维药蜀葵花黄酮类成分的分离与结构鉴定*

张 祎，晁利平，陈 秋，董勇喆，李晓霞，王 涛

（天津市中药化学与分析重点实验室，天津 300193）

·中药研究·

维药蜀葵花黄酮类成分的分离与结构鉴定*

张 祎，晁利平，陈 秋，董勇喆，李晓霞，王 涛

（天津市中药化学与分析重点实验室，天津 300193）

［目的］对维药蜀葵花［Althae a rosea（Linn.）Cavan.］中的黄酮类成分进行研究。［方法］采用正相硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱及高效液相色谱手段进行分离纯化，并通过理化性质与波谱分析方法鉴定化合物的结构。［结果］从蜀葵花体积分数为95%的乙醇提取物中分离了9个黄酮类单体成分，分别为木犀草素（1）、木犀草素-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）、山奈酚（3）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、山柰酚-3-O－（6″-O-反式对香豆酰基）－β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、山柰酚-3-O-（6″-O-顺式对香豆酰基）－β-D-吡喃葡萄糖苷（6）、山柰酚-3-O－（6″-O-阿魏酰基）－β－D-吡喃葡萄糖苷（7）、山奈酚-3-O-芸香糖苷（8）、山奈酚-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）。［结论］化合物6、7为首次从蜀葵属中分离得到，9为首次从该植物中分离得到。

蜀葵花；化学成分；结构鉴定

蜀葵花为锦葵科蜀葵属蜀葵 ［Althaea rosea （Linn.）Cavan.］的干燥花，别名为淑气花、一丈红、麻杆花、棋盘花等［1］，是维吾尔、蒙古等少数民族常用中草药，在维吾尔族民间自古就有用蜀葵花外敷消肿的习惯。其可全草入药，味甘甜，性凉，有清热解毒，止血消肿，排脓，利尿通淋的功效，用于治疗痈肿疮疡，烧烫伤，吐血、血崩，肠炎，痢疾，梅核气等症，并能解河豚毒［2］。笔者在应用多种色谱法对其95%乙醇（EtOH）提取物的化学成分进行研究的过程中，共分离鉴定了9个黄酮类单体化合物，并利用与文献类似的方法对它们进行了结构鉴定［3-7］。其中，6、7为首次从蜀葵属中分离得到，9为首次从该植物中分离得到的化合物。见图1。

1 仪器与材料

旋转蒸发仪（德国IKA公司，IKA RV 10、上海亚荣生化仪器厂，RE52CS），薄层色谱硅胶预板、高效硅胶GF254（天津思利达科技有限公司），正相柱色谱用硅胶（48～75 μm），薄层色谱用硅胶H（10～40 μm，青岛海洋化工厂），Sephadex LH-20（瑞典Ge Healthcare Bio-Sciences AB公司），D101大孔吸附树脂（净品级，天津海光化工有限公司），ODS （Chromatorex ODS MB，40～75 μm，日本Fuji Silisia Chemical公司），高效液相色谱（HPLC）用分析柱以及制备柱型号分别为Cosmosil5C18-MS-II（250mm×4.6 mm，5 μm）及（250 mm×20 mm，5 μm，日本Nacalai Tesque公司），Bruker 500 MHz NMR超导核磁共振波谱仪（瑞士Bruker公司，AvanceⅢ500MR）。

图1 蜀葵花中分离到的黄酮类化合物（1～9）

氯仿、甲醇、乙腈、丙酮、冰醋酸等色谱纯或分析纯试剂购自天津康科德科技有限公司。蜀葵花采自新疆吉木萨尔（人工种植），由天津中医药大学中药标本馆李天祥副教授鉴定为蜀葵的干燥花（A.rosea L.），植物标本存放于天津中医药大学中医药研究院。

2 提取与分离

取干燥蜀葵花（5.0 kg），粉碎，经95%EtOH加热回流提取，减压回收溶剂，真空干燥，得浸膏。上述浸膏（380 g）经D101大孔吸附树脂处理（H2O→70%EtOH→95%EtOH），得到H2O、70%EtOH、95% EtOH洗脱物分别为171 g、169 g及12 g。其中70% EtOH洗脱物（120 g），经硅胶柱色谱层析［CHCl3-MeOH（100∶0→100∶5，v/v）→CHCl3-MeOH-H2O（10∶3∶1→6∶4∶1，v/v/v，下层）］，得到12个组分（Fr.1～12）。

