急诊PCI术后无复流STEMI患者红细胞渗透脆性的变化

郇雷，刘红岩，亓华新，王方明

·论著·

急诊PCI术后无复流STEMI患者红细胞渗透脆性的变化

郇雷1，刘红岩1，亓华新1，王方明1

目的 探讨急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者红细胞渗透脆性的变化与行急诊冠状动脉介入治疗（PCI）术后无复流的关系。方法 选取莱芜市人民医院心血管内科2012年6月～2014年12月急诊PCI治疗的STEMI患者87例，男性55例，女性32例。37例患者PCI术后出现冠状动脉无复流现象（无复流组）、50例患者PCI术后未出现无复流现象（复流组）。所有患者抽取手术前空腹肘静脉血作为检测样品。检测总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）；红细胞渗透脆性最小抵抗值（开始溶血时的氯化钠质量分数，OFmix）、红细胞渗透脆性最大抵抗值（完全溶血时的氯化钠质量分数，OFmax），溶血率分别取：0.45/0.15（第6管/第11管）、0.45/0（第6管/第12管）的比值；红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、丙二醛（MDA）、过氧化物歧化酶（SOD）水平。结果 无复流组的OFmix、OFmax、MCV值显著高于复流组，溶血率（0.45/0.15）、溶血率（0.45/0）也显著高于复流组，差异有统计学意义（P均＜0.01）。无复流组的MDA值显著高于复流组，而红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、SOD水平显著低于复流组，差异有统计学意义（P均＜0.01）。结论 STEMI急诊PCI术后无复流患者较复流患者红细胞渗透脆性显著降低，这可能是导致PCI术后灌注不足的原因之一，而红细胞渗透脆性降低可能与红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、SOD水平降低及MDA水平升高有关。

急性ST段抬高型心肌梗死；红细胞渗透脆性；急诊冠状动脉介入手术；无复流

冠状动脉硬化性心脏病是临床常见的心血管疾病，在外界诱因的刺激下可发生急性冠脉综合征（ACS），其中急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）是严重的ACS类型，如不及时治疗可导致患者死亡。近年来随着介入治疗技术的发展，急诊经皮冠状动脉脉介入治疗（PCI）是STEMI的首选治疗方法，可迅速开通梗死的血管、挽救濒死的心肌细胞、预防恶性心律失常，在挽救冠心病患者的生命方面发挥着重要的作用［1］。

1　资料与方法

1.1研究对象和分组 选取莱芜市人民医院心血管内科2012年6月～2014年12月急诊PCI治疗的STEMI患者87例，男性55例，女性32例。37例患者PCI术后出现冠状动脉无复流现象（无复流组）、50例患者PCI术后未出现无复流现象（复流组）。纳入标准：①STEMI的诊断符合美国心脏病协会/美国心脏病学会（ACC/AHC）的诊断标准；②患者主要表现为：持续胸痛时间超过30 min，心电图相邻ST段抬高超过0.2 mV，血清肌钙蛋白和肌酸激酶同工酶（CK-MB）超过正常峰值2倍以上；③患者起病至入院时间在12 h内，在本院实施急诊PCI手术。排除标准：①近期使用抗凝药物；②活动性出血、消化性溃疡及贫血；③严重的电解质紊乱；④合并自身免疫性疾病、感染、肿瘤、心力衰竭等疾病。

1.2方法

1.2.1研究指标 所有患者抽取手术前空腹肘静脉血作为检测样品。①血液样本放入离心机中以4000 转/min离心5 min，取上层血清采用美国贝克曼库尔特公司全自动生化分析仪检测总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）。②红细胞渗透脆性采用浓度梯度法检测，分别制备12管不同浓度的NaCl溶液，每管加入20μl血液样本，静置2 h后采用微量分光光度计测定吸光度，测量指标包括：红细胞渗透脆性最小抵抗值（开始溶血时的氯化钠质量分数，OFmix）、红细胞渗透脆性最大抵抗值（完全溶血时的氯化钠质量分数，OFmax），溶血率分别取：0.45/0.15（第6管/第11管）、0.45/0（第6管/第12管）的比值进行分析。③红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性，取含80 μg红细胞膜蛋白悬液加入500 μl反应体系中。37℃保温l h，加入TCA终止反应，冰浴、离心后取上清液，加入定磷试剂，于640 nm处测定A值，代表总ATP酶活性。另测同样反应体系中加入0.1 mmol/L哇巴因的A值，代表对哇巴因不敏感的ATP酶活性。两值之差为Na+-K+-ATP酶活性。丙二醛（MDA）、过氧化物歧化酶（SOD）采用酶联免疫吸附法测定，将血液样本以4000 转/min离心5 min后取上层血清，按照MDA、SOD检测试剂盒操作，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。应用血液分析仪测定的RBC和HCT值应用公式平均红细胞体积（fL）=HCT/RBC×100，导出MCV值。

1.3统计学方法 数据分析使用SAS 9.3软件包处理，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，两组间均数的比较采用t检验，计数资料采用例数（构成比）表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组患者一般资料比较 两组患者血脂水平、体质指数比较，差异无统计学意义（P均＞0.05）。与复流组比较，无复流组冠状动脉三支病变比例增加，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

