昆明市延安医院2001—2012年产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌耐药性变迁

黄云昆， 朱雯梅， 姚 瑶， 王 佳， 翁媛媛

·论著·

昆明市延安医院2001—2012年产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌耐药性变迁

黄云昆， 朱雯梅， 姚 瑶， 王 佳， 翁媛媛

目的分析昆明市延安医院大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶（ESBL）的检出率变迁情况及对常用抗菌药物的耐药性，为临床合理治疗和控制该菌感染提供科学依据。方法用WHONET5.6药敏统计软件统计分析2001—2012年逐年大肠埃希菌ESBL的检出率，分析其变迁情况，并就产ESBL大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性进行分析。结果2001—2012年共分离到非重复大肠埃希菌3 177株，其中产ESBL大肠埃希菌1 906株，总阳性率为60.0%（1 906/3 177）。期间2001年ESBL阳性检出率最低，为36.9%（59/160），以后逐年上升，以2003—2004年上升最为明显，从48.4%（75/155）上升至63.2% （74/117），2008年产ESBL大肠埃希菌检出率最高，为72.9%（175/240），从2004—2012年ESBL检出率呈现出波动状态，波动在54.2%～72.9%，2008—2012年表现出逐年下降趋势。在常用抗菌药物中，产ESBL大肠埃希菌对美罗培南和亚胺培南的敏感率最高，分别为95.5%和95.1%；对阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦、呋喃妥因、头孢西丁、头孢吡肟和头孢他啶也有较高的敏感率，分别为91.9%、85.7%、74.1%、85.7%、72.6%、76.3%和61.4%；对环丙沙星、左氧氟沙星的敏感率较低，分别为27.8%和30.3%。结论大肠埃希菌中ESBL检出率在经历了一个快速上升期后，目前似已进入一个相对平稳波动期，美罗培南和亚胺培南等碳青霉烯类仍是对产ESBL大肠埃希菌抗菌活性最强的抗菌药物。该菌对哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦、阿米卡星、呋喃妥因、头孢西丁、头孢吡肟及头孢他啶等也有较高的敏感性，对氟喹诺酮类敏感性偏低，产ESBL大肠埃希菌感染时宜根据药敏试验结果选用抗菌药物治疗。

大肠埃希菌； 超广谱β内酰胺酶； 耐药性

大肠埃希菌是医院感染最常见的病原菌之一。据全国耐药监测网的监测数据显示，大肠埃希菌为引起医院感染首位的病原菌［1］，可引起呼吸道、伤口、血流、泌尿道等多种器官和组织的感染，同时也是最常见的医院感染多重耐药菌之一。该菌主要的耐药机制为产质粒介导的超广谱β内酰胺酶（ESBL），可对所有的青霉素类、头孢菌素类及单环类等β内酰胺类抗生素耐药，对临床有效治疗大肠埃希菌引起的感染造成了很大困难。其位于质粒的耐药基因易于通过基因转移和基因重组，在同种或不同种菌株间传播，可引起耐药性的迅速传播和医院感染的暴发流行。分析大肠埃希菌中ESBL检出率的变迁情况及对该菌有效的治疗药物，对临床合理治疗、有效控制产ESBL大肠埃希菌引起的感染均有重要作用。本课题分析了我院2001—2012年大肠埃希菌ESBL检出率的变迁及耐药性情况，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 所有菌株来源于我院2001—2012年住院和门诊患者标本，包括痰、肺泡灌洗液等呼吸道分泌物、血液、尿液、伤口分泌物、脓液等，按常规方法培养分离菌株。

1.1.2 仪器和试剂 自动微生物鉴定药敏系统VITEK-32及革兰阴性菌鉴定卡GNI+，VITEK2-Compact及革兰阴性菌鉴定卡GN、药敏卡ASTGN14由生物梅里埃公司提供，K-B法MH培养基购自杭州天和生物制品有限公司，美罗培南、亚胺培南、头孢哌酮-舒巴坦药敏纸片为OXOID产品，其他药敏纸片由北京天坛药物生物技术开发公司提供，药敏质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853，由云南省临床检验中心提供。

