用中，发现了其在皮肤科方面的新用途，如治疗酒渣鼻、疥疮和痤疮等[5]。由于甲硝唑具有毒性小、疗效高、价格低、使用方便等特点[6]，目前以其为主药做成的胶囊剂、注射剂、口服液、外用性软膏剂、膜剂、片剂等已广泛应用于临床。甲硝唑大部分以原形自肾脏排出，血浆t1/2约为8 h，口服吸收迅速而完全，一次使用剂量500 mg，1 h后血浆浓度达10 μg/mL，超过平均有效浓度[7]。为了提高患者用药的顺应性，减少用药次数，降低药物峰-谷现象带来的不良影响，实现药物的平稳释放，笔者依据国内临床用药要求，对甲硝唑的缓释片处方进行了优化。

1 仪器与材料

TU-1810紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；ZP-9低转式压片机（长沙岳麓区中南制药机械厂）；101-2AB电热鼓风干燥箱（天津市泰斯仪器有限公司）；RC-6D溶出度检测仪（天津市新天光分析仪器技术有限公司）等。

甲硝唑原料药（湖北兴银河化工有限公司，含量＞99 %）；甲硝唑对照品（中国药品生物制品检定所，纯度98 %）；羟丙基甲基纤维素E50、K4M、K15M（安徽山河药用辅料有限公司）；乳糖（上海山浦化工有限公司）；聚乙烯吡咯烷酮（国药集团化学试剂有限公司）；无水乙醇（天津市化学试剂有限公司）；滑石粉（广州市麒旭化工有限公司）；硬脂酸镁（国药集团化学试剂有限公司）；盐酸（开封东大化工有限公司试剂厂）等。

2 方法与结果

2.1 甲硝唑缓释片制备方法

先将各种辅料粉碎过100目筛，称取处方量的甲硝唑（过80目筛）、HPMC、乳糖及其他辅料，充分混合。采用PVP-K30乙醇溶液（5 %）为黏合剂制备软材，过16目筛制粒，湿颗粒置于电热鼓风干燥箱中干燥至恒重，过筛整粒，再加入适量硬脂酸镁和滑石粉，混合均匀，压片，即得每片含0.6 g的甲硝唑缓释片。

2.2 含量测定

2.2.1 对照品溶液的配制

精密称取在105 ℃下干燥过的甲硝唑标准品20mg，置于50 mL容量瓶中，用0.1 mol/L HCl溶液溶解，定容，摇匀，得浓度为400 μg/mL的对照品溶液，备用。

2.2.2 供试品溶液的配制

取自制甲硝唑缓释片10片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于甲硝唑50 mg）置于100 mL容量瓶中，加0.1 mol/L HCl溶液80 mL，微温充分振摇使甲硝唑溶解，再用0.1 mol/L HCl溶液稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液5～200 mL容量瓶中，加0.1 mol/L HCl溶液稀释至刻度，摇匀，备用。

2.2.3 最大吸收波长的选择

精密吸取上述甲硝唑对照品溶液和供试品溶液适量，以0.1 mol/L HCl溶液为空白，在200～500 nm波长范围内扫描。结果表明，甲硝唑对照品溶液和供试品溶液在277 nm波长处都有最大吸收，和文献一致[8]。且按处方比例称取辅料，同法操作，辅料在277 nm波长处无吸收。故选择277 nm作为测定波长。

2.2.4 标准曲线的绘制

精密吸取上述甲硝唑对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL，分别置于100 mL容量瓶中，加0.1 mol/L HCl溶液稀释至刻度，摇匀。以0.1 mol/L HCl溶液为空白，于277 nm波长处测定不同浓度对照品溶液的吸光度，并以吸光度（A）为纵坐标，以质量浓度（C，μg/mL）为横坐标，绘制标准曲线，结果见图1，得线性回归方程A=0.0351C+0.0255，r=0.9977，表明在4.044～24.264 μg/mL范围内线性关系良好。

图1 标准曲线

2.2.5 精密度试验

照“2.2.2”项制备供试品溶液，吸取6份，以0.1 mol/L HCl溶液为空白，分别在277 nm波长处测定吸光度，结果见表1。RSD＜2 %，结果表明该方法精密度良好。

表1 精密度试验结果

2.2.6 回收率试验

按处方1/15量的80 %、100 %、120 %进行回收率试验。取甲硝唑对照品32、40、48 mg，精密称定，分别置于100 mL容量瓶中，按处方1/15量加入空白辅料，加0.1 mol/L HCl溶液80 mL，微温充分振摇使甲硝唑溶解，再用0.1 mol/L HCl溶液稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液5～200 mL容量瓶中，加0.1 mol/L HCl溶液稀释至刻度，在277 nm波长处测定吸光度，计算回收率，结果见表2。由表2可知，该方法的平均回收率在98 %～102 %，RSD＜2 %，表明该含量测定方法符合方法学要求。

表2 回收率试验结果

2.2.7 甲硝唑缓释片的含量测定

取3批甲硝唑缓释片，照“2.2.2”项下制备供试品溶液，分别在277 nm波长处测定吸光度，并计算含量，结果分别为（104.7± 1.31） %、（97.19±1.63） %、（103.5±1.12） %，符合要求。

2.3 甲硝唑缓释片处方筛选

2.3.1 正交试验设计

在前期单因素考察的基础上确定了进行正交试验的影响因素及水平，选择对药物释放影响较大的3个因素，即HPMC的规格、HPMC和乳糖的用量作为影响因素A、B、C，每个因素分别取3个水平，以糊精为填充剂使片重保持1.0 g。根据L9（34）正交表确定处方组成，按照制备工艺制备甲硝唑缓释片。正交试验的因素和水平见表3。