Fr.2（8.6 g）经硅胶柱色谱层析［石油醚-乙酸乙酯（100∶0→2∶1，v/v）］及Sephadex LH-20柱层析［CHCl3-MeOH（1∶1，v/v）］，得到山柰酚（3，70.3 mg）。Fr.3（9.0 g）经ODS柱色谱层析［MeOH-H2O（30∶70→100∶0，v/v）和制备型高效液相色谱法（PHPLC）分离制备［MeOH-H2O（55∶45，v/v）+1%HAc］，得到木犀草素（1，77.0 mg）。

Fr.4（10.0 g）经PHPLC分离制备［MeOH-H2O （40∶60→45∶55→55∶45，v/v）+1%HAc］，得到13个组分（Fr.4-1～4-13）。Fr.4-4经PHPLC分离制备［MeOH-H2O（40∶60，v/v）+1%HAc］，得到山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷（4，208.4 mg）。Fr.4-7经PHPLC分离制备［MeOH-H2O（50∶50，v/v）+1%HAc］，得到了山柰酚-3-O-（6″-O-反式对香豆酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（5，8.0 mg）。Fr.4-8经PHPLC分离制备［MeOH-H2O（50∶50，v/v）+1%HAc］，得山柰酚-3-O-（6″-O-顺式对香豆酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（6，29.1 mg）及山柰酚-3-O－（6″-O-阿魏酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（7，21.3 mg）。

Fr.7（11.9g）经甲醇溶解后离心，将上清液（4.9 g）经ODS柱层析［MeOH-H2O（20%→30%→40%→60%→100%）］，得到5个组分（Fr.7-1～7-5）。Fr.7-3 经PHPLC分离制备［MeOH-H2O（35∶65，v/v）+1% HAc］，得到了木犀草素-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2，14.1 mg）、山奈酚-3-O-芸香糖苷（8，40.5 mg）及山奈酚-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9，6.4 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 287.0553［M+H］+，确定其分子式为C15H10O6（Calcd for C15H11O6，287.055 0）。1HNMR（500 MHz，DMSO-d6）：δ 6.24（1H，br.s，H-6），6.49 （1H，br.s，H-8），6.68（1H，s，H-3），6.95（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′），7.45（2H，m，H-2′and 6′）、13.01 （1H，s，5-OH）。其1H-NMR谱、13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6，表1）谱数据与文献［8］相对照，鉴定该化合物为木犀草素（luteolin）。

化合物2：黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 449.108 7［M+H］+，确定其分子式为C21H20O11（Calcd for C21H21O11，449.107 8）。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）：δ 4.87（1H，d，J=7.5 Hz，H-1"）、6.19（1H，d，J=1.5 Hz，H-6）、6.48（1H，J= 1.5 Hz，H-8）、6.80（1H，s，H-3）、7.25（1H，J=8.5 Hz，H-5′），7.50（1H，br.s，H-2′）、7.53（1H，m，br.d，ca.J=9 Hz，H-6′）、12.90（1H，s，5-OH）。其1H-NMR谱、13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6，表1）谱数据与文献［9］相对照，鉴定该化合物为木犀草素-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（luteolin-4′-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物3：黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 287.056 3［M+H］+，确定其分子式为C15H10O6（Calcd for C15H11O6，287.055 0）。1HNMR（500 MHz，DMSO-d6）：δ 6.25（1H，br.s，H-6）、6.49 （1H，br.s，H-8）、6.98（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′）、8.10（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′）、12.52（1H，s，5-OH）。其1H-NMR谱、13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6，表1）谱数据与文献［10］相对照，鉴定该化合物为山奈酚（kaempferol）。

化合物4：黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 449.109 1［M+H］+，确定其分子式为C21H20O11（Calcd for C21H21O11，449.107 8）。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）：δ 5.47（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），6.21（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），6.44（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.89（2H，d，J=8.5，H-3′，5′），8.05 （2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），12.62（1H，s，5-OH）。其1H-NMR谱、13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6，表1）谱数据与文献［11］相对照，鉴定该化合物为山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物5：黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 595.144 1［M+H］+，确定其分子式为C30H26O13（Calcd for C30H27O13，595.144 6）。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）：δ［4.04（1H，dd，J= 6.5、12.0 Hz），4.28（1H，br.d，ca.J=12 Hz），H2-6］，5.42（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），6.13（1H，d，J=16.0 Hz，H-8″′），6.28（1H，br.s，H-6），6.39（1H，br.s，H-8），6.79（2H，d，J=8.5 Hz，H-3″′，5″′），6.84（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），7.35（1H，d，J=16.0 Hz，H-7″′），7.38（2H，d，J=8.5 Hz，H-2″′，6″′），7.98（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），12.51（1H，s，5-OH）。其1H-NMR谱、13C-NMR （125 MHz，DMSO-d6，表1）谱数据与文献［12］相对照，鉴定该化合物为山柰酚-3-O-（6″-O-反式对香豆酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol-3-O-（6″-O-trans-p-coumaroyl）-β-D-glucopyranoside）。

