galectin-3、CK19和CD56在甲状腺乳头状癌诊断中的价值

陈忠其，冯建洪，童亚群，陆　玲

(佛冈人民医院病理科，广东 佛冈 511600)



galectin-3、CK19和CD56在甲状腺乳头状癌诊断中的价值

陈忠其，冯建洪，童亚群，陆玲

(佛冈人民医院病理科，广东 佛冈 511600)

目的了解galectin-3、CK19和CD56在甲状腺良恶性病变中的表达情况，探讨其在甲状腺乳头状癌诊断中的价值。方法采用免疫组织化学EnVision法检测47例甲状腺乳头状癌、30例结节性甲状腺肿和32例甲状腺滤泡状腺瘤中galectin-3、CK19和CD56的表达。结果galectin-3和CK19在甲状腺乳头状癌中均呈中等或强阳性表达，仅1例甲状腺乳头状癌galectin-3呈弱阳性表达。在结节性甲状腺肿和甲状腺滤泡状腺瘤中galectin-3和CK19均呈阴性表达，仅1例结节性甲状腺肿局部CK19弱阳性。CD56在甲状腺乳头状癌中呈阴性表达，在结节性甲状腺肿和甲状腺滤泡状腺瘤中均呈阳性表达。结论甲状腺乳头状癌中galectin-3和CK19表达有增高，而CD56表达缺失。3种蛋白联合标记对甲状腺乳头状癌的诊断有价值。

甲状腺乳头状癌； galectin-3； CK19； CD56； 免疫组织化学； 诊断

甲状腺乳头状癌是甲状腺恶性肿瘤中最常见的组织学类型，在日常的病理外检中诊断通常并不困难。典型的甲状腺乳头状癌镜下特征明显，具体表现为：密集的乳头状结构，乳头为真性乳头，乳头中心有纤维血管轴心，乳头被覆立方状或柱状上皮细胞，细胞排列拥挤、重叠，细胞核大，有不同程度核异型，核呈毛玻璃样，核膜清晰，可见核沟及核内假包涵体，间质内常见砂粒体形成等等。但当这些特征不明显或结节性甲状腺肿伴乳头状增生活跃时，容易出现误诊和漏诊。因此，需要利用免疫组织化学方法，寻求某些特异的肿瘤标记物，来辅助临床病理诊断。本研究通过检测galectin-3、CK19和CD56在甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿及甲状腺滤泡状腺瘤中的表达，探讨这3种蛋白在甲状腺乳头状癌中的诊断价值。

1　材料与方法

1.1临床资料

收集佛冈人民医院病理科2000年1月至2011年12月手术切除并经病理诊断的甲状腺乳头状癌47例，男5例，女42例，年龄26～74岁，平均43.5岁。其中经典型36例、滤泡亚型3例、微小乳头状癌8例。另选取同期手术切除的结节性甲状腺肿30例(男5例，女25例，年龄23～70岁，平均41岁)、甲状腺滤泡状腺瘤32例(男7例，女25例，年龄29～72岁，平均46.5岁)为对照。3种类型患者性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2检测方法

所有标本均经4%中性甲醛溶液固定，常规组织处理，石蜡包埋，4 μm切片，HE染色。免疫组织化学采用EnVision二步法，操作按试剂说明书进行，用已知阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。galectin-3、CK19、CD56抗体及试剂均为中杉金桥公司产品。

1.3结果判定

galectin-3、CK19免疫组织化学定位于细胞质，以细胞质中见到棕黄色颗粒分布为阳性。CD56免疫组织化学定位于细胞膜伴/不伴细胞质。采用半定量法，随机选取10个高倍视野(×400)，计算阳性目标细胞占目标细胞总数的百分率。galectin-3、CK19和CD56以阳性细胞≤10%为阴性(-)；11%～25%阳性细胞为弱阳性(+)；26%～50%阳性细胞为中等阳性()；>50%阳性细胞为强阳性()。

