火炭母乙醇提取物的抗氧化活性及其稳定性研究

王呈文，余文森

(1.汕头职业技术学院自然科学系，广东汕头 515078；2.华港集装箱分公司，广东汕头 515078)

火炭母乙醇提取物的抗氧化活性及其稳定性研究

王呈文1，余文森2

(1.汕头职业技术学院自然科学系，广东汕头 515078；2.华港集装箱分公司，广东汕头 515078)

摘要[目的]研究火炭母95%乙醇提取物的抗氧化活性及其稳定性。[方法]采用室温浸提法对火炭母中有效成分进行提取，考察其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)、羟基自由基(OH·)、总抗氧化能力(ABTS法)、超氧阴离子(O2-·)的清除作用，并与VC进行比较，以评价其抗氧化活性以及pH和温度对提取物稳定性的影响。 [结果]火炭母95%乙醇提取物对DPPH·的清除率可达92.5%。提取物对DPPH·、OH·、ABTS+·、O2-·的半数抑制浓度(IC50)分别为32.8、90.8、110.8、277.1 μg/mL，清除能力均比VC强，且提取物还具有较好的耐热性和耐弱酸弱碱性。[结论]火炭母95%乙醇提取物具有较强的抗氧化活性及良好的稳定性。

关键词火炭母；抗氧化；稳定性；乙醇提取物

火炭母是蓼科蓼属植物火炭母(Polygonum ChinenseLinn.)全草，别名翅地利、火炭星、火炭藤、白饭藤等，广泛分布于我国南方地区。火炭母是常用的中草药之一，也广泛应用在药膳中[1-2]。由于火炭母应用的广泛性，越来越多国内外学者对火炭母的化学成分和药理作用进行研究[3-6]。火炭母的主要化学成分之一是黄酮类，这类化合物具有很好的抗氧化性[3-6]。为了增加人们对火炭母的认识，开发其潜在的医疗保健功能，进一步更有效地利用火炭母，该研究采用室温浸提法对火炭母中有效成分进行提取，考察其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)、羟基自由基(OH·)、总抗氧化能力(ABTS法)、超氧阴离子(O2-·)的清除作用，并与VC进行比较，评价火炭母乙醇提取物的抗氧化活性以及pH和温度对提取物抗氧化稳定性的影响。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1仪器。BSA224S-CW型电子天平(北京赛多利斯有限公司)；TU-1901型双光束紫外可见分光光度计(普析通用仪器)；旋转蒸发仪(N-1100型，东京理化器械株式会社)。

1.1.2试剂与药品。DPPH(美国Sigma-Aldrich公司)；总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS法)(碧云天生物技术)；试验中所需的化学试剂均为分析纯。

1.1.3样品。火炭母全草购买于广东省汕头市药材市场。晾晒，备用。

1.2方法

1.2.1抗氧化性测定。

1.2.1.1 抗氧化物质的提取。称取火炭母粉末100.0g，用95%乙醇室温下浸泡7d，在60 ℃减压浓缩至棕色浸膏，减压真空干燥，用无水乙醇溶解1.00g提取物，配制成100mg/mL溶液，待用。

1.2.1.2DPPH·清除率测定。参照文献[7-8]的方法，分别配制浓度为20、40、60、80、100、150、200μg/mL火炭母乙醇提取液，在518nm的最大吸收波长处测定其吸光度，考察其对DPPH·的清除作用。

1.2.1.3OH·清除率测定。参照文献[9-10]的方法，分别配制浓度为20、40、60、80、100、150、200μg/mL火炭母乙醇提取液，在538nm的吸收波长处测定其吸光度，考察其对OH·清除作用。

1.2.1.4ABTS+·测定。参照文献[11-12]的方法以及产品说明书，分别配制浓度为20、40、60、80、100、150、200μg/mL火炭母乙醇提取液，在734nm的吸收波长处测定其吸光度，考察其对ABTS+·清除作用。

1.2.1.5O2-·清除率测定。参照文献[13-14]的方法，配制浓度为20、40、60、80、100、150、200、300μg/mL火炭母乙醇提取液，在320nm的特征吸收波长处，每隔30s(3min内)测定一次，计算得出O2-·的清除率。

