食管鳞癌组织中Survivin、Caspase-3和Caspase-8的表达及其临床意义

曹　婧，任　美

(郑州铁路职业技术学院，河南 郑州 450052)



食管鳞癌组织中Survivin、Caspase-3和Caspase-8的表达及其临床意义

曹婧，任美

(郑州铁路职业技术学院，河南 郑州 450052)

[摘要]目的探讨食管鳞癌组织中survivin、caspase-3和caspase-8的表达及临床意义，并探讨三者的相互关系。方法采用免疫组化S-P法检测105例食管鳞癌和50例癌旁正常食管黏膜组织中survivin、caspase-3和caspase-8。结果食管鳞癌组织中survivin、caspase-3和caspase-8的阳性率分别为74.3%(78/105)、37.1%(39/105)、39.0%(41/105)，癌旁正常食管黏膜组织中分别为4.0%(2/50)、84.0%(42/50)、80.0%(40/50)，2组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。食管鳞癌组织中survivin的表达与分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)；食管鳞癌组织中caspase-3和caspase-8的表达均与临床分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。食管鳞癌组织中survivin与caspase-3和caspase-8均呈负相关关系(r=-630、-556，P均<0.05)，而caspase-3和caspase-8呈正相关关系(r=0.718，P<0.05)。结论Survivin、caspase-3和caspase-8在食管鳞癌组织中均存在异常表达，survivin可能通过抑制caspase-3、caspase-8表达而促进肿瘤的进展，三者联合检测可用于食管鳞癌的病情和预后评估。

[关键词]食管鳞癌；survivin；caspase-3；caspase-8

细胞凋亡是一种细胞的程序性死亡的生物学过程，其受促进凋亡基因和凋亡抑制基因的调控，正常机体内这种调控处于一种动态的平衡状态，保证机体各器官和组织的正常运行，而肿瘤发生的过程则往往伴随着细胞凋亡调控的失衡。Survivin是凋亡抑制蛋白家族成员之一，可以通过caspase依赖性和非依赖性途径发挥细胞凋亡的调控作用，是细胞凋亡的主要调控效应因子[1-2]。Caspase-3和caspase-8是2种参与细胞凋亡促进作用的核心蛋白[2-4]。本研究通过检测食管鳞癌组织中survivin、caspase-3和caspase-8的表达，探讨细胞凋亡在肿瘤发生和进展中作用，以及调控因素，以期为食管鳞癌的诊断、预后评估提供一定参考数据，并为食管鳞癌的靶向治疗提供靶点选择方向。

1材料与方法

1.1标本来源入组郑州大学第一附属医院肿瘤科2013年1月至2015年1月收治的经病理学确诊的食管鳞癌患者105例，其中男69例，女36例；年龄30~76岁，中位年龄53岁；分化程度：高分化40例，中分化39例，低分化26例；临床分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期39例，Ⅲ期37例，Ⅳ期10例；淋巴结转移：无43例，有62例。同时收集50例癌旁正常食管黏膜组织标本作为对照。

1.2Survivin、caspase-3和caspase-8的检测采用免疫组化S-P法检测105例食管鳞癌和50例癌旁正常食管黏膜组织中survivin、caspase-3和caspase-8，以已知阳性组织作为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。鼠抗人survivin、caspase-3和caspase-8抗体以及S-P免疫组化试剂盒等均购自福州迈新生物工程技术有限公司。

1.3结果评判随机选取5个高倍镜(×400)视野，综合染色强度和阳性细胞比例进行评分，阳性细胞数≤5%计0分，6%~25%计1分，26%~50%计2分，51%~75%计3分，76%~100%计4分；染色强度：无染色计0分，淡黄色计1分，棕黄色计2分，棕褐色计3分。然后两者乘积作为结果，0分为(-)，1~3为(±)，4~6为(+)，7~12为(++)，其中前两者为阴性，后两者为阳性。所有染色评判均有2位病理科医生独立评判，然后综合评判。

1.4统计学处理采用SPSS 17.0进行统计分析，计数资料用百分数表示，比较采用χ2检验，检验水准α=0.05。

2结果

2.1不同食管组织中survivin、caspase-3和caspase-8的表达食管鳞癌组织中survivin、caspase-3和caspase-8的阳性率分别为74.3%(78/105)、37.1%(39/105)、39.0%(41/105)，癌旁正常食管黏膜组织中分别为4.0%(2/50)、84.0%(42/50)、80.0%(40/50)，2组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。

2.2食管鳞癌组织中survivin、caspase-3和caspase-8的表达与其临床病理参数的关系食管鳞癌组织中survivin的表达与分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)；食管鳞癌组织中caspase-3和caspase-8的表达均与临床分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。见表1。

表1　食管鳞癌组织中survivin、caspase-3和caspase-8的表达与其临床病理参数的关系 　n(%)

2.3食管鳞癌组织中survivin、caspase-3和caspase-8表达相互关系食管鳞癌组织中survivin的表达与分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)；食管鳞癌组织中caspase-3和caspase-8的表达均与临床分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。见表2~4。