敏感性=(癌的阳性数/癌的总数)×100%，特异性=(良性病变的阴性数/良性病变总数)×100%。

1.4统计学方法

采用SPSS17.0软件对所得数据的处理行χ2检验。以P<0.05表示差异有统计学意义。

2　结果

2.1galectin-3在甲状腺病变组织中的表达

甲状腺乳头状癌与结节性甲状腺肿及甲状腺滤泡状腺瘤galectin-3阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)，结节性甲状腺肿及甲状腺滤泡状腺瘤galectin-3阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。47例甲状腺乳头状癌仅1例为弱阳性，其余均呈中等或强阳性(封四图1)。30例结节性甲状腺肿及32例甲状腺滤泡状腺瘤均呈阴性(封四图2)。癌旁甲状腺组织呈阴性或灶状弱阳性表达。galectin-3在甲状腺病变组织中的表达敏感性和特异性均为100%。

表1　galectin-3在甲状腺病变组织中的表达

*P<0.01与良性病变比较。

2.2CK19在甲状腺病变组织中的表达

47例甲状腺乳头状癌均呈中等或强阳性表达(封四图3)。30例结节性甲状腺肿仅1例为局部弱阳性，其余均呈阴性表达；32例甲状腺滤泡状腺瘤呈阴性表达。癌旁甲状腺组织呈阴性或灶状弱阳性表达。良恶性病变间CK19阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)，结节性甲状腺肿及甲状腺滤泡状腺瘤CK19阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。CK19在甲状腺病变组织中的表达敏感性和特异性均为100%。

2.3CD56在甲状腺病变组织中的表达

良恶性病变间CD56阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01),结节性甲状腺肿及甲状腺滤泡状腺瘤CD56阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。47例甲状腺乳头状癌均呈阴性表达(封四图4)。30例结节性甲状腺肿及32例甲状腺滤泡状腺瘤均呈阳性表达(封四图5—6)。癌旁甲状腺组织也呈阳性表达。CD56在甲状腺病变组织中的表达敏感性和特异性均为100%。

表2　CK19在甲状腺病变组织中的表达

*P<0.01与良性病变比较。

表3　CD56在甲状腺病变组织中的表达

*P<0.01与良性病变比较。

3　讨论

免疫组织化学作为一种有效的辅助诊断技术已广泛应用于日常临床病理诊断工作中。对甲状腺乳头状癌的诊断与鉴别诊断使用过许多抗体，常见的有HBME-1、CK19、galectin-3、TPO、P63、CD56、p16等[1-11]。本研究探讨galectin-3、CK19和CD56在甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿及甲状腺滤泡状腺瘤中的表达情况，分析并验证这3种抗体在诊断甲状腺乳头状癌的价值、敏感性与特异性。

galectin-3是一种β-半乳糖苷结合蛋白，属于脊椎动物半乳糖凝集素家族的成员。其主要存在于细胞质中，也可存在于细胞核、细胞表面或者细胞外间质中，具有多种生物学功能。可表达于巨噬细胞、上皮细胞(如甲状腺、胃、肠)、成纤维母细胞、免疫细胞等。在细胞生长、分化、黏附、炎症、凋亡，以及肿瘤的浸润和转移等生理及病理过程中起重要作用。许多研究[3-5，7]证实galectin-3在甲状腺乳头状癌中呈强阳性表达，对甲状腺乳头状病变的良恶性鉴别诊断有一定实用价值。文献报道中，甲状腺乳头状癌galectin-3的阳性表达率分别为98.4%[3]、98.5%[4]、94.5%[5]。本研究galectin-3在47例甲状腺乳头状癌中仅1例为弱阳性，其余均呈中等或强阳性表达；癌旁甲状腺组织呈阴性或灶状弱阳性表达。在结节性甲状腺肿及甲状腺滤泡状腺瘤中均呈阴性表达，与文献报道相符，其敏感性与特异性均为100%。

CK19是低分子量的细胞角蛋白，存在于正常上皮和各种上皮来源的肿瘤中，特别是单层上皮和间皮。CK19在甲状腺病变良恶性鉴别诊断中被广泛应用[3-7，9-10]，其在甲状腺病变中的表达与galectin-3平行。CK19对甲状腺乳头状癌的诊断有较高敏感性。文献报道中，甲状腺乳头状癌CK19的阳性表达率分别为98.4%[3]、98.5%[4]、98.2%[5]、100%[9]。甲状腺乳头状癌CK19的表达明显增加，尤其当CK19表达强阳性时，支持甲状腺乳头状癌的诊断。有文献[5]报道CK19在良性甲状腺病变中有20.4%阳性表达，呈局灶状弱阳性表达，认为CK19弱阳性表达不具有特异性，只有呈弥漫的中、强阳性表达才是诊断甲状腺乳头状癌的重要依据。本研究中47例甲状腺乳头状癌CK19均呈中等或强阳性表达，癌旁甲状腺组织呈阴性或灶状弱阳性表达。观察到良性甲状腺病变中仅1例结节性甲状腺肿表达局部弱阳性，其余结节性甲状腺肿及甲状腺滤泡状腺瘤均呈阴性表达，与文献报道基本吻合，其敏感性和特异性均为100%。

