不同接种箱消毒剂对毛木耳菌袋污染率的影响*

吴 翔，黄忠乾，苗人云，郑林用，甘炳成，周 洁，谢丽源，彭卫红，谭 伟，唐利民

(四川省农业科学院土壤肥料研究所，四川 成都 610066)

接种箱是目前大多数食用菌栽培接种过程中必需的设备，接种箱内空气中杂菌孢子或微生物菌体数量直接影响到接种后培养物的纯菌率[1]。通过对接种箱的消毒，让箱内达到无菌或低菌状态，从而减少菌袋的污染机率。因此，接种箱的消毒过程是食用菌生产的重要环节，选择较好的消毒剂关系到整个食用菌生产的成败。

毛木耳 (Auricularia polytricha)是黄背木耳和白背木耳等的总称，是我国主要栽培和重要出口的食用菌种类。毛木耳属于担子菌亚门、层菌纲、木耳科、木耳属，其营养成分与黑木耳相似，具有清肺益气、止痛活血的功效。毛木耳粗纤维含量较高，这些纤维素对人体内许多营养物质的消化、吸收和代谢有很好的促进作用[2，3]。本实验就不同消毒剂对接种箱的灭菌效果，以及对毛木耳菌袋的污染情况作了相关研究，将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 不同消毒方式

处理1:甲醛16 mL和高锰酸钾10 g;处理2:气雾消毒剂16 g;CK:不消毒。各处理重复2次。

1.2 布点方法

布点的设置参考《室内空气质量标准》 (GB/T18883－2002)的要求进行[4]。接种箱内径为长1.5 m、宽0.9 m，共1.35 m2，面积≤30 m2，采取1条对角线上取3点的方法布点。

1.3 培养基

细菌培养基[4]:蛋白胨 10 g、牛肉浸膏 3 g、NaCl 5 g、琼脂18 g，蒸馏水1 000 mL，pH7.2～7.4，121℃灭菌30 min。

真菌培养基:KH2PO41.0 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、葡萄糖10.0 g、蛋白胨5.0 g、1%孟加拉红水溶液3.3 mL、氯霉素0.1 g、琼脂18.0 g，蒸馏水1 000 mL，121℃灭菌30 min。

1.4 采样方法

采用自然沉降法采集样品。各点设3次重复，同时设置空白对照 (同采样皿一起放入采样点，不开皿盖)。用直径9 cm的普通营养琼脂平板在采样点打开，准确暴露空气中5 min，加盖后立即送实验室，培养箱28℃培养，细菌培养24 h～36 h，真菌培养3 d～5 d。

1.5 菌落数计数方法

奥梅梁斯基公式进行计算每立方米空气中细菌总数 (C，cfu·m－3)[4，6]，公式为:

式中:A为平皿面积 (cm2);T为平板暴露时间 (min);N为平均菌落数 (cfu)。杀菌率 (P)公式为:

式中:N1为CK菌落数;N2为处理菌落数。

1.6 菌袋污染情况记录

分别在不同消毒剂后接种450袋菌袋，在第50天、第60天记录菌袋的污染数量，计算污染率。

2 结果与分析

2.1 不同消毒剂对接种箱内微生物数量的影响

细菌和真菌空白对照均无菌体检出，计算2次重复各数据平均值，结果见图1。

从图1可以看出，接种箱内不进行消毒的对照CK，其细菌和真菌数量都明显多于消毒后各处理的数量，证明实验设计的消毒剂对减少接种箱内细菌和真菌具有一定的效果。而在2种消毒剂中，甲醛和高锰酸钾配制的消毒剂杀灭接种箱内细菌和真菌效果好于气雾消毒剂，其中处理1可使接种箱中细菌数量降到26.5 cfu·m－3，真菌数量降到1.0 cfu·m－3，对细菌和真菌的杀菌率分别为96.5%和95.6%;而处理2能使接种箱中的细菌含量数量降为170 cfu·m－3，真菌的数量降到2.6 cfu·m－3，对细菌和真菌的杀菌率分别为77.5%和88.7%。

2.2 不同消毒剂对接种菌袋污染情况的影响

接种箱每次经过不同消毒处理后，接种毛木耳菌袋450袋，在发菌第50天和第60天记录菌袋的污染数量，由于第60天后菌袋即上架出耳，因此，所计算污染率针对的是发菌过程中毛木耳菌袋，结果见表1。

表1 不同消毒剂对接种毛木耳菌袋的污染情况的影响

由表1可知，在接种箱中经过甲醛和高锰酸钾配制的消毒剂消毒过后，接种的毛木耳菌袋污染率最低，仅有1.22%的菌袋被污染，而气雾消毒剂消毒过后接种的毛木耳菌袋污染率是9.22%，没经过消毒的对照处理接种的毛木耳菌袋污染率是37.44%，在3个处理中污染率最高。

3 小结

甲醛和高锰酸钾配制的消毒剂以及气雾消毒剂是食用菌接种过程中常用的2种消毒剂，尽管如此，较少见关于此两种消毒剂在接种箱中杀菌效果及其对毛木耳菌袋污染情况的报道。根据实验结果可知，经过不同消毒剂消毒后对接种箱内的杀菌效果明显好于不进行消毒的对照。甲醛和高锰酸钾配制的消毒剂对杀灭接种箱中的细菌和真菌有较好的效果，使用此种消毒剂杀菌后接种的毛木耳菌袋污染率也最低，说明该消毒剂杀菌效果良好，具有较好的应用价值。而利用气雾消毒剂杀菌的处理杀灭接种箱中细菌和真菌的效果以及降低该处理后毛木耳菌袋污染率方面的效果均次之。

[1]胡四新.接种箱污染及其防治 [J].中国食用菌，2007，26(2):59.

[2]卯晓岚.中国大型真菌 [M].郑州:河南科学技术出版社，2000.

[3]袁明生，孙培琼.四川蕈菌[M].成都:四川科学技术出版社，1995.

[4]GB/T18883－2002.《室内空气质量标准》[S].

[5]赵斌，何绍江.微生物学实验[M].北京:科学出版社，2002.

[6]戴景林.评空气微生物平板采样的奥梅梁斯基换算式 [J].环境与健康杂志，1994，11(1):173－176.