蒙药利喜咽喉胶囊抗炎作用及急性毒性研究

海海杰 吴七十三

(1.呼伦贝尔市扎兰屯中蒙医院，内蒙古 呼伦贝尔 162650;2.内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古 通辽 028000)

利喜咽喉胶囊是在蒙医验方立西如克巴基础上研制的新剂型，由丁香、木香、甘草、石膏、玉簪花、诃子等6味药组成［1，2］。具有利肺，清咽等功效。用于外感咳嗽，声音嘶哑，咽喉肿痛等病症［1，2］。本文通过比较立西如克巴和利喜咽喉胶囊抗炎作用和小鼠急性毒性反应，评价立西如克巴改新剂型的必要性。

1 实验材料

1.1 实验药品、试剂:立西如克巴，内蒙古通辽市奈曼旗蒙医院提供，批号2009102602。利喜咽喉由内蒙古民族大学蒙医药学院研制，批号20091124、20091126、20091128的混合。本试验中作氨酚咖匹林片为对照药。角叉菜胶，sigma公司产品，由北京拜尔迪公司提供，批号015k0172。二甲苯，沈阳市东兴试剂厂产品，批号20060504。

1.2 实验仪器:BT25型电子分析天平，北京赛多利斯天平有限公司产品;MDF-U2086S型超低温冰箱，日本产品;PV-200型足容积测定仪，成都泰盟科技有限公司产品。

1.3 实验动物:昆明种小鼠，体重18g～22g，雌雄各半;Wistar大鼠，体重200～220g，雌雄各半，均由沈阳医学院实验动物中心提供，许可证号:SCXK-(吉)2007-0003。

2 实验方法及结果

2.1 利喜咽喉胶囊对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响［3］:取小鼠90只，按体重随机分为对照组、利喜咽喉低剂量组(0.325g/kg)，利喜咽喉中剂量组(0.750g/kg)、利喜咽喉高剂量组(1.500g/kg)、立西如克巴组(0.160g/kg)和阳性组(氨酚咖匹林片0.111g/kg)等6组，每组15只，雌雄分笼饲养。各给药组分别灌胃相应药物的0.5% 羧甲基纤维素钠溶液(0.2ml/10g)，对照组灌胃同体积的0.5%羧甲基纤维素钠溶液，每天1次，连续7d。末次给药后30min，取0.1ml二甲苯涂于各组小鼠右耳前后两面致炎。1h后，将小鼠脱颈处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径6mm的打孔器分别在两耳同一部位打下圆耳片，迅速用电子天平称重，计算耳片炎症肿胀度(右耳片减去左耳片重量等于肿胀度)。结果见表1。

结果显示，利喜咽喉胶囊中、高剂量对小鼠二甲苯所致耳廓肿胀均具有明显的抑制作用(P＜0.05)。

表1 利喜咽喉胶囊对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 s·mg，n=15)

表1 利喜咽喉胶囊对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 s·mg，n=15)

注:与空白组比较※P＜0.05

组别 给药剂量(g/kg)耳廓肿胀度对照组-3.43 ±1.73利喜咽喉低剂量组 0.325 3.65 ±1.82利喜咽喉中剂量组 0.750 2.32 ±0.69※利喜咽喉高剂量组 1.500 1.98 ±0.88※立西如克巴组 0.160 3.56 ±1.64氨酚咖匹林片组 0.111 2.19 ±1.01※

2.2 利喜咽喉胶囊对角叉菜所致大鼠足肿胀的影响［4］:取大鼠72只，雌雄兼用，按体重随机分为模型组、利喜咽喉低剂量组(0.22g/kg)、利喜咽喉中剂量组(0.44g/kg)、利喜咽喉高剂量组(0.88g/kg)、立西如克巴组(0.096g/kg)和阳性组(0.067g/kg)等6组，每组12只，雌雄分笼饲养。各给药组大鼠分别灌胃相应药的0.5%羧甲基纤维素钠混悬液(2ml/100g)。模型组灌胃同体积的0.5%羧甲基纤维素钠溶液，每日1次，连续10d。建立模型前用容积法测量各组大鼠右后足跖容积。于末次给药后30min，将各组大鼠右后足腱膜下注射1%角叉菜胶溶液0.1ml，在2h、4h、6h和8h后用足容积测定仪分别测量大鼠右后足跖容积，并进行相关组间t检验，结果见表2。

结果显示，利喜咽喉对大鼠角叉菜胶致足肿胀4d之内抑制作用比较稳定(P＜0.05)，具有量效关系。立西如克从6d后开始出现作用(P＜0.05)，具有作用较晚的特点。根据药物在本试验中所表现出的作用时间，其体内停留时间、代谢速度等问题值得进一步研究。

表2 利喜咽喉胶囊对角叉菜致大鼠足肿胀的影响± s·ml，n=12)

表2 利喜咽喉胶囊对角叉菜致大鼠足肿胀的影响± s·ml，n=12)