2.2两组患者的红细胞渗透脆性指标比较 无复流组的OFmix、OFmax、MCV值显著高于复流组，溶血率（0.45/0.15）、溶血率（0.45/0）也显著高于复流组，差异有显著统计学意义（P均＜0.01）（表2）。

2.3两组患者的红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、MDA、SOD比较 无复流组的MDA值显著高于复流组患者，而红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、SOD水平显著低于复流组，差异有显著统计学意义（P均＜0.01）（表3）。

3　讨论

表1　两组患者一般资料比较

表2　两组患者的红细胞渗透脆性指标比较

表3　两组患者的红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、MDA、SOD比较

冠心病患者一旦发生ACS，可在短时间内发生心肌急性缺血缺氧，引起心绞痛症状，严重者还可发生心肌梗死，甚至引起患者死亡［3］。STEMI是严重的ACS类型，患者缺血性胸痛持续30 min以上，经休息或舌下含服硝酸甘油不能缓解，如未及时处理，患者预后往往不良［4］。PCI术是近年来治疗ACS的首选治疗方案，通过介入方法开通血管，使缺血的心肌得到再灌注，具有起效迅速、疗效确切等优点，在挽救患者生命、改善预后方面发挥着重要的作用［5］。近年来，不断有研究报道PCI术后无复流现象的发生使STEMI患者得不到有效的心肌再灌注，对患者的预后不利［6］。

引起PCI术后无复流现象的原因比较复杂，有研究认为，在STEMI患者冠状动脉闭塞长时间得不到恢复时，冠状动脉微血管结构受到破坏，心外膜血流动力学状态改变，收缩期血流峰值降低，微血管栓塞、血管内皮受损、中性粒细胞浸润、氧自由基、凝血瀑布级联反应等机制共同参与了PCI术后无复流现象的发生［7］。

红细胞的渗透脆性是其重要的生理特性，红细胞渗透脆性与其在低渗溶液中的抵抗能力成反比［8］。有研究发现，红细胞渗透脆性除了与红细胞膜的流动性有关之外，还与细胞膜骨架性质相关。红细胞渗透脆性降低，提示红细胞膜流动性降低、变形能力变差，使红细胞通过微小血管的能力下降，进而导致组织灌注不足［9］。因此研究PCI术患者红细胞的渗透脆性对评估和预测PCI术后无复流现象的发生风险具有重要的现实意义。本研究中无复流组的OFmix、OFmax、MCV值显著高于复流组，这一结果提示，STEMI患者PCI术后无复流红细胞渗透脆性较复流患者显著降低，红细胞膜流动性降低、红细胞变形能力变差，这可能是导致PCI后灌注不足、无复流的原因之一。

红细胞膜Na+-K+-ATP酶是一种镶嵌于细胞膜脂质双分子层中的蛋自质，参与细胞内外Na+、K+的主动转运，以维持细胞内外渗透压平衡和跨膜电化学梯度，使细胞发挥正常的生理作用。一旦红细胞膜Na+-K+-ATP酶的活性降低，可导致细胞内Na+浓度升高，红细胞渗透脆性降低，变形性变差，进而导致组织灌注不足［10］。本研究中无复流组的红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性显著低于复流组患者，充分印证了上述观点。

MDA是脂质过氧化产物，可作为反映组织氧化水平的指标［11］。SOD是一种抗氧化酶，是超氧阴离子自由基的特异性清除剂。当机体MDA水平升高、SOD活性下降提示机体对自由基的清除能力下降，机体处于脂质过氧化损害之中。氧自由基大量聚集，攻击细胞膜的不饱和脂肪酸，破坏细胞膜结构，进而使细胞膜Na+-K+-ATP酶活性下降、细胞膜通透性改变［12］。本研究中无复流组患者MDA值大于复流组患者、SOD水平显著低于复流组患者。这一结果提示，无复流组患者脂质过氧化损伤更加严重，而脂质过氧化损伤是导致PCI术后无复流的又一原因。

本研究还发现，无复流组的冠状动脉三支病变比例多于复流组患者，这一结果提示，冠状动脉病变程度越严重，PCI术后无复流的风险越大。PCI术后无复流STEMI患者红细胞渗透脆性较复流患者显著降低，这可能是导致PCI术后灌注不足的原因之一，红细胞渗透脆性降低可能与红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、SOD水平降低及MDA水平升高有关。

［1］ 高扬，吕滨，侯志辉，等. 冠心病合并代谢综合征患者冠状动脉粥样硬化的特性［J］. 中华心血管病杂志，2013，41（11）：935-9.

［2］ 周华，何晓燕，庄少伟，等. 急诊经皮冠状动脉介入后无复流的临床及程序危险因素分析［J］.中华急诊医学杂志，2013，22（3）：280-6.

［3］ 郭晋，王方莉，伍德生，等. cTnI、BNP及心肌酶谱联合检测在急性冠脉综合症诊治中的临床意义［J］. 中华全科医学，2013，11（9）：1370-2. ［4］ 史云桃，蒋廷波. 急性ST段抬高心肌梗死患者合并心力衰竭的危险因素分析［J］. 中华老年心脑血管病杂志，2014，16（2）：151-4.