化合物6：黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 595.144 9［M+H］+，确定其分子式为C30H26O13（Calcd for C30H27O13，595.144 6）。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）：δ［4.10（1H，dd，J= 6.0、12.0 Hz）、4.18（1H，br.d，ca.J=12 Hz），H2-6″］，5.40（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），5.49（1H，d，J=13.0 Hz，H-8″′），6.16（1H，br.s，H-6），6.31（1H，br.s，H-8），6.68（1H，d，J=13.0 Hz，H-7″′），6.72（2H，d，J=8.5 Hz，H-3″′，5″′），6.85（2H，d，J=9.0 Hz，H-3′，5′），7.56 （2H，d，J＝8.5 Hz，H－2″′，6″′），7.95（2H，d，J=9.0 Hz，H-2′，6′），12.53（1H，s，5-OH）。其1H-NMR谱、13CNMR（125 MHz，DMSO-d6，表1）谱数据与文献［13］相对照，鉴定该化合物为山柰酚-3-O－（6″-O-顺式对香豆酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol-3-O-（6″-O-cis-p-coumaroyl）-β-D-glucopyranoside）。

化合物7：黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 625.155 0［M+H］+，确定其分子式为C31H28O14（calcd for C31H29O14，625.155 2）。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）：δ 3.88（3H，s，3″′-OCH3），5.31（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），6.05（1H，d，J= 16.0 Hz，H-8″′），6.13（1H，br.s，H-6），6.26（1H，br.s，H-8），6.80（1H，d，J=8.0 Hz，H-5″′），6.80（2H，d，J= 8.5 Hz，H-3′，5′），7.26（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），7.36（1H，d，J=16.0 Hz，H-7″′），7.53（1H，br.d，ca.J= 8 Hz，H-6″′），7.83（1H，br.s，H-2″′）。其1H-NMR谱、13C-NMR（125 MHz，CD3OD，表1）谱数据与文献［14］相对照，鉴定该化合物为山柰酚-3-O－（6″-O-阿魏酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol 3-O-β-D－（6″-feruloylglucoside））。

化合物8：黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 595.166 2［M+H］+，确定其分子式为C27H30O15（Calcd for C27H31O15，595.165 7）。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）：δ 1.01（3H，d，J=6.5 Hz，6″′-CH3），4.41（1H，br.s，H-1″′），5.33（1H，d，J= 7.5 Hz，H-1″），6.23（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），6.43（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.91（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），8.01（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），12.57（1H，s，5-OH）。其1H-NMR谱、13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6，表1）谱数据与文献［15］相对照，鉴定该化合物为山奈酚-3-O-芸香糖苷（Kaempferol 3-O-rutinoside）。

化合物9：黄色粉末。高分辨Q-TOF-ESI-MS给出其准分子离子峰m/z 449.107 8［M+H］+，确定其分子式为C21H20O11（Calcd for C21H21O11，449.107 8）。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）：δ 4.99（1H，d，J=7.0 Hz，H-1″），6.20（1H，br.s，H-6），6.47（1H，br.s，H-8），7.19（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），8.14（2H，d，J= 8.5 Hz，H-2′，6′），12.42（1H，s，5-OH）。其1H-NMR谱、13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6，表1）谱数据与文献［16］作对照，鉴定该化合物为山奈酚-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol4′-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物1～9中13C-NMR数据见表1。

表1 化合物1～9中13C-NMR数据

4 结论

本课题运用色谱和波谱学方法对蜀葵花的化学成分进行研究，从中分离鉴定了9个黄酮类单体成分，分别为木犀草素（1）、木犀草素-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）、山奈酚（3）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、山柰酚-3-O－（6″-O-反式对香豆酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、山柰酚-3-O-（6″－O－顺式对香豆酰基）－β－D－吡喃葡萄糖苷（6）、山柰酚-3-O-（6″-O-阿魏酰基）－β－D-吡喃葡萄糖苷（7）、山奈酚-3-O-芸香糖苷（8）、山奈酚-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）。其中化合物6、7为首次从蜀葵属中分离得到，9为首次从该植物中分离得到。