1.2 方法

1.2.1 菌种鉴定和药敏试验 按仪器操作程序用VITEK-32或VITEK2-Compact进行菌种鉴定，药敏试验2012年以前为K-B法，2012年为VITEK2-Compact自动仪器法，ESBL检测按NCCLS/CLSI标准采用双纸片协同法、表型确证法及仪器法。

1.2.2 数据分析 根据CLSI 2011折点标准，用WHONET5.6药敏统计软件进行统计分析，剔出重复菌株，只统计每例患者首次分离株。

2 结果

2.1 大肠埃希菌中ESBL的检出情况

2001—2012年12年间从各类临床标本中共分离到非重复大肠埃希菌3 177株，其中住院患者2 904株，门诊患者273株，ESBL总阳性率60.0% （1 906/3 177），其中住院患者ESBL阳性率61.2% （1 777/2 904），门诊患者为47.3%（129/273）。

2.2 大肠埃希菌中ESBL检出率的变迁

2001—2012年大肠埃希菌中ESBL检出率的变迁见表1。

表1 大肠埃希菌ESBL检出率的变迁Table1 Changing prevalence of ESBLs-producing Escherichia coli during the period from 2001 to 2012

2.3 产ESBL大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性

2001—2012年分离的产ESBL大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性见表2。

表2 产ESBL大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药率和敏感率Table2 Susceptibility of ESBLs-producing Escherichia coli to commonly used antimicrobial agents

3 讨论

分析2001—2012年大肠埃希菌ESBL检出率变迁情况可以看出，ESBL检出率的变迁大致可分为3个时期，第1个时期为2001—2004年，ESBL的检出率呈现出明显上升，和国内其他学者的研究结果一致［2-3］，其检出率及上升速度均明显高于国外同期研究结果［4-5］。第2阶段为2004—2011年间，ESBL的检出率呈现波动状态，与这一时期对ESBL的实验室检测及其耐药机制逐渐有了更多的研究，对产ESBL菌株引起的感染诊治引起了足够的重视，对控制产ESBL菌株的进一步传播起到了积极作用有关。第3阶段为2008—2012年，ESBL的检出率出现逐年下降的趋势，原因可能是在这期间，卫生部先后颁布多个加强抗菌药物管理的制度，对产ESBL菌株起到了有效控制作用。尤其是卫生部2010年开始的合理应用抗菌药物专项整治工作，提高了临床对微生物检验标本的送检率，使大肠埃希菌ESBL的检出率呈现下降趋势。

虽然近年来国内很多地区不同程度地出现了产碳青霉烯酶（KPC酶）、高产β内酰胺酶和抗生素渗透障碍等耐药机制的大肠埃希菌和其他肠杆菌科细菌［6］，使大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌对碳青霉烯类出现了耐药性，但从我们的统计结果看，亚胺培南和美罗培南仍表现出对产ESBL大肠埃希菌高度的抗菌活性；大肠埃希菌对哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦等酶抑制剂复合制剂、阿米卡星、头孢西丁等仍保持着较高敏感性。该菌对氟喹诺酮类药物的耐药性很高。本资料显示，在采用CLSI 2010新折点后，产ESBL大肠埃希菌对头孢他啶、头孢吡肟具有较高的敏感率，对头孢曲松的耐药率则很高。

总之，目前大肠埃希菌中ESBL的检出率仍较高，各级医院应继续严格执行卫生部对合理应用抗菌药物和多重耐药菌的各种管理制度，重视包括对产ESBL在内的多重耐药菌的管理，合理应用抗菌药物，严格进行消毒隔离工作，有效控制产ESBL大肠埃希菌耐药性的发生发展。美罗培南、亚胺培南仍是对产ESBL大肠埃希菌最强的抗菌药物；哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮-舒巴坦、阿米卡星、呋喃妥因、头孢西丁、头孢吡肟及头孢他啶等也有较高的抗菌活性，可根据具体感染情况选用，氟喹诺酮类药物不宜用于产ESBL大肠埃希菌感染的经验治疗。

［1］ 薛峰，吕媛.卫生部全国细菌耐药监测网2011年度非ICU住院感染患者细菌耐药监测［J］.中国临床药理学杂志，2012，28（12）；910-915.

