胃癌组织中Akt2、HER2蛋白表达与临床病理学特征的关系

阿娜尔古丽·阿布都热合曼 迪丽努尔·阿西木

胃癌是较为多见的恶性肿瘤，在基因领域中寻找新的治疗靶点及预后指标是当前研究的重点内容。人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor，HER2)作为在细胞中信号传导通路的一个重要启动因子，它对癌细胞增殖、分化以及凋亡的过程有着十分重要的作用［1］;而丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(serine-threonine kinase，Akt2)的基因表达已被证实与肿瘤的生长、转移有着密切关联［2］。因此，Akt2、HER2逐渐成为肿瘤靶向治疗的研究热点。现为探究胃癌患者胃组织Akt2、HER2蛋白表达情况及HER2蛋白与胃癌临床病理学特征的关系，本文对其进行临床研究并报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

将2013年5月-2014年11月在我院收治的90例原发性胃癌患者作为研究对象，同时选取同期在我院行胃镜检查的90例健康体检者作为对照。所有胃癌患者均经过病理检查确诊，其中男性57例，女性33例;年龄36～78岁，平均(54.3±12.7)岁。90例健康体检者的病理活检均显示为正常胃粘膜，其中男性56例，女性34例;年龄35～69岁，平均(51.2 ±11.7)岁。所有患者在参与研究前均得到本人或其家属的知情同意，并报请我院伦理委员会批准。

1.2 方法

胃癌组与健康组的胃黏膜组织均用10%甲酸固定，常规行石蜡包埋，再在含有多聚赖氨酸的溶液中处理以后制备成厚度为4 mm的连续切片。两组切片均采用免疫组织化学SP法来检测其胃粘膜组织中的Akt2、HER2蛋白表达情况，同时也在显微镜下观察细胞的染色状况及形态特点。阳性对照为经过特异性染色的乳腺癌切片，阴性对照则为磷酸盐缓冲液。比较两组Akt2、HER2蛋白的阳性表达情况，并分析胃癌患者的分化程度、浸润深度、肿瘤直径、肿瘤位置、淋巴结转移及TNM分期等病理学指标与HER2表达的关系。

1.3 评定标准

细胞在染色后，Akt2的阳性染色表现于细胞质，釆用半定量法对染色结果进行判定［3］，根据染色的程度以及镜下阳性细胞占据的比例来评定，具体为:①染色强度评分:不着色为0分，淡棕黄色为1分，棕黄色为2分，深棕红色为3分。②阳性细胞所占比例评分:染色阳性细胞占肿瘤细胞的比例＜5%为0分，占5%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，＞75%为4分。将上述两个指标评分相加，总分≤2分表示阴性，总分＞2分则为阳性。

HER2的阳性染色则表现于细胞膜上，其结果评定则是用修订后的Hercep Test评分标准来进行［4］，具体为:①“-”表示肿瘤细胞无染色或仅有＜10%的细胞膜染色;②“+”表示＞10%肿瘤细胞的细胞膜存在轻微染色;③“++”表示＞10%的肿瘤细胞有着弱的基底外侧膜或者整个细胞膜的染色;④“+++”表示＞10%的肿瘤细胞存在中度到高度的基底外侧膜或者整个细胞膜染色。“-”和“+”表示阴性，“++”和“+++”表示阳性。

1.4 统计学处理

应用SPSS 17.0软件包进行统计学处理，计量资料采用t检验，计数资料釆用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者的Akt2与HER2表达情况比较

Akt2蛋白表达，胃癌组共检测出51例为阳性(56.67%)，明显高于健康组 10例(11.11%)，差异具有统计学意义(P＜0.05)。HER2表达胃癌组中有19例阳性(21.11%)，而健康组仅 6例(6.67%)，组间比较差异显著(P＜0.05)，见表1。

表1 两组患者Akt2与HER2的表达情况比较(例，%)

2.2 胃癌组织中Akt2与HER2表达的相关性

在所有的胃癌患者中，两个指标Akt2、HER2均为阳性表达的患者有17例，均为阴性表达的患者有37例，仅Akt2表达阳性而HER2阴性的患者有34例，仅HER2表达阳性而Akt2阴性的患者有2例。Spearman相关分析发现，在胃癌组织中HER2与Akt2这两个指标的表达具有相关性(γ =0.342，P=0.001＜0.05)。

表2 HER2与Akt2表达的相关性分析(例，%)

2.3 HER2表达与胃癌患者临床病理学特点的关系

HER2表达与胃癌分化程度、浸润深度、肿瘤位置、淋巴结转移及TNM分期等临床病理指标有显著相关性(P＜0.05);而肿瘤直径则与HER2表达无相关性(P ＞0.05)。

