槲树叶总黄酮片质量标准研究

赵森姜黎邹明

（大连大学附属中山医院配夜中心，大连　116001）



槲树叶总黄酮片质量标准研究

赵森姜黎邹明*

（大连大学附属中山医院配夜中心，大连116001）

摘要：目的制定槲树叶总黄酮片质量标准的研究。方法采用高效液相色谱法测定槲树叶总黄酮片中槲皮素含量，并采用其他方法对其硬度、崩解时间等进行考察，确定其初步质量标准。结果制定槲树叶总黄酮片的有关检查项目标准及含量测定方法、含量限度。结论本实验采用HPLC法，在现行的色谱条件下，测定槲树叶总黄酮片中槲皮素的含量，方法简单快速，结果准确可靠，重复性好，回收率满意，操作简单可行且能提高工作效率，对槲树叶总黄酮片质量评价具有重要意义，并对该制剂质量标准的进一步制定提供理论依据和科学参考。

关键词：槲树叶；总黄酮；槲皮素；HPLC

槲树叶，又名槲若，为壳斗科(Fagaceae)栎属(Quercus L．)植物槲树(Quercus dentata Thunb.)的干燥叶。味甘苦，平，无毒，归脾、胃、肺、大肠经。有止血、清热利尿之功效。本实验按照最佳提取、纯化工艺及成型工艺流程，制备3批次槲树叶总黄酮片。其批号分别设为201301、201302、201303。对其质量进行检查，初步确定其质量标准。

1　仪器与试药

CP225D型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；CQ-250超声波清洗器（上海超声仪器厂）；Agilent液相色谱仪；安捷伦色谱工作站；KQ3200超声波清洗器(江苏昆山)；槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号：848-9901)；槲树叶，自采于丹东东港，经鉴定为壳斗科植物槲树的叶；甲醇、乙腈为色谱试剂，水为双蒸水，其余试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1性状经对三批外观性状检查，检测结果见表1。

表1　外观性状检查结果

根据上述测定结果，确立本品为棕红色薄膜衣片，去除衣层后，片芯呈棕色或棕褐色，气微，味淡。

2.2重量差异检查取本品20片，精密称定各片的重量，每片重量与标示量0.2 g相比较，超出重量差异限度的药片不得多于2片，并不得有1片超出限度的一倍。按上法进行检查，测定结果见表2。

表2　装量差异检查结果

测定结果表明，本品重量差异符合片剂项下有关规定。

2.3崩解时限检查按2010版《中国药典》一部附录ⅫA片剂项下检测方法，对样品崩解时限进行检查，检查结果见表3。

表3　崩解时限检查表

测定结果表明，本品崩解时限检查结果符合片剂项下相关规定。

3　含量测定

3.1测定指标与测定方法的确立槲树叶总黄酮片为槲树叶经50%乙醇提取，经滤过，浓缩，纯化，干燥，拟以高效液相色谱法（紫外检测器最大吸收波长）测定槲树叶中槲皮素含量，在选定的色谱条件下，供试品溶液中槲皮素与相邻组分分离度良好，经方法学考察，方法的重复性、稳定性、精密度、回收率试验均符合有关规定，因此确立本药材含量指标为槲皮素，测定方法为高效液相色谱法。

3.2供试品溶液的制备取本品片剂，去除衣层，研碎，精密称取0.1 g，至具塞三角瓶中，精密加入甲醇25 ml，称重，超声30分钟，放凉，称重，用甲醇补足重量，然后用滤纸滤过，再用0.45 μm的滤膜滤过，精密吸取滤液2～25 ml容量瓶中，甲醇定容制刻度，混匀，即得供试品溶液。

3.3线性范围考察取槲皮素对照品溶液，分别精密吸取3、6、9、12、15 μl，其回归方程为：y=33.662x+ 19.526 (r=0.9997)，槲皮素在0.01668～0.08340 μg范围内线性关系良好。

3.4精密度试验精密吸取同一供试品溶液10 μl，连续进样5次，结果表明精密度良好。

3.5稳定性试验取供试品溶液，分别在0、2、4、6、8 h进样测定，结果各峰的峰面积和保留时间的RSD均小于3.0%(n=6)。表明稳定性良好。3.6重复性试验取同一样品5份，按照供试品溶液制备方法制备，分别进样测定，结果各峰的峰面积和保留时间RSD均小于3.0%(n=6)。表明重复性良好。

3.7加样回收率试验精密称取已知准确含量的本品（含量0.01616 mg/g）六份，每份0.5 g。分别置25 ml量瓶中，精密加入槲皮素对照品溶液（0.00556 mg/ml）12.5 ml，加甲醇稀释至刻度。在上述色谱条件下进样10 μl，实验结果显示，本方法槲皮素的回收率为97.9%，RSD%为1.46%。

3.8样品含量测定取样品按3.2项下制备成供试品溶液，精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10 μl，注入高效液相色谱仪中，样品中槲皮素的含量为0.126 mg/片。

4　结论与讨论

单因素考察煎煮、超声提取、回流提取等方法，发现样品粘稠很难滤过，不适宜煎煮和超声提取，甲醇回流提取充分，提取率高。通过预实验先后选用甲醇-水溶液、乙腈-水溶液等为流动相，结果以前者为流动相，比例为55∶45时槲皮素的峰型最好，与其相邻组分分离度都可达到要求。比较了365 nm和280 nm的检测波长，结果发现槲皮素在365 nm处吸收较好。并且与其他成分有较好的分离，其他成分对槲皮素的干扰较少，故选择365 nm处作为吸收波长。本品性状为棕红色薄膜衣片，去除衣层后，片芯呈棕色或棕褐色，气微，味淡。片重0.2 g，重量差异、崩解时限符合片剂项下相关规定。含量测定在现行的色谱条件下，测定槲树叶总黄酮片中槲皮素的含量，方法简单快速，结果准确可。对槲树叶总黄酮片质量评价具有重要意义，并对该制剂质量标准的进一步制定提供理论依据和科学参考。

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Study on the Quality Standard of Oak Leaf Flavonoids

ZHAO Sen, JIANG Li, ZOU Ming
(The Affiliated Zhongshan Hospital of Dalian University, Liaoning Province, Dalian 116001, China)

Abstract：Objective To develope the quality standard of oak leaf flavonoids. Methods Using high performance liquid chromatography oak leaf content of total flavonoids quercetin film, and other methods of hardness, disintegration time were investigated to determine its initial quality standards. Results The inspection program standards, determination methods and content limits of oak leaf flavonoids were developed. Conclusion The HPLC method was used in the present chromatographic conditions, the determination of oak leaves flavonoids quercetin in the film, which is easy, quick, accurate and reproducible, and had satisfactory recovery. The operation is simple and feasible, and can improve the efficiency. It is of great significance to the evaluation of the quality of total oak leaf flavonoids, and the preparations for further development of quality standards to provide the theoretical basis and scientific reference.

Keywords:oak leaves; total flavonoids; quercetin; HPLC

收稿日期：（本文编辑：张文娟本文校对：邹明2016-01-22）

*通讯作者：zsyyyjk@sina.com

doi:10.3969/j.issn.1672-2779.2016.08.067

文章编号：1672-2779（2016）-08-0143-02