［2］ 叶晓光，王若伦，林红燕，等.产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌耐药谱动态观察［J］.中华医院感染学杂志，2004，14（5）；492-495.

［3］ 陈孝进，彭兰.3种常见肠杆菌科细菌耐药性变迁调查［J］.中华医院感染学杂志，2006，16（1）；112-113.

［4］ Luzzaro F，Mezzatesta M，Muenaiolic C，et al.Trends in production of extended-spectrumβ-lactamases amongEnterobacteriaof medical interest；report of the second Italian Nationwide Survey［J］.J Clin Microbiol，2006，44 （5）；1659-1664.

［5］ Carattdi A，Garcia-Fernandez A，Varesi P，et al.Molecular epidemiology ofEscherichia coliproducing extended-spectrum beta-lactamases isolated in Rome，Italy［J］.J Clin Microbiol，2008，46（1）；103-108.

［6］ 张嵘，蔡加昌，周宏伟，等.肠杆菌科细菌中质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶的检测［J］.中华检验医学杂志，2008，31（10）；1134-1141.

Changing prevalence and antibiotic resistance profile of extended-spectrum β-lactamases-producing Escherichia coli strains during 2001-2012 in Kunming Yan'an Hospital

HUANG Yunkun，ZHU Wenmei，YAO Yao，WANG Jia，WENG Yuanyuan.（Department of Laboratory Medicine，Kunming Yan'an Hospital，Kunming 650051，China）

；ObjectiveTo investigate the changing pattern of antibiotic resistancein the extended-spectrumβ-lactamases（ESBLs）producingEscherichia colistrains for better supporting clinical treatment and infection control.MethodsWHONET 5.6 software was used to analyze the changing pattern of antibiotic resistance in ESBLs-producingE.coliduring the period from 2001 to 2012.ResultsDuring the period from 2001 to 2012，a total of 3 177 non-duplicateE.colistrains were isolated in our hospital，of which 1 906 were ESBLs-producingE.coli.The overall prevalence of ESBLs was 60.0%（1 906/3 177）.In 2001，the prevalence of ESBLs was the lowest（36.9%），and since then increased gradually.An obvious increase was documented from 2003（48.4%）to 2004（63.2%）.In 2008，the prevalence of ESBLs reached peak of 72.9%.During 2004 and 2012，the prevalence of ESBLs ranged from 54.2%to 72.9%.And from 2008 to 2012，the rate declined yearly.Among the common antibiotics，meropenem（95.5%）and imipenem（95.1%）showed the highest susceptibility rate.About 91.9%，85.7%，74.1%，85.7%，72.6%，76.3%，61.4%of these strains were still sensitive to amikacin，piperacillin-tazobactam，cefoperazone-sulbactam，nitrofurantoin，cefoxitin，cefepime，and ceftazidime，respectively.About 27.8%and 30.3%of these strains were susceptible to ciprofloxacin and levofloxacin，respectively.ConclusionsAfter a period of rapid increase，the prevalence of ESBLs-producingE.coliseems stable now.Carbapenems such as meropenem and imipenem are the most active antibiotics against ESBLs-producingE.coli.Piperacillin-tazobactam，cefoperazone-sulbactam，amikacin，nitrofurantoin，cefoxitin，cefepime，and ceftazidime also provide relatively high antimicrobial activity.Fluoroquinolones are no longer suitable for treatment of the infections caused by ESBLs-producingE.coli.

；Escherichia coli；extended-spectrumβ-lactamases；resistance

R378.21

A

1009-7708（2015）02-0146-03

2014-04-04

2014-07-07

昆明市延安医院医学检验科，昆明 650051。

黄云昆（1966—），男，学士，副主任技师，主要从事临床微生物检验与细菌耐药研究。

黄云昆，E-mail；huangyunkun®hotmail.com。