3 讨论

目前，我国胃癌的发病率虽然较高，但其早期诊断率仍较低，绝大部分胃癌患者在行首次确诊时就已经处于Ⅲ、Ⅳ期，此时多已错过最佳的治疗时机。再加上胃癌根治术的疗效存在一定的局限性，化疗已几乎成为治疗晚期胃癌的主要手段［5］。但是在胃癌化疗过程中常出现耐药现象，致使晚期胃癌的中位生存期仅为8～10个月。分子靶向治疗已成为临床肿瘤研究的治疗新方向和新领域，因此探求有效生物学标记以及新分子靶点也逐渐成为胃癌临床研究的热点［6］。

表3 HER2表达与胃癌患者临床病理学特点的关系(例，%)

3.1 胃癌与Akt2、HER2的表达

我们在研究中发现，胃癌组的Akt2及HER2的阳性表达率分别为56.67%、21.11%，明显高于健康组且差异有统计学意义(P＜0.05)。肿瘤的形成以及发展是在多种基因、环境因素等共同作用下产生的多阶段病理过程。多项研究表明Akt2的表达与肿瘤的形成有着密切的联系。据Vivanco等的研究发现，Akt2蛋白在结肠癌中不仅参与肿瘤的早期形成，还与其细胞分化程度、Dukes分期以及淋巴结转移等方面密切相关［7］。此外，Akt2蛋白在胰腺癌、肺癌等中也均能检测到阳性表达［8-9］。

作为表皮生长因子受体的家族成员，HER2基因是调节细胞生长分化的重要因子。HER2存在于人类第17对染色体长臂的第21位点(17q21)，由它转录生成的mRNA长约为4.8 kb，能编码产生由1255个氨基酸结合而成、长185 KD的跨膜糖蛋白，被命名为P185HER2，常简称为p185蛋白、HER2受体或HER2蛋白［10］。HER2蛋白一般仅在胎儿期表达，胎儿在分娩后通常处于休眠状态;直到成年之后，才能在一部分组织中检测出少量的阳性表达。而患有恶性肿瘤时，如胰腺癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、宫颈癌以及胃癌等肿瘤组织中，HER2蛋白常可被检测到大量表达［11-12］。由此表明，Akt2及HER2在胃癌组织中的表达明显增高，能作为胃癌的检测指标。

3.2 胃癌中HER2与Akt2的联系

在研究HER2与Akt2表达的相关性分析中发现，HER2的表达与Akt2存在着一定的关联。研究表明，HER2蛋白能通过两条信号转导通路起作用:第一条是Ras-Raf-MAPK途径，能参与调控有丝分裂;另一条则为PI3K/Akt2通路［13］，它能加快肿瘤细胞的生长、侵袭与转移速度，同时还抑制瘤细胞的调亡。这两条通路中，HER2主要通过第二条通路的激活来发挥其促进肿瘤以及抵抗化疗药物的作用。HER2与Akt2的分子学机制［14］主要为:①PI3K-Akt2通路在激活后，能上调MMP-2、MMP-9的蛋白表达，进而加快细胞外基质的降解、突破基底膜，增加癌细胞的侵袭浸润能力。②Akt2在激活后能够使HER2的磷酸化增加，并激活下游底物GSK3β，使得β-CAT的降解受拮抗后浓度增高，进而使E-钙黏素的表达下调。③HER2在激活后，能与促进血管生成的相关位点结合，由VEGF/PI3K/AKT/NO/ICAM-1通路使得肿瘤血管的形成与生长增加。因此，在胃癌肿瘤的形成、发展过程中，HER2能与Akt2协同作用来促进肿瘤的生长。

3.3 胃癌HER2的表达与病理学特征分析

在临床病例资料与HER的表达情况进行比较时发现，HER阳性表达的胃癌患者其分化程度、浸润深度、肿瘤位置、淋巴结转移及TNM分期明显高于HER阴性表达的胃癌患者(P＜0.05);而肿瘤直径则在HER不同表达情况的患者间差异不显著(P＞0.05)。中高分化的胃癌中HER2蛋白的阳性表达率较高，说明了胃癌的细胞类型中HER2基因扩增和表达有着一定的选择性。胃癌的浸润深度及淋巴结转移，分别提示了胃癌细胞的局部浸润和远处转移能力。结合TNM分期指标，Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者的肿瘤细胞耐药性较强，生存期较短，临床预后较差;这与Ⅲ、Ⅳ期等中晚期胃癌患者的区域淋巴结转移、浸润较深有关［15］。而HER2在此时的表达程度增加，这也说明HER2蛋白的表达能在一定层程度上反映患者的生存预后。国内外研究也显示，胃癌HER2蛋白过表达的患者，其生存期较HER2蛋白阴性表达的胃癌患者短［16-17］。胃部肿瘤的直径大小常与肿瘤生长位置和条件有着密切关系，在胃体等位置时，因生长空间较大，肿瘤直径较大;而对于胃底等部位时，因空间狭窄而致肿瘤直径较小。此外，直径较大的肿瘤生长速度较缓慢，故而良性程度较大;而恶性种瘤的生长速度较快，但其体积可大可小。

综上所述，胃癌组织中Akt2、HER2蛋白的表达增高，且HER2的表达与病理学表现有关联，能在一定程度上反映胃癌患者的预后情况。

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