1.2.2抗氧化稳定性测定。

1.2.2.1pH对火炭母乙醇提取物的抗氧化稳定性影响。分别取浓度为40μg/mL的火炭母乙醇提取液，用稀NaOH溶液和稀HCl溶液将提取液的pH分别调节为2.0、4.0、6.0、8.0、10.0，室温下静置4h，用“1.2.1.2”的方法对其进行测定[15-16]，以考察pH对火炭母乙醇提取物的抗氧化稳定性影响。1.2.2.2温度对火炭母乙醇提取物的抗氧化稳定性影响。分别取浓度为40μg/mL的火炭母乙醇提取液，分别放置在温度为-15、0、20、35、50、80 ℃的恒温条件下静置4h，用“1.2.1.2”的方法对其进行测定[15-16]，以考察温度对火炭母乙醇提取物的抗氧化稳定性影响。

2结果与分析

2.1抗氧化活性

2.1.1火炭母乙醇提取物对DPPH·的清除能力。由表1可知，火炭母乙醇提取物对清除DPPH·有一定的量效关系，其IC50=32.8μg/mL，同时用VC作为阳性对比，VC的IC50=108.4μg/mL，可见火炭母乙醇提取物对DPPH·有较好的清除作用，其清除率达92.5%。

2.1.2火炭母乙醇提取物对OH·的清除能力。由表1可知，火炭母乙醇提取物对清除OH·有一定的量效关系，其IC50=90.8μg/mL，同时用VC作为阳性对比，VC的IC50=189.1μg/mL，可见火炭母乙醇提取物对OH·有较好的清除作用。

表1火炭母乙醇提取物清除DPPH·、OH·、ABTS+·、O2-·的能力

Table1ScavengingactivitiesofethanolextractsfromP. chinensetoDPPH·,OH·,ABTS+·andO2-·

%

2.1.3火炭母乙醇提取物对ABTS+·的清除能力。由表1见可知，火炭母乙醇提取物对清除ABTS+·有一定的量效关系，其IC50=110.8μg/mL，同时用VC作为阳性对比，VC的IC50=183.9μg/mL，可见火炭母乙醇提取物对ABTS+·有较好的清除作用。

2.1.4火炭母乙醇提取物对O2-·的清除能力。从表1可看出，火炭母乙醇提取物对清除O2-·有一定的量效关系，其IC50=277.1μg/mL，同时用VC作为阳性对比，VC的IC50=273.2μg/mL，可见火炭母乙醇提取物对O2-·有一定的清除作用。

2.2抗氧化稳定性

2.2.1pH对火炭母乙醇提取物抗氧化稳定性的影响。由表2可知，火炭母乙醇提取物在弱酸弱碱性条件下活性保持率较高。

2.2.2温度对火炭母乙醇提取物抗氧化稳定性的影响。由表3可知，当温度为-15～80 ℃时，火炭母乙醇提取物在不同的温度条件下活性保持率较高，抗氧化活性成分较稳定。当体系温度上升至80 ℃时，提取物清除DPPH·的能力下降，活性保持率为88.95%，由此可知，火炭母乙醇提取物有较好的耐热性。

表2pH对火炭母乙醇提取物清除DPPH·自由基的影响

Table2EffectsofpHonscavengingrateofethanolextractsfromP. chinensetoDPPH·

pH清除率Scavengingrate∥%活性保持率Activityretentionrate∥%2.042.872.794.049.283.676.056.796.437.4(原液Stocksolution)58.8100.008.057.197.1110.053.390.65

表3温度对火炭母乙醇提取物清除DPPH·自由基的影响

Table3EffectsoftemperatureonscavengingrateofethanolextractsfromP. chinensetoDPPH·

温度Temperature℃清除率Scavengingrate∥%活性保持率Activityretentionrate∥%-1558.499.32058.399.152058.499.3225(原液Stocksolution)58.8100.003558.399.155058.098.648052.388.95

3结论

该研究采用室温浸提法对火炭母中有效成分进行提取，考察其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)、羟基自由基(OH·)、总抗氧化能力(ABTS法)、超氧阴离子(O2-·)的清除作用，并与VC进行比较，评价火炭母乙醇提取物的抗氧化活性以及pH和温度对提取物抗氧化稳定性的影响。结果表明，火炭母乙醇提取物在200μg/mL时对DPPH·的清除率可达92.50%，提取物对DPPH·、OH·、ABTS+·、O2-·的半数抑制浓度(IC50)分别为32.8、90.8、110.8、277.1μg/mL，清除能力均比VC强，说明火炭母乙醇提取物有较强的抗氧化活性；且火炭母乙醇提取物在pH为4～10和温度在-15～80 ℃时，活性保持率在80%以上，表明火炭母乙醇提取物具有较好的热稳定性和耐弱酸弱碱性。

参考文献

[1] 蔡家驹,曾聪彦,梅全喜.火炭母化学成分与药理作用研究进展[J].亚太传统医药,2014,10(24):32-34.

