MIF及VEGF在RSA患者血清和蜕膜中的表达及其意义

谢晓芳

(菏泽医学专科学校临床系，山东 菏泽 274000)



MIF及VEGF在RSA患者血清和蜕膜中的表达及其意义

谢晓芳

(菏泽医学专科学校临床系，山东 菏泽 274000)

目的研究巨噬细胞移动抑制因子(macrophagemigrationinhibitoryfactor,MIF)及血管内皮生长因子(yascularendotnelialgrowthfactor,VEGF)在复发性自然流产(recurrentspontaneousabortion,RSA)患者血清和蜕膜中的表达及意义。方法选择RSA患者28例(RSA组)及同孕龄正常早孕妇女30例(正常早孕组)，采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测2组外周血清和蜕膜组织中MIF、VEGF水平，并对血清和蜕膜组织中MIF与VEGF的表达水平进行简单直线相关分析。结果RSA组血清和蜕膜组织中MIF和VEGF水平均低于正常早孕组(均P<0.01)。简单直线相关分析结果显示：血清和蜕膜组织中MIF与VEGF水平呈正相关(r=0.72、0.65，均P<0.01)。结论妊娠期母胎界面MIF和VEGF的异常降低，可能在早期复发性流产的发生发展中起重要作用。

巨噬细胞移动抑制因子； 可溶性血管内皮生长因子； 复发性自然流产； 血清； 蜕膜

recurrentspontaneousabortion;serum;decidua

在妊娠过程中自然流产的发生率逐渐增高，最高可达到全部妊娠活动的20%[1]。流产是妊娠不足28周、胎儿体质量不足1000g而发生的妊娠终止现象，分为自然流产和人工流产。复发性自然流产(recurrentspontaneousabortion,RSA)是指连续发生2次或2次以上的自然流产[2]，该病病因复杂，涉及医学多个学科领域，是妇产科比较棘手的一种疾病，目前仍有1/2的病因不明。胎盘是胎儿的重要附属物，几乎替代了胎儿的一切功能。近年来的研究[3-4]表明，如果胎盘组织动静脉血管网络不能及时建立，则会影响胎儿氧气和营养物质供应从而导致RSA的发生。

巨噬细胞移动抑制因子(macrophagemigrationinhibitionfactor，MIF)是一种多功能细胞因子，与胚胎的分化发育和胎盘血管网络的建立关系密切。血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)是促血管生长作用最强的细胞因子。为此，本研究通过比较RSA患者和正常早孕妇女血清和蜕膜组织中MIF、VEGF的水平变化，探讨其在RSA中的作用。

1　对象与方法

1.1研究对象

选择2013年11月至2014年8月在菏泽市立医院妇科门诊就诊的妇女58例。其中RSA患者28例(RSA组)，年龄(26.6±5.6)岁，流产时间(7.7±2.5)周；流产次数2次者16例，≥3次者12例。女方妇科检查、内分泌检查均正常；男方精液检查正常，无精索静脉曲张；夫妻双方染色体核型正常。选择同期要求人工流产的正常早孕妇女30例(正常早孕组)，年龄(25.8±3.3)岁，流产时间(7.6±1.8)周；既往月经规律，无异常妊娠病史。此次妊娠各项检查提示母体、胚胎各项指标正常。2组年龄和孕周比较差异无统计学意义。

1.2研究方法

1.2.1标本采集

2组研究对象均在就诊时收集标本。1)抽取空腹肘正中静脉血6mL，分装2支清洁含抗凝剂的试管中，3000r·min-1离心20min，静置60min，收集血清置于-30 ℃ 冰箱中保存体测。2)清宫术后，立即取蜕膜组织，无菌盐水认真漂洗至无血迹后置于-70 ℃ 冰箱中保存待检。标本收集时均取得患者的知情同意。

1.2.2检测方法

采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清和蜕膜组织中MIF、VEGF含量，试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司，测定过程严格按照说明书进行，尽量减少误差。

1.3统计学方法

2　结果

2.12组血清和蜕膜组织中MIF、VEGF水平比较

RSA组血清和蜕膜组织中MIF和VEGF水平均低于正常早孕组(均P<0.01)。见表1。

表1　MIF、VEGF在血清和蜕膜组织中的水平比较

P<0.01与正常早孕组比较。

2.2血清和蜕膜组织MIF水平与VEGF水平相关性的分析

简单直线相关分析结果示：血清和蜕膜组织中MIF水平与VEGF水平呈正相关(r=0.72、0.65，均P<0.01)