表2　食管鳞癌组织中survivin与caspase-3的相关性

注：r=-0.630，P<0.05

表3　食管鳞癌组织中survivin与caspase-8的相关性

注：r=-0.556，P<0.05

表4　食管鳞癌组织中caspase-3与caspase-8的相关性

注：r=0.718，P<0.05

3讨论

细胞凋亡是一种细胞程序性死亡过程，正常机体内一定的细胞凋亡有利于机体的新陈代谢，属于正常的生物学过程。正常机体内，细胞凋亡受凋亡基因和凋亡抑制基因的双向调控，维持动态平衡状态。肿瘤的发生同样是一种受多因素、多基因调控的多阶段的过程，这一过程受到癌基因和抑癌基因的双向调控，而且肿瘤的发生过程中一个重要的生物学行为就是细胞的异常增殖，而细胞凋亡受到抑制[5-6]。Survivin是凋亡抑制蛋白家族成员之一，具有抑制细胞凋亡和调控细胞周期的双重作用，正常机体仅表达于胚胎组织以及未分化或低分化的组织中，成年人机体内一般不表达或低表达。在细胞凋亡这一生物学过程中，survivin可以通过caspase依赖性和非依赖性途径发挥细胞凋亡的调控作用，是细胞凋亡的主要调控效应因子[1-2,7]。而caspase-3和caspase-8是2种参与细胞凋亡促进作用的核心蛋白[2-4]。Caspase-3是细胞凋亡的关键蛋白酶，是细胞凋亡过程的主要执行者，也是细胞凋亡蛋白酶发生级联反应的关键步骤，其受到抑制是导致细胞凋亡停止的主要因素，这也是肿瘤发生、发展过程中其表达降低的原因[8]。Caspase-8是细胞凋亡程序的启动因子，能够通过自身活化启动细胞凋亡的发生，并通过调节caspase-3的表达而达到导致细胞凋亡的目的，在肿瘤发生过程中，caspase-8通过甲基化、基因突变等降低其蛋白的表达，进而诱导肿瘤细胞逃脱细胞凋亡程序的监控[9-10]。

本文结果显示，食管鳞癌组织中survivin、caspase-3和caspase-8的阳性率分别为74.3%、37.1%、39.0%，癌旁正常食管黏膜组织中分别为4.0%、84.0%、80.0%，2组比较差异均有统计学意义，提示食管鳞癌组织中三者存在异常表达。本研究通过分析survivin、caspase-3和caspase-8与食管鳞癌临床病理参数的关系发现，食管鳞癌组织中survivin的表达与分化程度、临床分期、淋巴结转移有关，且随着分化程度的进展、临床分期的加深、淋巴结转移的发生而阳性率增加，提示survivin可能与食管鳞癌的疾病进展和浸润转移有关，能够促进其进展；食管鳞癌组织中caspase-3和caspase-8的表达均与临床分期、淋巴结转移有关，且两者的阳性率随临床分期的加深和淋巴结转移的发生而下降，提示caspase-3和caspase-8是食管鳞癌的疾病进展阻止因子。本研究还发现，食管鳞癌组织中survivin与caspase-3和caspase-8均呈负相关关系(r=-630、-556，P均<0.05)，而caspase-3和caspase-8呈正相关关系(r=0.718，P<0.05)，这提示三者在食管鳞癌的疾病进展的生物学进程中相互影响。

综上所述，survivin、caspase-3和caspase-8在食管鳞癌组织中均存在异常表达，survivin 可能通过抑制caspase-3、caspase-8表达而促进肿瘤的进展，三者联合检测可用于食管鳞癌的病情和预后评估。

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Expressions of Survivin, Caspase-3 and

Caspase-8 in the Esophageal Squamous-celled Carcinoma

Cao Jing, Ren Mei

(ZhengzhouRailwalVocationalandTechnicalCollege,Zhengzhou450052,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the expressions of survivin, caspase-3 and caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma and the clinical significance, and to analyze their correlations.MethodsImmunohistochemical S-P method was used to detect the expressions of survivin, caspase-3 and caspase-8 in the 105 cases of esophageal squamous-celled carcinoma and 50 cases of paraneoplastic normal tissues.ResultsThe positive rates of surviving, caspase-3 and caspase-8 were 74.3%(78/105), 37.1%(39/105) and 39.0%(41/105)in the esophageal squamous-celled carcinoma, and were (2/50)%, 84.0%(42/50) and 80.0%(40/50) in the paraneoplastic normal tissues (P<0.05).The expression of survivin in the esophageal squamous-celled carcinoma was related with cell differentiation, clinical stage and lymph node metastasis(P<0.05).The expressions of caspase-3 and caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma were related with clinical stage and lymph node metastasis (P<0.05).The expression of survivin was negatively related with caspase-3 in the esophageal squamous-celled carcinoma (r=-630，P<0.05).The expression of survivin was negatively related with caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma (r=-556，P<0.05).The expression of caspase-3 was positively related with caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma (r=0.718， P<0.05).ConclusionAbnormal expressions of Survivin、caspase-3 and caspase-8 are observed in the esophageal squamous-celled carcinoma, and the associated detection can be used to evaluate the pathogenetic condition and prognosis of esophageal squamous-celled carcinoma.

[Key words]esophageal squamous-celled carcinoma; survivin；caspase-3；caspase-8

收稿日期：(2015-02-18)

[中图分类号]R735.1;R730.23

[文献标识码]A

[文章编号]1673-5412(2015)06-0477-04

作者简介：曹婧(1981-)，硕士，讲师，主要从事食管癌的病理学研究。E-mail:caojing8098@126.com

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2015.06.005