胃癌病人血清与癌组织nm23H1蛋白表达及临床病理意义

宋培铎,洪光晨

(青岛市市南区人民医院普外科,山东青岛 266002)

胃癌病人血清与癌组织nm23H1蛋白表达及临床病理意义

宋培铎,洪光晨

(青岛市市南区人民医院普外科,山东青岛 266002)

目的研究胃癌病人血清、癌组织中nm23H1蛋白的表达及与临床病理特征的关系。方法采用ELISA法及免疫组织化学S-P法,检测69例胃癌病人血清、癌组织中nm23 H1蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果胃癌病人血清、癌组织中nm23H1蛋白的表达与正常对照组比较差异有显著性(χ2＝9.69,t＝6.96,P＜0.05)。胃癌病人血清、癌组织中nm23H1蛋白的表达与淋巴结转移及肿瘤临床分期有关(χ2＝12.30、5.30,t＝14.67、6.42,P＜0.05)。结论胃癌病人血清及癌组织中nm23H1蛋白的表达下调,nm23H1蛋白可以作为评估胃癌病人预后的指标。

胃肿瘤;nm23H1;预后

肿瘤的侵袭、转移是目前研究的一个热点问题[1-6],发病率和死亡率均占我国消化道肿瘤首位的胃癌,其生物学行为具侵袭性,总体疗效近几年并未获明显改善。肿瘤的生长分化和侵袭转移是影响胃癌预后的主要因素,有多种基因参与调控胃癌的各项复杂生物学行为。除TNM分期外,目前能准确判断胃癌预后的指标较少。由于影像学检查等手段难以准确判断淋巴结的转移情况,术前无法对胃癌做出准确的TNM分期。本研究旨在探讨胃癌病人血清、癌组织中nm23 H1蛋白的表达及其与临床病理特征的关系。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源

2009年5月—2010年10月,我院手术切除的胃癌病人的标本69例,男49例,女20例;平均年龄65.1岁。入选标准:术前病人均未行化、放疗;有完整的临床、病理及随访资料。Lauren分型:肠型31例,弥漫型28例。伴淋巴结转移者51例。临床病理分期采用UICC胃癌国际统一TNM新分期法:Ⅰa期6例,Ⅰb期13例,Ⅱ期16例,Ⅲa期17例,Ⅲb期12例,Ⅳ期5例。并随机选取同期就诊的非肿瘤病人20例作为正常对照组。

1.2 实验方法

分别采集受检者治疗前不抗凝静脉血2 m L,置室温自然凝固后,离心10 min,取上清液置于低温冰箱中备用。以全自动生化分析仪,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测nm23H1蛋白的水平。实验操作及结果判定均严格按照试剂盒说明书的要求并由专人完成。采用免疫组化S-P法检测肿瘤组织中nm23 H1蛋白的表达。石蜡切片常规脱蜡至水,室温孵育30 min,微波修复抗原,以正常羊血清室温孵育10 min,倾去血清,滴加一抗工作液,PBS冲洗。37℃温箱孵育120 min,滴加二抗工作液,37℃温箱孵育30 min,滴加链霉菌抗生物素-过氧化物酶溶液,37℃孵育10 min,DAB显色,封固,显微镜观察。每次实验用已知阳性切片作为阳性对照,以PBS代替一抗作为阴性对照。

1.3 结果判定

随机选择20个视野,高倍镜下计数500～1 000个细胞中的阳性细胞,计算nm23H1阳性细胞百分率。根据阳性细胞数量及显色强弱分为:阴性,阳性细胞＜10%;阳性,阳性细胞≥10%。

1.4 统计学分析

应用SPSS 12.0软件进行分析。计数资料组间比较采用χ2检验,计量资料组间比较采用t检验。

2 结 果

2.1 两组nm23H1蛋白的表达

胃癌组织中nm23H1蛋白表达阳性与阴性分别为32、37例,正常对照组分别为18、2例;胃癌组血清中nm23H1蛋白水平为(361.14±129.79)μg/ L,正常对照组为(570.87±64.96)μg/L,胃癌病人血清、癌组织中nm23 H1蛋白的表达与正常对照组比较差异有显著性(χ2＝9.69,t＝6.96,P＜0.05)。

