分析高效液相色谱法及在药品检验中的应用

刘立 谢浩

【摘要】目的：探究分析高效液相色谱法及在药品检验中的应用，并总结检验经验。方法：本研究选择银杏叶提取物中银杏黄酮类药物为研究对象，平均分为对照组和实验组，样品量均称取0.2g，其中对照组采用薄层色谱（TLC）法进行检测，实验组组采用高效液相色谱法（HPLC）进行检测，之后，比较两组不同检测方法下的分离率、纯度、精密度和产品回收率。结果：实验组采用高效液相色谱法（HPLC）进行检测后，银杏黄酮水解分离三种主要黄酮贰元，分别为黄酮贰元槲皮素、山萘素和异鼠李素纯组分分离率分别为98.79%、98.77、98.89（P<0.05），纯度分别为99.89%、99.99%、99.97%（P<0.05）；实验组山萘素加样后的产品回收率为99%，明显高于对照组（P<0.05）；以上差异均具有统计学意义。结论：采用高效液相色谱法进行药品检验，具有方法简便、优化、精密度高的优点，能够获得比较好的分离效果和产品回收率，测定结果可靠且快速可行，值得推广应用。

【关键词】高效液相色谱法；薄层色谱；银杏黄酮；临床应用

【中图分类号】R562.21【文献标识码】B【文章编号】1005-0019（2015）01-0598-01

本研究选择银杏耶提取物中银杏黄酮类药物为研究对象，平均分为对照组和实验组，样品量均称取0.2g，探究分析高效液相色谱法及在药品检验中的应用，并总结检验经验。现报告如下。

1.主要试剂与仪器

1.1主要试剂和药品

银杏叶提取物（EGb德国威玛舒培博士药厂，注册证号H20090296）

重蒸水（超纯水仪滤膜过滤）

甲醇（分析纯AR，深圳市华昌化工有限公司）

磷酸（分析纯，深圳市华昌化工有限公司）

黄酮贰元槲皮素对照品（上海亚培生物科技有限公司）

1.2仪器

美国光谱物理公司高效液相色谱仪SP8800泵，54400型积分仪，ChromDe脱气机，Spheri一5RP一18（5um）色谱柱（22ommx4.6mm），进样器配10uL定量管。WatersM490可编程序紫外检测器。

2.实验方法

本研究选择银杏叶提取物中银杏黄酮类药物为研究对象，平均分为对照组和实验组，样品量均称取0.2g，其中对照组采用薄层色谱（TLC）法进行检测，实验组组采用高效液相色谱法（HPLC）进行检测，之后，比较两组不同检测方法下的分离率、纯度、精密度和山萘素产品回收率。

2.1样品制备

称取0.2g银杏叶提取物，加入40ml甲醇，震荡摇匀，使其完全溶解，然后加入1.5mol/L的盐酸溶液40mL，混匀，置水浴锅中37°C加热120分钟，待冷却后，置于50ml容量瓶中，利用甲醇进行定容。室温下放置备用。

2.2高效液相色谱法（HPLC）条件

流动相：甲醇一0.4%磷酸溶液（55：45）

流速：1.omL/mini

柱温：25℃

進样体积：10uL

检测波长：360nm

3统计学方法

本研究中，所有的检测统计学数据采均用SPSS18.0软件进行处理，结果采用均数±标准差（X±s）进行表示，数据均经由SPSS18.0软件进行t检验。P<0.05表示数据具有差异性以及具有统计学意义。P<0.01表示数据具有显著性差异以及具有统计学意义。

4.结果

4.1比较两组不同检测方法下的分离率、纯度、精密度

比较两组不同检测方法下的分离率、纯度、精密度。结果如表1所示。实验组采用高效液相色谱法（HPLC）进行检测后，银杏黄酮水解分离三种主要黄酮贰元，分别为黄酮贰元槲皮素、山萘素和异鼠李素纯组分、分离率分别为98.79%、98.77、98.89（P<0.05），纯度分别为99.89%、99.99%、99.97%（P<0.05）；以上差异均具有统计学意义。

5.讨论

色谱法最初仅仅是作为一种分离手段，是根据混合物中不同组分在流动相和固定相中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些组分在两相间进行反复多次的分配从而得到分，高效液相色谱法（HPLC）是近年来逐渐应用到药品、食品等物质的监测工作当中，本实验通过采用高效液相色谱法（HPLC）分析银杏叶提取物中银杏黄酮类药物，研究发现，采用高效液相色谱法（HPLC）分析后，银杏黄酮水解分离三种主要黄酮贰元，分别为黄酮贰元槲皮素、山萘素和异鼠李素纯组分、分离率分别为98.79%、98.77、98.89（P<0.05），纯度分别为99.89%、99.99%、99.97%，分离率和纯度值都相对于薄层色谱均较高，另外通过外部加样山萘素，检测得知产品回收率为99%。可见，临床上采用尿常规检验联合C-反应蛋白诊断小儿急性阑尾炎，能够有效提高诊断的准确率，降低误诊概率，具有一定的诊断价值，对于急性阑尾炎确诊以及及时治疗具有重要的意义。值得临床推广应用。

参考文献

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