魔芋精粉对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

1.中国中医科学院中药研究所中药制剂研究中心，北京 100700；2.四川魔力科技研发中心，四川 绵阳 621000

魔芋精粉对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

杜茂波1巩桥2

1.中国中医科学院中药研究所中药制剂研究中心，北京 100700；2.四川魔力科技研发中心，四川 绵阳 621000

目的本实验旨在研究魔芋精粉对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：采用CCl4造成小鼠肝损伤模型，观察魔芋精粉对小鼠血液中ALT、AST活性及血清中白蛋白和球蛋白比值(A/G)的影响；同时观察魔芋精粉对小鼠肝脏中SOD、MDA含量的影响。结果：魔芋精粉能降低肝损伤小鼠血清中的ALT、AST含量；升高A/G 的比值；同时，魔芋精粉能够升高肝组织中 SOD的含量，降低MDA的含量。结论：魔芋精粉具有一定程度的保护肝脏的作用。

魔芋精粉；CCl4；肝损伤；保护作用

魔芋隶属于天南星科，魔芋属，属多年生草本植物，主要分布在我国长江流域及我国南部地区。魔芋精粉是一种天然的膳食纤维的食材，现代研究表明，它具有增强免疫力，抗肿瘤，抗氧化，清除自由基，抑菌的药理作用，并证明其中发挥主要作用的成分是葡甘露聚糖(konjac glucomannan，KGM)。葡甘露聚糖主要是由D-葡萄糖和D-甘露糖按1∶1.6(mol/mol)的比例连接而成的高分子多糖[1]。本研究以主含葡甘露聚糖的魔芋精粉为研究对象，探讨魔芋精粉对肝脏的保护作用。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 药物 魔芋精粉购自四川魔力科技有限公司，生产批号：130824-B。葡甘露聚糖含量为84%，实验剂量按葡甘露聚糖计。

1.1.2 试验动物 SPF级昆明种小鼠(22±2g)60只，雄性，中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供。

1.1.3 试验试剂 ALT、AST、白蛋白、总蛋白、SOD、MAD试剂盒，购于南京建成生物工程研究所

1.1.4 仪器 AUY200型分析天平，日本SHIMADZU；XHF-DY型高速分散器，宁波新芝生物科技股份有限公司；1-14K型高速离心机，德国Sigma公司；xmtd-204式恒温水浴，金坛富华仪器有限公司；722型分光光度计，上海青浦芦溪仪表有限公司。

1.2 方法

1.2.1 分组及指标测定 60只昆明种小鼠随机分为5组，即空白对照组、CCl4肝损伤模型组、魔芋精粉低、中、高剂量组，每组12只。魔芋精粉低、中、高剂量组分别按100mg/(kg·d)、200mg/(kg·d)、400mg/(kg·d)灌胃给药, 空白组和模型组给予相同体积的生理盐水，连续灌胃6天，第6天给药3h后，除空白组以外其余各组均灌胃50% CCl4油溶剂(0.1ml/10g)，禁食，自由饮水。24h后采血，分离血清，测定ALT、AST及A/G。然后脱脊椎处死小鼠，浸泡酒精1min，打开腹腔，取出肝脏，取0.5g肝脏加9倍冰生理盐水，组织匀浆，制成10%的肝脏匀浆液，低温离心机3 500r/min，离心15分钟，收集上清液，测定SOD及MDA的含量。

1.2.2 数据统计处理 所有数据采用SPSS 16.0统计软件进行方差分析，数据以平均值±标准差来表示，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 魔芋精粉对小鼠血清AST、ALT和 A/G含量的影响 由表1能够看出，与空白组比较，经CCl4造模型后小鼠血清中的ALT和AST的含量明显提高，而A/G的值明显下降，差异具有统计学意义(P<0.01)，说明造模成功。与模型组比较，魔芋精粉高、中、低剂量组ALT和AST含量明显降低，而A/G的比值显著升高，差异具有统计学意义(P<0.05)。