5 讨论

蜀葵花是维吾尔族常用药材，在新疆广泛种植、资源丰富。临床上蜀葵花用途广泛，已用于眼皮炎肿、耳底炎、乳腺炎等各种炎症［17］。但蜀葵花药理作用的物质基础和作用机制尚未明确，没有建立起质量标准，未能充分挖掘和研究蜀葵独特的药用功效，尚未开发出中药产品，不能满足国内外市场的需求。本课题对蜀葵花的化学成分进行研究，为蜀葵花进一步开发和利用提供了坚实的物质基础

［1］张 祎，陈 秋，刘丽丽，等.维药蜀葵花化学成分的分离与鉴定（I）［J］.沈阳药科大学学报，2013，30（5）：335-341.

［2］王晓丽，张红秋，崔红梅.蜀葵辅助治疗河豚鱼中毒的疗效观察［J］.中华全科医学，2010，8（4）：525-526.

［3］吴 帅，刘二伟，张 祎，等.川续断中化学成分的研究［J］.天津中医药大学学报，2010，29（3）：147-150.

［4］吴克磊，康利平，熊呈琦，等.蒺藜全草中甾体皂苷类化学成分研究［J］.天津中医药大学学报，2012，31（4）：225-228.

［5］刘丽丽，李晓霞，陈 玥，等，槐米化学成分研究I［J］.天津中医药大学学报.2014，33（4）：230-233.

［6］邓 屾，刘丽丽，陈 玥，等.益母草化学成分研究Ⅲ［J］.2014，33（6）：362-365.

［7］刘丽丽，李晓霞，陈 玥，等，槐米中酚酸类化学成分研究I［J］.天津中医药大学学报.2014，33（1）：39-41.

［8］陈晓珍，李国友，吴晓青，等.血满草的化学成分［J］.应用与环境生物学报，2010，16（2）：197-201.

［9］景永帅，杨 娟，汪 冶，等.光枝勾儿茶中蒽醌-苯并异色满苯醌二聚体成分［J］.中国药学杂志，2011，46（9）：661-664.

［10］解红霞，张金花，张宏桂，等.蒙药玉簪花的化学成分研究［J］.中国药学杂志，2009，44（10）：733-735.

［11］常仁龙，孙佳明，张 博，等.核桃楸叶化学成分研究［J］.中成药，2009，31（7）：1082-1085.

［12］肖 皖，李 宁，倪 慧，等.小秋葵化学成分的分离与鉴定［J］.沈阳药科大学学报，2009，26（10）：782-784.

［13］Jaromir B，Lutoslawa S.Phenylpropanoid esters from Lamium album flowers［J］.Phytochemistry，1994，38（4）：997-1001.

［14］Catalono S，Bilia AR，Martinozzi M，et al.Kaempferol 3-O-β-D-（6″-feruloylglucoside）from Polylepis incana［J］.Phytochemistry，1994，37（6）：1777-1778.

［15］何枢衡，张 祎，葛丹丹，等.中药半枝莲黄酮类成分的分离与结构鉴定［J］.沈阳药科大学学报，2011，28（3）：182-185.

［16］Ishikura N，Hayashida S.Kaempferol glycosides in the seed-coat of Ophiopogon jaburan（Kunth）Lodd［J］.Agricultural and Biological Chemistry，1979，43（9）：1923-1926.

［17］盛 萍，堵年生，杨学斌，等.维吾尔药材蜀葵子的鉴别研究［J］.新疆中医药，2003，21（4）：38-40.

Isolation and structural identification of the Flavonoids from the flowers of Althaea rosea

ZHANG Yi，CHAO Li-ping，CHEN Qiu，DONG Yong-zhe，LI Xiao-xia，WANG Tao
（Key Laboratory of Traditional Chinese Medicinal Chemistry and Analytical Chemistry of Tianjin，Tianjin 300193，China）

R284

A

1673－9043（2016）01－0036-04

10.11656/j.issn.1673-9043.2016.01.10

国家自然基金项目资助（81202995）；新世纪优秀人才支持计划资助（NCET-12-1069）；天津市高等学校创新团队培养计划资助项目（TD12-5033）。

张 祎（1974-），女，博士，教授，主要从事中药化学研究。

王 涛，E-mail：wangt@263.net。

（2015-10-20）