［5］ 孙同文，徐青艳，姚海木，等. 代谢综合征对急性冠脉综合征PCI术预后的影响［J］. 中华急诊医学杂志，2012，21（10）：1147-52.

［6］ 王锦纹，陈韵岱，王长华，等. β受体阻滞剂服用史与急性心肌梗死直接经皮冠状动脉介入治疗后无复流的相关性［J］. 中华心血管病杂志，2014，42（10）：822-6.

［7］ 林杰，朱莉，殷屹岗，等. 冠状动脉注射替罗非班预防急诊经皮冠状动脉介入治疗术中无复流的临床疗效［J］. 中华老年医学杂志，2012，31（10）：857-9.

［8］ NS Minka，J O Ayo. Ameliorating effect of melatonin on colonic temperature and erythrocyte osmotic fragility of Japanese quails （Coturnix coturnix japonica） transported by road［J］. Archiv fur Geflugel kunde，2013，77（2）：137-43.

［9］ Kobo P I，Ayo J O，Aluwong T，et al. Flavonoid mixture ameliorates increase in erythrocyte osmotic fragility and malondialdehyde concentration induced by Trypanosoma brucei brucei-infection in Wistar rats［J］. Research in Veterinary Science，2014，96（1）：139-42.

［10］赵琦峰，杜杰，邵兰，等. 脂氧素A4对缺血再灌注大鼠心肌组织Na+-K+-ATP酶的影响及意义［J］. 中华小儿外科杂志，2013，34（11）：848-53.

［11］ 何玉林，周伟娜，王相成，等. 心脏交感神经显像剂11C-N-CH3-Dopamine的合成及生物分布［J］. 中华核医学与分子影像杂志，2015，35（3）：204-7.

［12］ 段利，汤艳，陈承志，等. 苯并芘对大鼠海马组织氧化应激及ATP酶的影响［J］. 中华劳动卫生职业病杂志，2013，31（7）：500-3.

本文编辑：姚雪莉

Changes of erythrocyte osmotic fragility in patients with acute ST-segment elevation myocardial infarction and postoperative no-reflow after emergency percutaneous coronary intervention

XUN Lei*， LIU Hong-yan， QI Hua-xin， WANG Fang-ming. *Department of Cardiology， People's Hospital of Laiwu City， Laiwu 271100， China.

LIU Hong-yan， E-mail： 2101749095@qq.com

Objective To investigate the relationship between the changes of erythrocyte osmotic fragility and postoperative no-reflow after emergency percutaneous coronary intervention （PCI） in patients with acute ST-segment elevation myocardial infarction （STEMI）. Methods STEMI patients （n=87， male 55 and female 32） were chosen from Jun. 2012 to Dec. 2014， and divided into no-reflow group （n=37） and reflow group （n=50）. The fast vein blood was collected as detective samples from all patients before emergency PCI. The levels of total cholesterol （TC），triglyceride （TG）， high-density lipoprotein-cholesterol （HDL-C）， low-density lipoprotein-cholesterol （LDL-C），minimum of erythrocyte osmotic fragility （OFmix） and maximum of erythrocyte osmotic fragility （OFmax）， hemolysis ratio ［0.45/0.15 （6th tube/11th tube）， 0.45/0 （6th tube/12th tube）］， activity of Na+-K+-ATP， malondialdehyde （MDA） and superoxide dismutase （SOD） were detected. Results OFmix and OFmax were significantly higher， and hemolysis ratio （0.45/0.15） and hemolysis ratio （0.45/0） were also significantly higher in no-reflow group than those in reflow group （all P＜0.01）. The level of MDA was significantly higher， and activity of Na+-K+-ATP and SOD were significantly lower in no-reflow group than those in reflow group （all P＜0.01）. Conclusion The erythrocyte osmotic fragility decreases significantly in STEMI patients with postoperative no-reflow after emergency PCI， which maybe one of post-PCI hypoperfusion causes. The decrease of erythrocyte osmotic fragility may be related to the decreases of activity of Na+-K+-ATP and SOD and increase of MDA level.

Acute ST-segment elevation myocardial infarction； Erythrocyte osmotic fragility； Emergency percutaneous coronary intervention； No-reflow

R541.4

A

1674-4055（2016）06-0712-03

1271100 莱芜，莱芜市人民医院心内科

刘红岩，E-mail：2101749095@qq.com

10.3969/j.issn.1674-4055.2016.06.20

在介入治疗过程中，无复流的发生严重影响治疗效果和患者预后，部分患者在PCI术后冠状动脉闭塞减轻或解除，但缺血的心肌组织并未恢复有效的再灌注，微循环血流未完全恢复正常。有研究发现［2］，无复流现象的发生原因复杂，与血栓形成、斑块脱落、血管内皮细胞损伤、心肌间质水肿、血小板激活、炎症反应等诸多因素有关。本研究探讨了STEMI患者红细胞渗透脆性的变化与PCI术后无复流的关系，现将结果报道如下。