注:与模型组比较 ※P＜0.05

组别 致炎前致炎后不同时间足跖肿胀度2h 4h 6h 8h模型组 1.97 ±0.36 2.31 ±0.23 2.35 ±0.38 2.24 ±0.38 2.21 ±0.41利喜咽喉低剂量组 1.70±0.14 1.93±0.17※ 2.09±0.24※ 1.91±0.20※ 1.88±0.12※利喜咽喉中剂量组 1.73±0.27 1.88±0.26 2.11±0.38※ 2.06±0.25 2.11±0.15利喜咽喉高剂量组 1.75±0.19 1.92±0.18※ 1.87±0.36※ 2.07±0.18 2.16±0.20立西如克巴组 1.76±0.21 2.09±0.21 2.12±0.22 2.00±0.34※ 2.07±0.29※阳性组 1.78 ±0.30 2.16 ±0.31 2.18 ±0.31 1.96 ±0.23※1.95 ±0.20

3 利喜咽喉胶囊小鼠最大给药量实验研究［5］

取昆明种小鼠60只，雌雄各半，按体重随机分为立西如克巴组、利喜咽喉组和对照组等3组，雌雄分笼饲养。将小鼠禁食16h(自由饮水)后，立西如克巴组大鼠灌胃最大浓度(0.45g/ml)、利喜咽喉组最大浓度(2g/ml)的混悬液(0.3ml/10g)，灌胃1次。立西如克巴1日最大给药量为30.8g/kg、利喜咽喉原材料为60g/kg;对照组按相同条件给予等量的生理盐水。给药后常规饲养，给药后连续观察动物的反映情况，连续观察14d，分别于给药前及给药后第3、7、10、14d称体重。每天观察2次(上下午各1次)动物的外观、行为、分泌物、排泄物等。记录所有动物的死亡情况、中毒症状及中毒反应的起始时间、严重程度、持续时间、是否可逆等。结果见表3、表4。

结果显示，小鼠1日最大给药量立西如克巴为30.8g/kg/d时，15min内小鼠出现蹒跚走路，但未见睡眠现象，4h后出现胀肚、纵毛、活动缓慢及活动量少等现象，此现象延续1到2d;利喜咽喉灌胃给药60g/kg/d时，15min内小鼠出现睡眠(翻正反射消失)现象，1h后恢复正常;4h后出现胀肚、纵毛、活动缓慢及活动量少等现象，此现象延续3到4d;小鼠均未见异常行为、体重下降和死亡，第14d尸解肉眼观察未发现异常。提示立西如克巴、利喜咽喉经口给给予小鼠的急性毒性较小，测不出小鼠LD50。可认为临床用药安全性较好。

表3 立西如克巴和利喜咽喉胶囊对雌性小鼠体重的影响 ± s·g，n=20)

表3 立西如克巴和利喜咽喉胶囊对雌性小鼠体重的影响 ± s·g，n=20)

组别 给药前 给药后3d 给药后7d 给药后10d 给药后14d对照组 34.1 ±4.9 34.4 ±4.8 35.7 ±5.2 36.7 ±5.2 37.3 ±4.7立西如克巴组 37.2 ±3.4 35.3 ±2.9 37.1 ±4.2 38.8 ±3.2 39.6 ±3.5利喜咽喉组 36.4 ±3.2 34.3 ±3.4 34.8 ±4.5 35.3 ±5.1 36.5 ±4.6

表4 立西如克巴和利喜咽喉胶囊对雄性小鼠体重的影响 ± s·g，n=20)

表4 立西如克巴和利喜咽喉胶囊对雄性小鼠体重的影响 ± s·g，n=20)

组别 给药前 给药后3d 给药后7d 给药后10d 给药后14d对照组 31.0 ±1.9 31.7 ±2.0 32.4 ±1.9 33.6 ±2.3 34.0 ±1.9立西如克巴组 30.3 ±2.8 27.8 ±2.7 29.6 ±1.8 30.0 ±1.5 30.5 ±1.7利喜咽喉组 30.8 ±3.3 28.7 ±2.3 30.2 ±2.3 30.4 ±2.0 31.0 ±2.5

4 讨论

按照蒙药学及蒙医方剂学理论分析，利喜咽喉胶囊中3味蒙药为寒凉性，2味药为温性、1味为平性，故该复方属凉性方剂。利喜咽喉胶囊对小鼠二甲苯致耳廓肿胀有显著的抑制作用;对大鼠角叉菜胶致足肿胀亦有显著的抑制作用。实验结果表明，与原剂型立西如克巴的抗炎作用相比，利喜咽喉具有良好的抗炎作用，无急性毒性等不良反应。利喜咽喉胶囊对小鼠有效剂量为0.325g/kg～1.5g/kg;对大鼠的有效剂量为 0.22g/kg ～ 0.88g/kg。

［1］白清云.中国医学百科全书·蒙医学［M］.赤峰:内蒙古科技出版社，1986

［2］特木尔.蒙医方剂学［M］.呼和浩特:内蒙古人民出版社，1986，290

［3］陈奇.中药药理实验方法［M］.北京:人民卫生出版社，1993，356-361

［4］陈奇.中药药效研究思路与方法.［M］.北京:人民卫生出版社，2005，683 ～691

［5］卫生部药政局.中药新药临床前研究指导原则汇编(药学、药理学、毒理学)，北京，1993，203