郑风敏 李 彬
河南省鹤壁市食品药品检验所,河南 鹤壁 458030
HPLC法测定注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量
郑风敏 李 彬
河南省鹤壁市食品药品检验所,河南 鹤壁 458030
目的:建立注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量测定方法。方法:HPLC法;C18柱(4.6×150mm,5μm);流动相:0.02mol/l正辛胺溶液-乙腈(73∶27);流速:1.0 ml/min;检测波长:254nm;柱温:20℃;进样量:20μl。结果:头孢曲松在浓度91.9~459.6μg/ml与峰面积有良好的线性关系(r=0.9996)。结论:该法简单,专属性强,准确度高,可用于对注射用头孢曲松钠的质量控制。
HPLC;头孢曲松;含量测定
头孢曲松为第三代头孢菌素,对革兰阴性菌包括肠杆菌类、铜绿假单胞菌及厌氧菌有较强的作用,用于敏感致病菌所致的下呼吸道感染、尿路、胆道感染,以及腹腔感染、皮肤软组织感染、骨和关节感染、败血症、脑膜炎等感染预防。单剂可治疗单纯性淋病[1]。本文采用HPLC法测定注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量,准确可靠,简便。同时通过HPLC色谱图,可以判断注射用头孢曲松钠的质量控制水平,为临床用药提供依据。
1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪(Waters 2695 HPLC PumPWaters;2998二级管阵列检测器;Epower化学工作站);赛多利斯CPA225D电子分析天平。
1.2 试药 头孢曲松对照品(批号:130480-200903,中国药品生物制品检定所)。注射用头孢曲松钠 (批号:1212061、1301182,辅仁药业集团有限公司)。水为纯化水;乙腈为色谱纯;正辛胺为化学纯,其他试剂均为分析纯。
2.1 色谱条件[2]色谱柱:Waters Sunfire C18柱(4.6× 150mm,5μm);流动相:0.02mol/l正辛胺溶液-乙腈(73:27),并用磷酸调节pH值6.5;流速:1.0 ml/min;检测波长:254nm;柱温20℃;进样量20μl。
2.2 溶液的制备[2]
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称定头孢曲松对照品适量,加流动相溶解并定量稀释制成0.22mg/ml的对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取供试品约22mg,置100ml量瓶中,加流动相溶解并定量稀释制成0.22mg/m l的供试品溶液。
2.3 线性关系的考察 精密称取对照品26.32mg,置100m l容量瓶中,加流动相定量稀释至刻度,摇匀,作为储备液。分别精密吸取储备液2.0、3.0、5.0、10.0m l,分别置10、10、10、25m l量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀。分别吸取配置好的四种溶液及储备液在上述色谱条件下准确进样20μl测定,以各溶液的浓度为横坐标,峰面积为纵坐标进行回归,其回归方程为Y=56941X+263729,r=0.9996,头孢曲松在浓度91.9μg/m l~459.6μg/m l与峰面积有良好的线性关系。
2.4 精密度试验 精密称取对照品适量,加流动相溶解并定量稀释制成每1m l中约含0.22mg的对照品溶液,准确进样20μl,连续进样5次,记录色谱图,计算头孢曲松峰面积的RSD为0.4%。结果表明:本实验进样精密度良好。
2.5 重复性试验 取“2.2.2项”下供试品溶液,按上述色谱条件,准确进样20μl,依法平行测定6次,以峰面积计算,RSD=0.2%。结果表明:该方法重现性好。
2.6 稳定性试验 精密量取同一供试品溶液,于0、2、4、6h分别准确进样20μl,在上述色谱条件下,记录色谱图,计算头孢唑林峰面积的RSD为0.1%。结果表明:注射用头孢曲松钠在6h内稳定。
2.7 加样回收率试验 精密称定已知含量的供试品约11mg,精密称定一定量的头孢曲松对照品,按“2.2.2项”下的方法制成供试品溶液,测定其峰面积,计算供试品的平均回收率为99.8%,RSD为1.2%。结果见表1。
2.8 含量测定 取两批供试品,精密称定,按“2.2.2项”下的方法配置成供试品溶液,在上述色谱条件下进行含量测定,按外标法以峰面积计算。结果见表2。
头孢曲松钠易溶于水,对其检测选择以水相为主的流动相,但在其中加入微量的扫尾剂 (正辛胺),可防止样品在测定过程中产生拖尾现象。加入磷酸可以形成磷酸盐缓冲液,使流动相缓冲能力更强,在测定过程中可以使头孢曲松钠达到更好的分离纯化效果,使测定结果更准确,因此选用磷酸调节流动相pH值。
本实验建立的HPLC法测定头孢曲松含量的方法,该方法准确,快速,重现性良好,从而为实际工作中对药品质量的控制提供科学的依据。
[1]刘俊田.药理学[M].郑州:郑州大学出版社,2004:382-383.
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典 (二部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:181-183.
Determ ination of ceftriaxone sodium for injection by HPLC
ZHENG Feng-min LI-Bin
Hebi Institute for Food and Drug Control,Hebi458030,China
To estabilish amethod for the determination of ceftriaxone sodium for injection.M ethod HPLCC18(4.6×150mm,5μm)column was used with n-octylamine(0.02mol/l)and acetonitrile(73:27).The flow rate was 1.0 ml/min.The detection wave length was254nm.The column temperaturewas at20℃,and the inject volumewas20μl.Results The linearities of cefazolin sodium were obtained separately over the rang of were 91.9μg/ml~459.6μg/ml(r=0.9996)。Conclusion This Method is simple,accurate,and could be adopted for the quality control of this durg.
ceftriaxone sodium;determination
R284.1
A
1007-8517(2015)11-0010-02
2015.03.12)