表3 因素水平表

正交试验结果根据《中国药典》2010版缓释制剂释放度测定质量控制要求[9]，选择2、6、12 h三个时间点的体外累积释放度（Q）作为考察指标，采用综合评分法对总分Y进行方差分析，Y=Q12-[（Q2-20）2+（Q6-50）2]1/2。其中，（Q2-20）2+（Q6-50）2反映了2、6 h释放度的偏差，此偏差越小越符合缓释制剂释放要求；Q12值则越大越符合缓释制剂释放要求。并对Y值进行分析处理，正交试验结果见表4，方差分析结果见表5。

表4 正交设计试验结果

表5 方差分析（α=0.05）

由表4极差可知，各因素对甲硝唑缓释片释放度的影响顺序为A＞B＞C，即HPMC的规格＞HPMC的用量＞乳糖的用量。同时表5结果表明，HPMC的规格对甲硝唑缓释片释放度的影响有统计学意义。各因素的最佳组合为A2B3C3，即HPMC的规格为K4M，HPMC的用量为20 %，乳糖的用量为10 %。

2.3.2 验证试验

按优选后的工艺条件制备甲硝唑缓释片样品3批，并依法测定Q值。结果，制备的缓释片在第2、6、12 h的Q值分别为（22.42± 1.86） %、（56.20±1.49） %和（92.94±1.89） %。3批缓释片的体外Q-t曲线见图2。

图2 3批样品体外释药曲线

根据最佳工艺制得的3批缓释片在0.5、1、2、4、6、8、10、12 h的 值平均值分别为8.75 %、14.91 %、22.42 %、43.29 %、56.20 %、66.84 %、86.58 %、93.01 %，对其进行Higuchi方程拟合，得方程Q（ %）=31.354t1/2-17.725（r=0.9933），可见其释放数据能够使用Higuchi方程较好地拟合。

3 讨 论

前期单因素实验还考察了甲硝唑的粒度对缓释片体外释放的影响，结果表明甲硝唑粒度越大，释药越快，这是因为甲硝唑微溶于水，药物溶出造成的释放孔道大小为控制因素，所以选择通过80目筛的甲硝唑。前期还考察黏合剂的种类（HPMC水溶液、PVP-K30乙醇溶液和淀粉浆），结果表明采用PVP-K30乙醇溶液为黏合剂，释药行为较为理想，所以选择PVP-K30乙醇溶液（5 %）作为处方的黏合剂。

处方优化的结果表明，HPMC的规格对缓释片的体外释放影响具有统计学意义。选用K4M制备甲硝唑缓释片，制备工艺易于控制，缓释效果较好。体外释放度测定方法，其精密度试验和回收率试验的结果表明，该方法准确、可靠，能够有效地对所制备的甲硝唑缓释片进行含量测定。

[1] 吕春 禄,杨 云莲.甲硝唑注射液保留灌肠治疗肠阿米巴病54例[J].实用儿科临床杂志,2004,19(1):76.

[2] 阚延静,陈汐敏,戚晓红,等.甲硝唑纳米粒子对体外培 养阴道毛滴虫杀伤作用的研究[J].现代妇产科进展,2005,14(4):335-336.

[3] 汤自豪,卢小 澍,高兴政.甲硝唑体外 抗阴道毛滴虫的电镜 观 察[J].郑州大学学报(医学版),2008,43(5):918-921.

[4] 宋 洋,王 喜 莉,王 欣.甲 硝 唑 临 床 疗 效 综 述[J].黑 龙 江 医药,2005,18(3):216-217.

[5] 乔 志 芬,孙 江 涛.甲 硝 唑 的 新 用 途[J].中 国 民 间 疗法,2004,12(6):61-62.

[6] 赵芬.甲硝唑注射液冲洗会阴切口240例效果观察[J].临床合理用药,2010,3(4):42-43.

[7] Tsai TH,Chen YF.Pharmacokinetics of metronidazole in rat blood,brain and bile studied by micro dialysis coup led to micro bore liquid chromatography[J].J Chromatography A,2003,987(1/2):277-282.

[8] 杨春光.甲硝唑缓释微 丸的研究[D].沈阳:沈阳药科大学,2006.

[9] 国家 药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[S].2010年版.北京:中国医药科技出版社,2010:附录87.

Optimization of the Formula of Metronidazole Sustained-release Tablets

JIE Jing*, LI Xia, YAO Xu
(Department of Pharmaceutical Engineering, Wuhan Institute of Bioengineering, Wuhan 430415, China)

Objective To optimize the formula of Metronidazol sustained-release tablets. Methods The formula of Metronidazol sustained-release tablets was optimized by orthogonal design with the accumulative release rate in vitro as index, with the specifications of HPMC, the amount of HPMC and lactose as factors. Results The optimized formula was as follows: the specification of HPMC was K4M, HMPC 20 %, lactose 10 %. The Metronidazol sustainedrelease tablets prepared in the optimized formulation achieved a sustained release of 12h. Conclusion The formula of the Metronidazol sustained-release tablets is reasonable and the tablets showed well release effect in vitro.

Metronidazol; Sustained-release tablets; Formula optimization; Accumulative release rate; Orthogonal experiment

R944.4；R978.6

：B

：1671-8194（2014）01-0001-03

湖北省自然科学基金项目（项目编号：2012FFB05201）；2012年度湖北省高等学校青年教师深入企业行动计划项目（XD2012501）

*通讯作者:E-mail: shu8007@163.com