临床分离肠杆菌科细菌1 580株的耐药性分析

方亚平， 刘 周， 童 杨， 周 强， 管世鹤， 沈继录

·论著·

临床分离肠杆菌科细菌1 580株的耐药性分析

方亚平1， 刘 周1， 童 杨1， 周 强1， 管世鹤1， 沈继录2

目的分析临床分离肠杆菌科细菌的分布及耐药性，为临床合理使用抗菌药物提供实验室依据。方法用常规方法分离和鉴定细菌，K-B法进行药敏试验，结果参照CLSI 2011年版标准判读。结果2012年共分离1 580株肠杆菌科细菌，以大肠埃希菌、克雷伯菌属和肠杆菌属为主，分别占51.3%、26.4%和12.2%；主要分离自尿液标本和痰标本。药敏结果显示，肠杆菌科细菌中不同菌种对碳青霉烯类抗生素仍呈敏感，耐药率＜5%；其次为对阿米卡星和哌拉西林-他唑巴坦，耐药率均＜20%；对氨苄西林和头孢唑林的耐药率较高，均＞50%。结论该院肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素虽最敏感，但已出现耐药菌株。

肠杆菌科细菌； 耐药性； 碳青霉烯类

临床抗菌药物的不合理应用，使细菌对抗菌药物的耐药性明显上升。大肠埃希菌、克雷伯菌属等肠杆菌科细菌是医院感染常见的病原菌，因其耐药率快速增长，尤其是多重耐药和泛耐药菌株的出现受到临床越来越多的关注［1］。通过对肠杆菌科细菌的耐药性进行监测和分析，可为临床合理使用抗菌药物提供依据。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

菌株来自2012年1—12月安徽医科大学附属第二医院临床标本分离的肠杆菌科细菌共1 580株，剔除同一患者相同部位重复分离菌株。质控菌株为大肠埃希菌ATCC 25922、大肠埃希菌ATCC 35218、肺炎克雷伯菌ATCC 700603。

1.2 抗菌药物及培养基

抗菌药物纸片及MH培养基为英国OXOID公司产品。

1.3 细菌鉴定及药敏试验

细菌的分离培养按照《全国临床检验操作规程》进行［2］，采用MicroScan-40Si微生物鉴定仪鉴定菌株，药敏试验采用K-B纸片法，并依据CLSI 2011年版标准判定结果［3］。

1.4 产超广谱β内酰胺酶（ESBL）测定

依据CLSI 2011推荐的ESBL纸片筛选法和酶抑制剂增强试验确证法测定大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中产ESBL株。

1.5 统计分析

采用WHONET5.6软件进行数据分析。

2 结果

2.1 菌株分布

1580株肠杆菌科细菌标本分布以尿液、痰液和脓液为主，且主要分离自急诊外科、呼吸内科、肾内科和泌尿外科等科室，见表1、2。1 580株肠杆菌科细菌主要包括大肠埃希菌、克雷伯菌属和肠杆菌属，菌株构成情况见表3。

2.2 药敏试验

常见肠杆菌科细菌对抗菌药物的药敏结果见表4、5。

表11 580株肠杆菌科细菌在各类标本中的分布Table1 Distribution of 1 580 strains of Enterobacteriaceae by specimen source

表2 常见标本的科室分布Table2 Distribution of the isolates by hospital department

表31 580株肠杆菌科细菌构成Table3 Distribution of the 1 580 strains of Enterobacteriaceae by bacterial species in 2012

表4 常见肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率Table4 Resistance rates of Enterobacteriaceae species to antimicrobial agents （%）

表5 产和非产ESBL大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌对抗菌药物的耐药率Table5 Resistance rates of ESBLs-producing and ESBLs-nonproducing E.coli，Klebsiella and Proteus strains to antimicrobial agents （%）

3 讨论

肠杆菌科细菌为条件致病菌，近年来已成为医院感染最常见的病原菌之一，并有多重耐药及泛耐药菌株的出现。多重耐药是指细菌对3类或以上化学结构不同的抗菌药物耐药，泛耐药是指细菌对所有抗菌药物都耐药［4］。本次监测结果显示，2012年我院标本中已经出现多重耐药菌株，主要分布在重症监护病房（ICU）。1 580株肠杆菌科细菌主要来源于尿液和痰液，分别占33.4%和32.2%；主要分布的科室为急诊外科、肾内科、泌尿外科和ICU等，这些科室的患者导尿管应用较多，易造成尿路感染。1 580株肠杆菌科细菌主要以大肠埃希菌、克雷伯菌属和肠杆菌属为主，这与胡付品等［5］报道结果一致。