表1 魔芋精粉对血清AST、ALT和 A/G含量的影响

注：与模型组比较，*P<0.05;**P<0.01

2.2 魔芋精粉对小鼠肝脏组织匀浆SOD及MDA含量的影响 由表2可见，与空白组比较，模型组小鼠肝脏组织匀浆中MDA 含量显著提高，而SOD的含量明显下降，差异具有统计学意义(P<0.01)，说明造模成功，小鼠的肝脏已有明显受损。与模型组比较，魔芋精粉高、中、低剂量组MDA含量均明显降低，而SOD含量明显升高，差异具有统计学意义(P<0.05)。

表2 魔芋精粉对小鼠肝脏组织匀浆中SOD,MDA含量的影响

注：与模型组比较，*P<0.05;**P<0.012.3 小鼠肝脏组织病理学观察 在显微镜下，空白对照组小鼠肝脏呈红棕色，质地软而有弹性；肝小叶结构完整，细胞整齐排列，分界清楚可见。模型组小鼠肝组织表面显黄褐色，质地钝厚，结构被破坏，细胞肿大，有不同程度的坏死，说明造模型成功。魔芋精粉高、中、低剂量组的肝组织镜下颜色红润，结构正常，炎性细胞减少，且有一定的量效依赖性，保肝作用明显。

3 讨论

肝损伤是肝脏疾病病变的结果，主要包括嗜酸性变化、炎症反应、细胞坏死、肝纤维化、肝硬化等[2]。本研究采用 CC14制造肝损伤模型，CC14在经过动物体细胞色素 P450 氧化酶代谢后，能够产生氯甲基以及三氯甲基自由基，并与肝细胞共价结合，使活性氧自由基释放，导致肝细胞损伤，坏死，在此过程中，ALT和AST会渗透到血液中，在一定程度上可反映肝损伤的程度。而血液中球蛋白含量上升，白蛋白下降也是肝损伤的表现。魔芋精粉能在很大程度上使受损的肝细胞得以恢复，表现为血清中ALT和AST的含量降低，A/G的值升高。

机体不断的新陈代谢，产生自由基，自由基可以维持人体正常生理功能。在正常的生理调节状态下，机体产生自由基的同时又清除体内自由基，使生物体保持在动态平衡。机体清除自由基的酶包括SOD、CAT和GSH-Px等,这些酶的含量直接影响自由基的含量和活性。超氧化物歧化酶(SOD)可高效去除体内超氧阴离子自由基，维护机体稳定平衡的生理机能[3]；丙二醛(MDA)是一种小分子产物，来自于机体内的脂质过氧化，在体内MDA含量反映了身体损伤程度和脂质过氧化程度[4-5]。我们的结果表明：魔芋精粉可明显提高肝组织中SOD含量，降低MDA含量。

综上所述，魔芋精粉能通过提高SOD的含量，清除活性氧自由基，使MDA的含量降低，同时降低血清中ALT、AST的含量，升高A/G的比值，从而对CC14所致的肝损伤小鼠起到保护的作用。

[1]刘永刚，陈厚昌，蒋毅萍.丹参酮ⅡA 对四氯化碳致大鼠纤维化的试验研究[J].中药材，2002，25(1):31- 33.

[2]李夏，段冷昕，王楠娅, 等. 鹿茸多肽对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用[J].中国药学杂志，2007，42(24):1864-1867.

[3]LIL J, LU L J, CHEN L,etal.EffectofextractofPilose antler polypeptides on crushed sciatic nerve regeneration[J].Liaoning J TraditChinMed(辽宁中医杂志), 2004, 31(4): 343-344.

[4]杨新波，黄正明.CCl4,D-Gal, AnTT致小鼠肝脏损伤模型的实验研究[J].华人消化杂志，1998，6(1):19-20.

[5]ZAO R Y,YANG C B.Protective effects of polypeptide from Chlamysfarrerion Hela cells damaged by ultravioletA[J].Acta PharmacolSin(中国药理学报),2002,23(11): 1018-1022.

杜茂波(1985-)，男，汉族，硕士学历，研究方向：中药制剂及经皮给药新剂型研究.

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1007-8517(2014)11-0023-02

2014.04.18)