2.2 nm23 H1的表达与胃癌病人临床特征的关系

nm23H1蛋白的表达与胃癌病人的年龄、性别、Lauren分型无关(P＞0.05),与病人淋巴结转移及临床TNM分期有关(χ2＝12.30、5.30,t＝14.67、6.42,P＜0.05)。见表1。

表1 胃癌病人血清及胃癌组织中nm23H1的表达与临床病理特征的关系

3 讨 论

作为一种转移抑制基因,nm23倍受关注。许多研究结果表明,nm23基因的表达水平与乳癌、结肠直肠癌、肝癌、肺癌、黑色素瘤、喉鳞状细胞癌、鼻咽癌、甲状腺癌等肿瘤侵袭转移呈显著负相关[7-15]。nm23H1基因是1988年美国STEEG等[16]首次从小鼠K-1735黑色素瘤不同转移潜能的细胞系中分离出来的。nm23 H1基因定位于染色体17q22[17], nm23H1蛋白的改变与肿瘤的浸润转移有关[18]。KODERA等[19]对胃癌的研究结果显示,nm23H1蛋白表达与淋巴结转移呈负相关。胡建昆等[20]采用胃癌国际统一的新TNM分期法对343例胃癌病人进行分析,结果Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲa、Ⅲb及Ⅳ期的5年生存率分别为100%、82.69%、70.37%、48.44%、25.00%及7.69%,差异均有显著性,分期与预后具有直接的关系。

本研究结果显示,nm23H1蛋白的表达与胃癌病人的年龄、性别、Lauren分型无关。胃癌病人血清、癌组织中nm23H1蛋白的表达与正常对照组比较差异有显著性,胃癌病人血清、癌组织中nm23 H1蛋白的表达与淋巴结转移及肿瘤临床分期有关。胃癌临床TNM分期越晚,组织中nm23H1蛋白表达水平越低;无淋巴结转移者nm23H1阳性表达率明显增高,而有淋巴结转移者nm23H1阳性表达率明显降低,提示nm23H1蛋白表达水平越低预后可能越差。胃癌病人血清及癌组织中nm23 H1蛋白的表达,可以作为评估胃癌病人预后的指标。

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(本文编辑 厉建强)

THE EXPRESSION AND ITS CLINICOPATHOLOGIC SIGNIFICANCE OF NM23H1 IN SERUM AND CANCER TISSUE OF PA-TIENTS WITH GASTRIC CANCER

SONG Peiduo,HONG Guangchen (The People’s Hospital of Qingdao Shinan District, Qingdao 266002,China)

ObjectiveTo study the expressions of nm23H1 in serum and cancer tissue and the relationship between them and clinicopathologic features in patients with gastric cancer.MethodsEmploying immunohistochemical S-P method and ELISA,the expressions of nm23H1 in serum and cancer tissue in 69 patients with gastric cancer were detected,and their correlation with clinicopathologic characteristics analyzed.ResultsThe expressions of nm23H1 in serum and cancer tissue in the patients were significantly different as compared with the normal control group(χ2＝9.69,t＝6.96,P＜0.05),the expressions were related with lymph-node metastasis and clinical staging(χ2＝12.30,5.30;t＝14.67,6.42;P＜0.05).ConclusionThe expressions of nm23H1 in serum and cancer tissue are down-regulated,and,therefore,nm23H1 can be used as an index for predicting prognosis of patients with gastric cancer.

stomach neoplasms;nm23H1;prognosis

R735.2

A

1008-0341(2014)01-0006-03

10.13362/j.qlyx201401003

2013-10-12;

2013-11-26

宋培铎(1972-),男,硕士,主治医师。