人参皂甙Rg1对慢性疲劳综合症大鼠抗氧化酶系统活性的影响研究＊

宋姌 刘涛 西安体育学院（西安 710068）

慢性疲劳综合征（Chronic fatigue syndrome，CFS）是近二十年来发现的一种以人身体和精神极度疲劳并伴随着肌肉酸痛、淋巴结肿大、咽喉肿痛、记忆力下降及睡眠障碍和抑郁等症状的一种疾病，目前在城市人口中多发，多见于脑力劳动者。我国的传统中药人参皂甙具有理气扶正、强身健体的作用。基于此，我们拟通过中药人参皂甙Rg1干预CFS模型大鼠，探讨运动及中药治疗CFS的新思路。

1 材料与方法

1.1 研究对象 健康雄性SD大鼠30只，体重（205±15）g，（西安交通大学动物实验中心提供）。随机分为5组：正常对照组（常规饲养，不做任何处理，C组）、模型组（在造模后不给予任何治疗，M组）、人参皂甙＋模型组（造模的同时给予人参皂甙水溶液60mg／kg／d灌胃治疗，R＋M组）、每组10只，所有动物自由摄食和饮水。实验室温度、湿度控制在规定范围，室内光／暗周期为12h／12h（光照时间06：00～18：00）。

1.2 实验材料 自制硬塑料束缚筒；人参皂甙Rg1粉剂由西安飞达生物技术有限公司（批号：056244）；SOD试剂盒、GSH试剂盒、MDA试剂盒均购自南京建成生物公司。

1.3 CFS大鼠造模 参照罗英华等[1]CFS造模进行改良，每周一、三、五上午对大鼠放入束缚筒内，调节束缚筒内径直至大鼠不能动弹，每次3min，休息10min后，再次放入束缚筒内，共5次。下午将大鼠进行冷水游泳（温度控制在12℃）10min，休息30min后，再重复一次。造模时间为6周。正常对照组大鼠常规饲养，不做任何处理。

1.4 抗氧化系统检测实验 实验结束1d后，10%水合氯醛（30mg／kg）腹腔注射麻醉大鼠，迅速断头取血约2mL／只，3000r／min离心10min，取上清-20℃备用。在冰板上快速分离出海马、大脑皮层，称重后在超声均浆机上匀浆。用Bradford的考马斯亮蓝染色法，测定各样品的蛋白含量。超氧化物歧化酶（SOD）活性，丙二醛（MDA）含量和谷胱甘肽过氧化氢酶（GSH）活性均采用相应的试剂盒测定。MDA含量采用巴比妥酸比色法测定[2]。

1.5 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行处理，所有数据以均数士标准差（）表示。采用单因素方差分析，方差齐用LSD检验，方差不齐用Dunnett T3检验，P＜0.05为差异有统计学显著意义。

2 结 果

2.1 各组大鼠SOD、GSH和MDA的测定见表1。

表1 各组大鼠SOD、GSH、MDA测定结果（）

表1 各组大鼠SOD、GSH、MDA测定结果（）

注：与C组比较△P＜0.01；与M组比较▲P＜0.01

10648±24.54 54.35±4.191.52±0.19 M组 10367±17.65△ 28.23±2.12△ 3.27±0.58△R＋M组 10587±21.32▲ 48.69±3.27▲ 1.86±0.43）C组▲

表1结果显示，与对照组相比，模型组SOD、GSH活性明显降低，MDA含量明显增加，统计学意义非常显著（P＜0.01）；与模型组比较，人参皂甙组大鼠SOD、GSH活性明显增加，MDA含量明显降低，具有非常显著性差异 （P＜0.01），说明慢性疲劳综合症大鼠海马及大脑皮质抗氧化功能明显降低，脂质沉积物增加。而人参皂甙Rg1可明显提高慢性疲劳综合症大鼠抗氧化酶系统的活性，降低脂质氧化物的沉积。

3 讨 论

3.1 CFS动物模型的研制 建立合适的动物模型是研究疾病重要的手段。CFS发病原因复杂，目前研制的CFS动物模型有多种。在本研究中，我们通过慢性束缚和冷水游泳相结合的办法来建立CFS模型就是模仿人长期的心理应激和躯体应激诱发而产生的烦躁、绝望以及免疫功能低下等CFS症状。有研究报道[3]慢性束缚可能是影响了海马中氨基酸递质的水平及比例，使中枢抑制占优势，使动物出现疲劳记忆力下降及抑郁倾向。在本实验中，大鼠在束缚筒中所产生的烦躁、绝望等状态与人类的抑郁、心理压力增大等精神状态很相似。同时，我们根据大鼠游泳喜欢温水的习惯，选择冷水游泳既是对大鼠体力的巨大消耗，同是也对大鼠的精神状态造成一定的压力。6周造模结束后，模型组大鼠身体消瘦，体重增加不明显，反映了双重刺激引起了大鼠产生CFS的相应症状，间接导致了大鼠的体力和精神状态的下降。我们选择了比较经典的鼠尾悬挂实验评价其行为学能力。在本实验中，模型组大鼠的悬挂时间明显增加，说明其表现出与人类CFS类似的“抑郁”、“失望”情绪明显增加。在本研究中的慢性复合刺激所引起的体力和精神损害与临床的CFS症状比较相似，故认为本模型是可行的。

3.2 运动与人参皂甙对CFS大鼠对氧化一抗氧化系统的影响 机体在新陈代谢中会产生大量的氧自由基，引起细胞、组织的损伤。机体产生的氧自由基能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化反应，并因此形成脂质过氧化物，如丙二醛（MDA）。SOD活力的高低间接反映了机体清除氧自由基的能力，而MDA的高低又间接反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度[4]。MDA是自由基攻击生物膜中多不饱和脂肪酸引发脂质过氧化作用所形成的脂质过氧化物[5]。自由基的增加，导致生物膜的完整性受损，生物膜的通透性增加，细胞内酶外释，内外状况异常，电解质失衡，酶的活性降低，细胞功能下降，从而造成疲劳产生。同时，机体也存在着抗氧化系统包括：SOD、GSH、CAT等。目前有研究表明[6]，CFS的精神疲劳与脑内大量产生氧自由基而抗氧化系统被抑制有关，所以寻求能提高机体抗氧化能力的手段对治疗CFS有重要的意义。本研究发现人参皂甙组及人参皂甙加运动组大鼠能明显减轻CFS大鼠脂质过氧化产物MDA的产量，同时增加抗氧化酶的活性。说明人参皂甙Rg1可以提高神经细胞抗氧化能力、减少自由基的生成，贺洪等[7]也报道人参皂甙通过提高抗氧化酶活性，同时减少MDA产量，减轻一次性力竭游泳对小鼠肝脏的损害。人参皂甙的抗氧化作用与其分子结构中含有酚类结构和氨基，易与自由电子结合有关。在本实验中，单纯运动对CFS大鼠的抗氧化功能改善不明显，也不能减轻脂质过氧化产生的生成，这可能与我们的运动强度和CFS大鼠的病理体质有关，具体机制需进一步探讨。

4 结 论 利用束缚法和冷水游泳相结合的方法可成功建立慢性疲劳综合征大鼠模型。人参皂甙灌注可提高CFS大鼠脑组织抗氧化酶系统活性并减轻脂质过氧化物的沉积。

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