193例间隔24 h连续两次射精前后精液参数的比较

邹 晖，李 娟，符免艾，黄 勇

(海南省农垦总医院生殖科，海南 海口 570311)

193例间隔24 h连续两次射精前后精液参数的比较

邹 晖，李 娟，符免艾，黄 勇

(海南省农垦总医院生殖科，海南 海口 570311)

目的 研究24 h内连续射精对正常男性精液质量的影响。方法193名行夫精宫腔内人工授精(AIH)的男性间隔24 h各取精1次，进行精液参数分析。结果精液量、精子密度、上游法处理后精子总数均呈下降趋势，差异有统计学意义(P＜0.05)，精子活动率(a+b级)呈上升趋势，但差异无统计学意义(P＞0.05)。结论正常男性精液量、密度、上游法处理后精子总数随射精频率增加有所降低，但各参数均在正常范围内，而精子活动率有所增加，间隔24 h连续两次射精对精子质量并无太大影响。

精液；射精频率；精液质量；夫精宫腔内人工授精

精液分析是评估男性生育力最常用、最直观的重要指标，在不孕症的诊治中有重要意义。世界卫生组织建议精液分析的禁欲时间为2～7 d为宜，但在人类辅助生殖技术(ART)治疗中，究竟禁欲多长时间精子质量更佳、更有利于改善妊娠结局尚无定论。在夫精人工授精(AIH)治疗中，我们可在同一促排卵周期，女方排卵前后进行两次夫精人工授精，以期提高妊娠率。我们选取2008年4月至2013年12月在海南省农垦总医院生殖科女方同一促排卵周期间隔24 h进行两次夫精人工授精的男性精液进行了回顾性的分析，为进一步探讨第2次夫精人工授精的必要性，同时为减轻男方因连续两次采精担心影响精子质量的精神压力提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 386份精液标本均来自我院生殖科进行同一促排卵周期两次夫精人工授精的193名男性，年龄21～44岁，平均30.2岁，均经过不育症的前期筛查，体检无性传播疾病，无睾丸、附睾及输精管异常，无精索静脉曲张、前列腺炎、精囊炎及其他生殖道炎症。

1.2 方法

1.2.1 采集精液标本 嘱男方禁欲2～7 d，在女方排卵前后，间隔24 h，分别两次手淫法留取全部精液标本，收集在一次性无菌无毒性取精杯中，待完全液化后行精液常规分析。

1.2.2 精液常规参数检测 包括精液量、精子密度、活动率(a+b级)、上游法处理后精子密度。按照世界卫生组织推荐的方法进行精液常规分析。

1.2.3 精液分析的质量控制 精液常规参数检测由同一实验员操作，据WHO人类精液实验室检验手册第五版标准[1]，用同一块Makler精子计数板(以色列产)完成，统一采用上游法处理精液，处理后的精子悬液统一留取0.3ml。

1.3 统计学方法 应用Microsoft excel建立数据库，采用SPSS18.0统计软件进行数据处理，其中计量资料以均数±标准差(±s)表示，采用t检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结 果

间隔24 h采精，第2次精液量、精子密度、处理后精子密度呈下降趋势，差异有统计学意义(P＜0.05)，但各值均在正常范围内。精子(a+b级)活动率呈上升趋势，但差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。

表1 193名男性386份精液标本精液常规检查结果比较(±s)

表1 193名男性386份精液标本精液常规检查结果比较(±s)

次数第1次第2次参考值下限t值P值精液量(ml)2.46±0.071.93±0.591.510.5850.000活动率(%) (a+b级)44.80±0.9645.77±0.9932 -1.0510.259处理前精子密度(106/ml)81.47±6.2763.75±2.49153.0220.003处理后精子密度(106/ml)47.87±2.0639.73±1.58155.2770.000

3 讨论

精液是由睾丸分泌的高浓度精子，附睾、输精管、前列腺和精囊腺分泌的液体组成。成年男性的双侧睾丸组织每天可产生成千上亿条精子，由精原细胞发展到精子的过程是连续的，需要4个生精上皮周期约64 d，精子在附睾内最终成熟需2～3周。

世界卫生组织(World Health Organization，WHO)建议行精液常规检查前患者禁欲2～7 d[1]，有研究发现禁欲时间通过影响核蛋白转型而影响精子核染色质的正常凝聚和稳定性，也有认为禁欲时间通过影响精子顶体酶活性而影响精子的受精潜能。目前关于禁欲时间的长短对精液量、密度、活动力及精子正常形态的影响，各家均有不同方面的报道。Levitas等[2]在禁欲时间对精液质量的影响中发现，精液正常组与少精组表现有所不同，随着禁欲时间延长(0～14 d)，两组精液量、精子密度均增加，特别是少精组，精子密度在禁欲1 d后达最高峰，到禁欲5 d趋于平稳。精子活动率，正常组在禁欲7 d前逐渐上升，7 d后下降明显；少精组则在禁欲1～4 d升高，5 d后开始下降。精子正常形态，正常组10 d内无明显变化；少精组在禁欲0～2 d较高，稍后下降。2013年Sánchez-Martín等[3]报道：连续排精4 d后禁欲12 h再取精与禁欲4 d后取精的ICSI患者精液质量相比较，前者虽然精液量减少，但精子活动力和精子密度与后者无差异，更重要的发现是前者精子DNA碎片率降低27%，而妊娠率也较后者高(56.4%vs43.3%)。由此可以尝试，对于重度少、弱精症的患者，是否可以通过缩短禁欲时间改善精液质量。对此，Gosálvez等[4]研究认为，精子DNA碎片含量能较直观地反映患者的精子质量，且精子DNA碎片含量高会影响精子受精能力、受精后原核形成、胚胎着床及子代健康[5-7]。而通过缩短禁欲时间和精子洗涤，则可以减少精子DNA碎片。理论上，延长禁欲时间会增加精子暴露于活性氧的时间，体内高活性氧水平导致精子DNA损伤，加快精子凋亡速度，从而对精子功能与妊娠结局有不利影响[8-10]，但目前禁欲时间对精子DNA损伤的具体机制如何尚未可知[11]。