CD56又称为神经细胞黏附分子(N-CAM)，广泛存在于大部分的神经外胚层来源的细胞、组织和肿瘤中，正常表达于神经元、星形细胞、施万细胞、NK细胞以及小部分活化的T细胞[7-8]。CD56是神经内分泌肿瘤最敏感的标记物，在视网膜母细胞瘤、髓母细胞瘤、星形细胞瘤、神经母细胞瘤、小细胞癌及NK/T细胞淋巴瘤等肿瘤表达阳性[9-10]。其表达缺失与某些恶性肿瘤的转移潜能及预后相关。CD56被较多用于甲状腺病变的研究，是一种新的诊断甲状腺乳头状癌的免疫标记物[11-12]。CD56在甲状腺乳头状癌中的表达结果差异不大，均显示CD56表达缺失是主要表现，CD56在甲状腺乳头状癌病例中呈阴性表达，而在良性甲状腺组织则呈持续性阳性表达[13]。本研究结果与已有报道相似，47例甲状腺乳头状癌CD56均呈阴性表达。癌旁甲状腺组织呈阳性表达。结节性甲状腺肿及甲状腺滤泡状腺瘤CD56均呈阳性表达。CD56在甲状腺乳头状癌失表达有一定的病理诊断价值，推断可用于甲状腺乳头状癌与良性甲状腺乳头状增生的鉴别诊断[10]。在本研究中，其在甲状腺乳头状癌诊断中的敏感性和特异性均达100%。

本研究结果提示，galectin-3、CK19和CD56都是诊断甲状腺乳头状癌的有用标志物，敏感性和特异性偏高可能与样本数偏少有关。在实际工作中，联合运用galectin-3、CK19和CD56检测，对甲状腺乳头状癌的诊断和鉴别诊断具有一定的实用价值。

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(责任编辑：罗芳)

Diagnostic Value of galectin-3,CK19 and CD56 Expression in Papillary Carcinoma of Thyroid

CHEN Zhong-qi,FENG Jian-hong,TONG Ya-qun，LU Ling

(DepartmentofPathology,FogangPeople’sHospital,Fogang511600,China)

ObjectiveTo investigate the expression of galectin-3,CK19 and CD56 in malignant and benign thyroid lesions,and to evaluate their significance in the diagnosis of papillary carcinoma of thyroid.MethodsThe expression of galectin-3,CK19 and CD56 was detected using immunohistochemical EnVision technique in 47 cases of papillary thyroid carcinoma,30 cases of multinodular goiter and 32 cases of follicular thyroid adenoma.ResultsThe moderate to strong expression of galectin-3 and CK19 was observed in papillary thyroid carcinoma,except 1 case of weakly positive expression of galectin-3.The negative expression of galectin-3 and CK19 was detected in both multinodular goiter and follicular thyroid adenoma,except 1 case of weakly positive expression of CK19 in multinodular goiter.The expression of CD56 was negative in papillary thyroid carcinoma,but positive in multinodular goiter and follicular thyroid adenoma.ConclusionThe expression of galectin-3 and CK19 increases but the expression of CD56 is deficient in papillary thyroid carcinoma.The combined detection of galectin-3,CK19 and CD56 is valuable for diagnosis of papillary thyroid carcinoma.

papillary carcinoma of thyroid; galectin-3; CK19; CD56; immunohistochemistry; diagnosis

2015-10-19

陈忠其(1963—)，男，本科，副主任医师，主要从事肿瘤病理学的研究。

R736.1

A

1009-8194(2016)06-0005-03

10.13764/j.cnki.lcsy.2016.06.002