急性呼吸窘迫综合征患者血清中嗜酸性粒细胞趋化因子－3、白细胞介素－13和－35的表达及意义

急性呼吸窘迫综合征患者血清中嗜酸性粒细胞趋化因子-3、白细胞介素-13和-35的表达及意义

刘钰曾俊汪卫立

(金华广福医院重症医学科，浙江金华321000)

摘要〔〕目的观察急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清中嗜酸性粒细胞趋化因子(EOTAXIN)-3、白细胞介素(IL)-13及-35表达，分析其临床价值。方法78例ARDS患者作为观察组，70例正常成人血清样本作为对照组，检测两组血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达，分析三者在不同临床特征中的表达差别。结果两组血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达差异有统计学意义。观察组血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达与病变严重程度及预后密切相关。相关分析显示观察组中EOTAXIN-3和IL-13具有正相关性，IL-13和IL-35具有负相关性。结论ARDS患者血清中EOTAXIN-3和IL-13高表达、IL-35低表达不仅可以促进病变进展，还能在一定程度上判断病情严重程度和预后。EOTAXIN-3、IL-13和IL-35可能具有一定的协同作用。

关键词〔〕急性呼吸窘迫综合征；嗜酸性粒细胞趋化因子-3；白细胞介素(IL)-13；IL-35

中图分类号〔〕R56〔文献标识码〕A〔

第一作者：刘钰(1977-)，男，主治医师，主要从事重症医学研究。

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是一种常见的危重症，病死率较高〔1〕，其发病机制复杂，主要与肺水肿形成和肺组织炎症反应发生相关〔2〕。嗜酸性粒细胞趋化因子(EOTAXIN)-3被认为与迟发性变态反应相关的炎性因子，同时对判断急、慢性炎症的程度有一定作用〔3〕。白细胞介素(IL)-13是一种由CD4+的Th2细胞分泌的多效性细胞因子，不仅具有免疫调节作用，还可以激活EOTAXIN，形成炎性的瀑布效应〔4〕。IL-35是IL家族的新成员，可以抑制炎症反应，并防止过度的自身免疫反应发生〔5〕。本研究关注ARDS患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达，探讨其临床意义。

1资料与方法

1.1一般资料2011年1月至2013年12月我院诊治的ARDS患者78例作为观察组，其中男41例，女37例；年龄42~84岁，平均60.3岁。纳入参考JAMA：ARDS柏林定义〔6〕。排除标准：①伴有恶性肿瘤的患者；②有风湿免疫性疾病史的患者；③严重血液系统疾病的患者。选择同期在我院体验证实为健康的成年人血清标本作为对照组，其中男35例，女35例；年龄45~67岁，平均57.7岁。

1.2EOTAXIN-3、IL-13和IL-35检测方法观察组于确诊后抽取空腹静脉血10 ml，对照组抽取空腹静脉血10 ml，离心后分离血清，放在-20℃冰箱中待检。EOTAXIN-3、IL-13和IL-35检测均应用ELISA法。严格实验步骤，努力减少误差。

1.3氧合状态分级轻度：血氧分压(PaO2)/吸入气氧浓度分数(FIO2)=201~300 mmHg，且呼气末正压(PEEP)或持续气道正压(CPAP)≤5 cmH2O。中度：PaO2/FIO2=101~200 mmHg，且PEEP≥5 cmH2O。重度：PaO2/FIO2≤100 mmHg，且PEEP≥10 cmH2O。

1.4统计学方法应用SAS6.12软件进行t检验、方差分析和线性相关性分析。

2结果

2.1两组血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表达的比较观察组中EOTAXIN-3和IL-13表达明显高于对照组，IL-35表达明显低于对照组。见表1。

2.2不同氧合状态分组患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表达的比较不同氧合状态分组患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达差异有统计学意义。见表2。

2.3随访存活组与死亡组血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表达量的比较存活和死亡组血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达量差异有统计学意义。见表3。

2.4观察组中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表达的相关性观察组中EOTAXIN-3和IL-13具有正相关性(r=0.46，P=0.041 2)，IL-13和IL-35具有负相关性(r=-0.48，P=0.040 9)。