本研究中，笔者通过对193名男性间隔24 h前后两次取精的精液质量进行比较分析，结果显示，第2次取精精子(a+b级)活动率呈上升趋势，虽然精液量、精子密度、处理后精子总数呈下降趋势，但各值均在精液的正常参考值下限之上。因此，对于同一促排卵周期女方排卵前后间隔24 h行第2次AIH，因精子质量并无太大波动，是可取有效的。此外，本研究对指导要求受孕夫妇的同房频率有临床指导意义，即对于性功能正常及精液质量基本正常的男性，在妻子排卵期间隔日或每日同房，并不会引起精液质量的太大波动。据此，对于担心连续两次取精会影响精液质量、认为需要“养精蓄锐”的男性患者，可以通过研究数据及结论提前对患者进行心理干预，减轻患者的精神紧张以降低取精失败发生率，从而进一步有利于提高妊娠率。

[1]WHO.Laboratory manual for the exzmination and processing of human semen[M].5thed.Cambridge：Cambridge University Press,2010.

[2]Levitas E,Lunenfeld E,Weiss N,et al.Relationship between the duration of sexual abstinence and semen quality：analysis of9486 semne samples[J].Fertil Steril,2005,83(6)：1680-1686.

[3]Sánchez-Martín P,Sánchez-Martín F,Sánchez-Martín M,et al.Increased pregnancy after reduced male abstinence[J].Syst Biol Reprod Med,2013,59(5)：256-260．

[4]Gosálvez J,Gosálvez-Martínez M,López-Fernández C,et al.Shorter abstinence decrease sperm deoxyribonucleic acid fragmentation in ejaculate[J].Fertil Steril,2011,96(5)：1083-1086.

[5]Smit M,Dohle GR,Hop WC,et al.Clinical correlates of the biological variation of sperm DNA fragmentation in infertile men attending and andrology outpation clinic[J].Inter J Androl,2007,30(1)：48-55.

[6]Shamsi MB,Kumar R,Dada R.Evaluation of nuclear DNA damage in human spermatozoa in men opting for assisted reproduction[J]. Indian J Med Res,2008,127(2)：115-123.

[7]Zini A,Sigman M.Are tests of sperm DNA damage clinically useful?Pros and cons[J].JAndrol,2009,30(3)：219-229.

[8]Williams AC,Ford WC.Relationship between reactive oxygen species production and lipid peroxidation in human sperm suspensions and their association with sperm function[J]Fertil Steril,2005,83 (4)：929-936.

[9]Gallegos G,Ramos B,Santiso R,et al.Sperm DNA fragmentation in infertile men with genitourinary infection by chlamydia trachomatis and mycoplasma[J].Fertil Steril,2008,90(2)：328-334.

[10]戴汝琳,刘睿智.影响精子DNA损伤因素研究进展[J].生殖与避孕,2009,29(6)：358-359.

[11]Desai NR,Mahfouz R,Sharma R,et al.Reactive oxygen specices levels are independent of sperm concentration,motility,and abstinence in a normal,healthy,proven fertile man：a longitudinal study[J].Fertil Steril,2010,94(4)：1541-1543.

Comparison on semen parameters of two successive ejaculations in24 hours∶an analysis of193 cases.

ZOU Hui, LI Juan,FU Mian-ai,HUANG Yong.Reproductive Department,Hainan Provincial Nongken General Hospital,Haikou570311,Hainan,CHINA

ObjectiveTo study the effect of two successive ejaculations in24 hours on the semen quality in normal man.MethodsTwo successive ejaculations were collected from193 normal men with interval of24 h who scheduled for artificial insemination by husband semen(AIH).The semen parameters including semen volumes,pH, sperm densities,sperm motility and total sperm counts were compared.ResultsThe semen volumes,semen densities,total sperm counts decreased(P＜0.05),but they were in the normal range.The sperm motility(a+b grade)increased with no statistically significant difference(P＞0.05).ConclusionWith the increase of the ejaculatory frequency,human semen volumes,densities and total sperm counts decrease(but they are still in the normal range),while the sperm motility increases.Two successive ejaculations do not affect the quality of human semen.

Semen;Ejaculatory frequency;Semen quality;Artificial insemination by husband semen(AIH)

R697

A

1003—6350（2015）16—2403—02

2015-04-07)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.16.0866

邹 晖。E-mail：zouhuihello@163.com