金水丸薄层色谱鉴别研究

陈金素　李忠琼　杨江媛



金水丸薄层色谱鉴别研究

陈金素1李忠琼2杨江媛1

1.云南省中医医院，云南昆明650021；2.云南省食品药品检验所，云南昆明650011

目的：建立金水丸的薄层色谱鉴别方法。方法：对金水丸制剂中的药味进行TLC鉴别方法研究，并进行方法学考察。结果：建立了金水丸中紫丹参、黄芩、枳壳、麦冬的薄层色谱鉴别方法。结论：所建立的方法简便易行，专属性强，重复性好，可用于金水丸制剂的质量控制。

金水丸；薄层色谱；鉴别

金水丸为云南省中医医院制剂室制备的院内中药制剂，是由麦冬、地黄、山药、茯苓、牡丹皮、紫菀、麻黄、枳壳、黄芩、紫丹参等十八味药材制成的浓缩水丸，具有滋阴润燥、止咳平喘的功效，临床用于阴虚肺燥之咳喘等症。现行质量标准仅对方中的牡丹皮、麻黄进行薄层色谱鉴别及丸剂的通则检查，为进一步提高其质量标准、更有效地控制其质量，进行了有关药味的薄层色谱鉴别研究，建立了金水丸中紫丹参、黄芩、枳壳、麦冬的薄层色谱鉴别方法，方法专属性强、重复性好。

1　仪器与材料

1.1仪器FUNGILAB超声仪；BINDER烘箱；sartorius BS224S天平；CAMAG REPROSTAR 3紫外光灯仪。

1.2材料硅胶G薄层板(批号：20152046，青岛康业鑫药用硅胶干燥剂有限公司；批号：20131118，青岛海洋化工厂分厂；批号：20151118，烟台维启化工产品有限公司)；丹参酮IIA对照品(批号：110766-201520)、黄芩苷对照品(批号：110715-201318)、柚皮苷对照品(批号：110722-201312)、麦冬对照药材(批号：121013-201310)均购自中国食品药品检定研究院；金水丸样品(批号：20150319、20150630、20151029，云南省中医医院制剂室)；所用试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1紫丹参的鉴别取本品研细，过三号筛，称取10g，加乙醚50mL，超声处理10min，滤过，滤液挥干(药渣备用)，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另按处方取除去紫丹参的其余药味模拟本品制备工艺，同法制成阴性供试品溶液。再取丹参酮IIA对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点(见图1)。

2.2黄芩的鉴别取“2.1”项下乙醚提取后的备用药渣，挥干乙醚，加甲醇50mL，超声处理60min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL溶解，用稀盐酸调节pH至2～3，用乙酸乙酯30mL振摇提取，取乙酸乙酯部分蒸干(水层备用)，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另按处方取除去黄芩的其余药味模拟本品制备工艺，同法制成阴性供试品溶液。再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深绿色斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点(见图2)。

图1　紫丹参鉴别TLC图

图2　黄芩鉴别TLC图

2.3枳壳的鉴别取“2.2”项下的供试品溶液。另按处方取除去枳壳的其余药味模拟本品制备工艺，同法制成阴性供试品溶液。再取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各2～4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶6∶2)的下层溶液为展开剂，展开9 cm，取出晾干后，再展开一次，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，105℃加热约5min，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点(见图3)。

图3　枳壳鉴别TLC图

2.4麦冬的鉴别取“2.2”项下乙酸乙酯提取后的备用水层，用氨试液调节pH至中性，再用水饱和正丁醇30mL振摇提取，取正丁醇部分蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另按处方取除去麦冬的其余药味模拟本品制备工艺，同法制成阴性供试品溶液。再取麦冬对照药材粉末1g，加甲醇30mL，超声处理60min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和正丁醇30mL振摇提取，取正丁醇部分蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各2～4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热约2min至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同的浅红色主斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点(见图4)。

图4　麦冬鉴别TLC图

3　讨论

处方中的紫丹参为云南省地方习用中药材，收载于2005年版《云南省中药材标准》第一册，其薄层色谱鉴别以丹参酮IIA为对照，展开剂为苯-乙酸乙酯(19∶1)[1]，研究中比较了甲苯-乙酸乙酯(19∶1)[2]及石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(9∶1)，采用本文规定的展开剂能获得良好分离，易于结果判断，并避免了使用有毒试剂，利于检验者健康及环保。

《中国药典》2015年版收载的黄芩及含黄芩成方制剂的薄层色谱鉴别多采用聚酰胺薄膜、硅胶G薄层板，展开剂为醋酸、甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10∶3∶1∶2)、乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)等[2]，经试验比较，使用本文规定的色谱条件能有效鉴别金水丸中的黄芩。

枳壳的鉴别采用《中国药典》2015年版枳壳项下薄层色谱条件试验时，柚皮苷Rf值较小且分离不佳，经试验通过二次展开可获得有效分离。

麦冬的鉴别采用《中国药典》2015年版麦冬项下方法试验时，金水丸样品色谱中斑点较多分离不佳。根据麦冬所含化学成分[3]，采用本文规定的方法并比较了展开剂①三氯甲烷-甲醇-水(13∶6∶2)的下层溶液、②三氯甲烷-甲醇(10∶4)、③三氯甲烷-甲醇(10∶1.5)，结果用①时斑点分离不佳、阴性干扰大，用②时目标斑点Rf值过大，采用③展开剂斑点分离良好且Rf值适中。

研究建立的4项薄层色谱鉴别，考察不同厂家的硅胶G预制板并经不同实验者试验均可获得良好重现性。同时也比较了不同温湿度条件下的展开效果，各目标斑点的Rf值在不同条件下略有差异，但斑点能分离清晰，易于结果判断。其中紫丹参鉴别的供试品溶液制备简便，而黄芩、枳壳、麦冬鉴别中的供试品溶液制备方法均经过优化实验建立。

[1]云南省食品药品监督管理局.云南省中药材标准(第一册)[S].昆明：云南美术出版社,2005：45.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015：301，577，735,1214.

[3]陈屏，徐东铭，雷军.麦冬化学成分及药理作用的研究现状[J].长春中医学院学报,2004,20(1)：35.

Study on TLC Identification of Jinshuiwan

CHEN Jinsu1LI Zhongqiong2YANG Jiangyuan1

1.Yunnan Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine,Kunming 650021,China；2.Yunnan Institute for food and drug control,Kunming 650011,China

Objective To establish the TLC identification method of Jinshuiwan.Method Create effective TLC identification method by studing of herbal medicines in prescription of jinshuiwan. Result The TLC identification method of Salviae yunnanensis Radix, Scutellariae Radix, Aurantii Fructus, Ophiopogonis Radix in Jinshuiwan preparation have been established. Conclusion The method is simple, specific, reproducible and can be applied to quality control of Jinshuiwan.

Jinshuiwan;TLC; Identification

陈金素(1968- )，女，学士，副主任药师，主要从事中药质量控制。 E-mail：1248771045@qq.com

R284.1

A

1007-8517(2016)14-0016-03

2016.05.11)