组别nEOTAXIN-3(μg/L)IL-13(mg/L)IL-35(mg/L)观察组7878.20±16.4376.71±12.5755.86±20.87对照组7053.34±11.8546.54±9.7698.45±16.76t/P值8.68/0.010811.23/0.003110.13/0.0086

表2不同氧合状态分组患者血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35表达的比较

氧合状态nEOTAXIN-3(μg/L)IL-13(mg/L)IL-35(mg/L)轻度2670.81±20.3266.37±18.5166.46±14.32中度2877.51±19.8674.77±20.4154.65±16.13重度2485.51±20.3189.61±21.2655.73±13.31F/P值8.09/0.01527.97/0.01987.61/0.0214

组别nEOTAXIN-3(μg/L)IL-13(mg/L)IL-35(mg/L)存活组6070.41±20.5164.56±11.2463.47±20.12死亡组1897.13±21.32113.13±32.4633.74±7.65t/P值7.08/0.029811.23/0.00029.31/0.0119

3讨论

ARDS是全身炎症性反应发生在肺部的表现，也提示机体正常炎性反应过度〔7,8〕。在ARDS发展过程中，促炎介质与抗炎介质的平衡失调〔9,10〕。EOTAXIN-3是一种选择性EOTAXIN和强有力的激活剂，通过与其受体结合，引起机体一系列的反应，主要见于炎性疾病，尤其是在炎性介质诱导后使其分泌增多〔11〕。EOTAXIN-3在机体内环境中升高提示机体存在着明显的致炎因子及持续性亚急性或慢性炎症改变〔12〕。IL-13主要由活化的Th2细胞分泌，活化的单核细胞、CD8+细胞和B细胞也可以少量产生。IL-13可以刺激B细胞的增殖过程，减少其凋亡现象，同时对Ig合成有一定的影响〔13,14〕。有研究认为IL-13可抑制单核细胞的抗体介导的细胞毒作用，并调节炎性相关因子DNA和mRNA的表达，在转录水平上抑制其发生，其常与IL-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α等协同作用〔15〕。IL-35是IL家族的新成员，主要由Treg分泌，在正常机体中表达较为稳定，对抑制炎性反应及免疫因子的活性有重要作用〔16,17〕。IL-35可以防止过度的自身免疫反应发生〔18〕。也有观点认为IL-35在经树突细胞刺激后产生，能抑制外周血中CD4和CD8阳性的T细胞反应，抑制过敏性疾病的发展〔19,20〕。

本实验提示EOTAXIN-3和IL-13、IL-35三者异常表达对促进病变进展有重要作用。EOTAXIN-3的高表达是机体炎性高反应状态的一个指标，可以激活嗜碱性粒细胞、CD4阳性的T细胞和树突细胞。研究认为EOTAXIN-3还可以促进IL-1B、IL-4和IL-5的表达，使机体的亚急性炎症或慢性炎症呈持续性发展〔12〕。本实验结果提示EOTAXIN-3、IL-13和IL-35蛋白均参与ARDS的进展过程，也提示在ARDS病变形成和发展过程中联合检测EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达可以在一定程度上判断病变程度和患者的预后，即EOTAXIN-3和IL-13高表达、IL-35低表达时病变进展快，患者的预后差。本文提示EOTAXIN-3、IL-13和IL-35之间具有一定的协同作用。孟莹等〔15〕认为EOTAXIN-3是嗜酸性粒细胞化学激动剂，可以释放信号促使嗜酸性粒细胞向炎症区域浸润，并在过敏反应的早期阶段激活免疫相关细胞，IL-13对EOTAXIN-3有刺激作用，呈明显的量效关系。Li等〔21〕也认为IL-13是引起EOTAXIN-3表达的最重要的细胞因子，而与炎症相关最重要的TNF-α，不能刺激EOTAXIN-3的产生，但是TNF-α可以增加IL-13的表达，进而有效刺激EOTAXIN-3的分泌。

4参考文献

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〔2013-12-19修回〕

(编辑苑云杰)