对本院肠杆菌科细菌耐药性数据分析，结果显示肠杆菌科细菌对大部分青霉素类和头孢菌素类抗生素耐药率高，对氨苄西林和哌拉西林的耐药率达30%以上，对头孢唑林和头孢呋辛的耐药率达40%以上，对环丙沙星和甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑的耐药率亦较高，与张晋会等［6］监测数据一致；对庆大霉素耐药率达20%以上，但对阿米卡星的耐药率低于10%。大肠埃希菌对头孢吡肟的耐药率达50.2%，克雷伯菌属、肠杆菌属、变形杆菌属和枸橼酸杆菌属对头孢吡肟的耐药率均较低。大肠埃希菌为分离率最高的细菌，该菌对哌拉西林-他唑巴坦耐药率为4.0%；大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBL菌株对头孢他啶的耐药率低于头孢曲松和头孢噻肟，与王辉等［7］报道一致。第三代头孢菌素的广泛应用是导致ESBL菌株出现和传播的因素，因此，临床应少用第三代头孢菌素，防止ESBL菌株的进一步播散［8］。

目前碳青霉烯类抗生素是治疗革兰阴性杆菌感染，尤其是多重耐药肠杆菌科细菌感染最有效的抗菌药物［9］，然而，随着该类药物在临床中的广泛应用，已出现相应耐药菌株。Rhomberg等［10］报道，肺炎克雷伯菌对美罗培南的耐药率由2004年的0.6%升至2008年的5.6%。Hidron等［11］报道在导管相关感染的患者中，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药率分别为4.0%和10.8%。Deshpande等［12］对1999—2005年收集的8 885株肠杆菌科细菌调查发现，亚胺培南和美罗培南对51株菌株的MIC值升高。本研究除变形杆菌属外，大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属和枸橼酸杆菌属均分离出对碳青霉烯类抗生素的耐药株，大肠埃希菌对美罗培南的耐药率为1.1%，克雷伯菌属对厄他培南的耐药率为4.8%，肠杆菌属对美罗培南的耐药率为1.2%，枸橼酸杆菌属对美罗培南的耐药率为2.1%。目前，国内报道碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌的主要耐药机制是产生KPC-2型碳青霉烯酶，少数菌株为产ESBL和AmpC酶合并外膜孔蛋白缺失等［13］，本研究中出现的耐药菌株属于何种机制，值得进一步研究。

建立细菌耐药监测体系，了解临床细菌尤其是耐药菌的分布和传播趋势，为临床合理使用抗菌药物提供实验室依据，对临床治疗和采取措施控制这些耐药菌株在医院内的传播和流行有着重要意义。

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Analysis of antibiotic resistance in 1 580 clinical strains of Enterobacteriaceae

FANG Yaping，LIU Zhou，TONG Yang，ZHOU Qiang，GUAN Shihe，SHEN Jilu.（Department of Laboratory Medicine，the Second Hospital Affiliated to Anhui Medical University，Hefei 230601，China）

；ObjectiveTo investigate the distribution and antibiotic resistance ofEnterobacteriaceaeisolates in 2012.MethodsThe bacterial strains were routinely isolated and identified.Antimicrobial susceptibility testing was performed using Kirby-Bauer method.The results were analyzed according to the standards recommended by CLSI 2011.ResultsA total of 1 580Enterobacteriaceaestrains were collected.The most common species wereE.coli（51.3%），Klebsiellaspp.（26.4%）andEnterobacterspp.（12.2%）.The main source of the isolates was urine and sputum.The antimicrobial susceptibility results showed thatEnterobacteriaceaestrains were the least resistant to carbapenems（＜5%）.The resistance rate to amikacin and piperacillin-tazobactam was lower than 20%.These strains showed the highest resistance rate to ampicillin and cefazolin.ConclusionsEnterobacteriaceaeisolates are mostly sensitive to carbapenem antibiotics，but resistant strains are emerging.

；Enterobacteriaceae； antibiotic resistance； carbapenems

R378

A

1009-7708（2015）02-0171-04

2014-05-21

2014-08-08

国家自然科学基金（81171618）；安徽省教育厅科研基金（KJ2012Z165）。

1.安徽医科大学第二附属医院检验科，合肥 230601；2.安徽医科大学第一附属医院。

方亚平（1974—），女，医学硕士，主管技师，主要从事临床微生物检验。

沈继录，E-mail；Shenjilu®126.com。