[2] 蔡家驹,曾聪彦,梅全喜.火炭母复方制剂的研究进展[J].今日药学,2014,24(8):615-617.

[3] 黄国霞,刘柳,汪青,等.火炭母有效成分的提取及抗氧化活性研究[J].湖北农业科学,2011,50(12):2490-2492.

[4] 董艳辉.火炭母总黄酮的提取和抗氧化活性研究[J].食品工业科技,2015,36(14):299-302，307.

[5] 张宏武,王悦,都晓伟,等.粗毛火炭母化学成分的研究[J].中国药学杂志,2015,50(12):1012-1016.

[6] 严慧如,黄丹丹,何静娜,等.正交设计法优选火炭母中总黄酮的提取工艺[J].广东化工,2015,42(11):65-66.

[7] 王呈文,纪明慧,舒火明,等.牛大力总黄酮提取工艺及不同萃取物的抗氧化活性研究[J].化学研究与应用,2013,25(5):713-717.

[8] 张根生,侯静,张铭东,等.松仁红衣多酚的提取及体外抗氧化活性研究[J].食品工业科技,2014,35(23):252-256.

[9] 王吉鸿,纪明慧,舒火明,等.沙煲暗罗根乙醇提取物的抗氧化活性和抗菌活性研究[J].中成药,2012,34(4):617-620.

[10] 刘小丽,张 伟,符毅文.虎杖中白藜芦醇的超声提取及其抗氧化性研究[J].中成药,2011,33(1):150-153.

[11] 章丹丹 ,高月红 ,JESSICA TAO LI,等.桑枝总黄酮的抗氧化活性研究[J].中成药,2011,33(6):943-946.

[12] 邱金东,汤昆.DPPH和ABTS法测定核桃仁的体外抗氧化活性[J].中成药,2008,30(8):1215-1216.

[13] 欧阳昌汉,张瑞雪,叶涛,等.葛花总黄酮的含量测定及体外抗氧化作用研究[J].食品研究与开发,2012,33(11):57-60.

[14] 张淑娟,徐怀德,米林峰.光皮木瓜汁体外抗氧化活性研究[J].食品科学,2011,32(21):56-61.

[15] 葛芹,马晓军.食用玫瑰花色苷的提取及其稳定性研究[J].食品工业科技,2012,33(14):146-152.

[16] 刘邻渭,袁琳,孙丽芳，等.8种叶片叶绿素提取得率、稳定性和应用效果的对比[J].食品工业科技,2012,33(1):245-249.

AntioxidantActivityandStabilityofEthanolExtractsfromPolygonum chinenseLinn.

WANGCheng-wen,YUWen-sen2

(DepartmentofNaturalSciences,ShantouPolytechnic,Shantou,Guangdong515078; 2.HuagangContainerBranchCompany,Shantou,Guangdong515078)

Abstract[Objective] To research the antioxidant activity and stability of 95% ethanol extracts from Polygonum chinense Linn. [Method] The effective components were extracted from P. chinense at room temperature by extraction method. Its scavenging effects on DPPH·,OH·,ABTS method and O2-· were researched. Vc was compared in order to evaluate the antioxidant activity. Effects of pH and temperature on the extracts stability were studied. [Result] Scavenging rate of 95% ethanol extracts to DPPH· reached 92.5%. The IC50of extracts to DPPH·,OH·,ABTS+· and O2-· were 32.8,90.8,110.8 and 277.1 μg/mL,respectively. Their scavenging abilities were all stronger than VC; and extracts had relatively better heat resistance,weak acid and alkali resistance. [Conclusion] 95% ethanol extracts from P. chinense have relatively strong antioxidant activity and good stability.

Key wordsPolygonum chinense Linn.; Antioxidant; Stability; Ethanol extracts

基金项目汕头职业技术学院科研课题(SZK2014Y22)。

作者简介王呈文(1984- )，女，福建福州人，助理实验师，硕士，从事天然产物化学研究。

收稿日期2016-04-04

中图分类号S 567

文献标识码A

文章编号0517-6611(2016)12-139-02