3　讨论

3.1MIF在RSA患者血清和蜕膜组织中的变化及意义

妊娠被认为是成功的同种异体移植，之所以母体与胎儿之间不发生免疫排斥反应，与母胎界面存在的多种细胞因子发挥的免疫赦免机制密不可分。MIF是在研究迟发型超敏反应过程中发现的一个具有三维晶体结构的独特蛋白质，含有115个氨基酸残基，相对分子量为12 500[5]。最初发现MIF功能为抑制巨噬细胞在体外随机迁移而被命名，广泛表达于肺、胃肠道、泌尿生殖道等组织及器官的细胞中。MIF表达的增强与炎症反应、免疫调节、脂质过氧化、胰岛素抵抗及内皮功能损伤等病理机制密切相关，因此是一种多效能细胞因子[6]。目前，有关MIF与冠心病、糖尿病、动脉粥样硬化等疾病关系的文献较多，但针对MIF与RSA之间作用的报道较少。早期通过Northern印迹和RT-PCR方法检测发现，MIF在胚胎着床时子宫内膜及妊娠前3个月胎盘绒毛及蜕膜组织中表达增高，并通过调控肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)、白细胞介素-1(interleukin-1，IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)等细胞因子来维持胚胎植入和着床[7]。近期研究[8]也认为，MIF可能直接参与调节胚胎着床的各个环节；妊娠早期及胎盘发育时也可产生包括MIF在内的多种炎症因子，而MIF可调节巨噬细胞对胎盘组织的浸润。

早期妊娠时，胚胎处于一个相对缺氧的环境中，而缺氧能增高MIF的表达[9]，这些均表明在胚胎植入及发育时即妊娠早期，MIF扮演了重要角色。也有学者[10]发现，MIF虽在妊娠全程的绒毛膜外细胞滋养层及蜕膜组织滋养层细胞有表达，但表达水平变化不明显。Ietta等[11]研究认为，妊娠晚期羊水和胎膜中也有MIF的表达，且分娩期含量最高。提示在分娩期，MIF也同样扮演了重要角色。Yamada等[12]同时还发现，同样是有反复流产史的妇女，早孕时期一些胎儿染色体核型正常者MIF水平比有活产史的妇女及正常妊娠妇女都明显降低。

本研究结果显示：和正常早孕组相比，RSA组患者血清和蜕膜组织中MIF水平显著降低，提示MIF在胚胎植入和早期妊娠的维持中发挥了重要作用，当早孕期间MIF表达降低时，就容易导致流产的发生，但具体机制不是很清楚。

3.2VEGF在RSA患者血清和蜕膜组织中的变化及意义

VEGF是目前发现的一种由血管内皮细胞、滋养细胞和巨噬细胞等分泌的，针对内皮细胞特异性最高、促血管生长作用最强的细胞因子。胎盘是母胎对话的重要纽带，胎盘绒毛的血管形成及血管网络的构建是胎盘发挥其重要功能的保证。胎盘血管网络的形成过程实际上是血管内皮细胞生长和发育的过程，其中VEGF在其中发挥着非常重要的作用[13]。在妊娠刚刚建立时，VEGF维持着蜕膜血管的正常增生和血液正常的通透性，而这2个条件是受精卵成功着床和胚胎的生长发育必不可少的。在此之后的妊娠过程中，VEGF又促进了胎盘部位的血管形成和分化。因此，VEGF功能受到抑制，将不可避免地发生流产[14-15]。影响VEGF的因素非常多，如缺血缺氧、激素变化、吸烟和高血糖等，其中组织内氧浓度的变化对其影响较大，高浓度氧能抑制VEGF的表达。在正常妊娠时，孕早期胚胎发育处于一个相对缺氧环境中，在缺氧情况下，组织中的VEGF表达迅速上调，让新血管迅速形成[1]。Muttukrishna等[16]研究发现，妊娠妇女血清VEGF水平随妊娠进展升高，在妊娠16周时达到高峰，这一时间正是胎盘正常形成发育的时间，但在出现先兆流产症状之后VEGF表达水平则迅速下降。Chai等[17]亦证实在自然流产时，患者绒毛组织中VEGF表达明显下降。

本研究结果显示：RSA患者血清和蜕膜组织中VEGF水平明显低于正常早孕组(P<0.01)。Vuorela等[18]研究发现，自然流产妇女胎盘滋养细胞VEGF的免疫活性比正常妊娠时明显降低，说明VEGF在胎盘绒毛血管网建立和胚胎血管形成中的作用是不容忽视的，当VEGF功能障碍时，流产将不可避免的发生了。有学者[16,19]认为，反复多次自然流产与VEGF的表达降低有关，可能原因：当VEGF下降时，血管内皮细胞增殖能力下降，血管活性通透物质表达下降，导致胎盘血管网络生成障碍或功能不全(胎盘丰富的血液供应是维持胎儿宫腔正常发育的重要保证)，最终因胎儿胎盘组织血供不足导致胚胎停止发育及流产发生。也有学者[20]报道，RSA发生增加与VEGF基因多态性突变有关。

3.3RSA患者血清和蜕膜组织中的MIF水平与VEGF水平的相关性

有研究[21-22]表明，作为一个前炎症细胞因子，当风湿性关节炎等炎症发生时，MIF能提高VEGF的水平，使VEGF分泌随之增加，同样具有促进血管新生的作用。本研究结果表明，血清和蜕膜中MIF与VEGF呈正相关(r=0.72、0.65，P<0.01)，提示MIF和VEGF在RSA发病机制中的作用是协同的，但两者之间的关系有待于进一步研究。

综上所述，在正常妊娠的发生和维持中MIF与VEGF均发挥了重要的作用，当两者水平均明显下降时，影响胚胎着床和胎盘血管网络的正常建立，可导致流产的发生；在患者夫妇双方身体检查指标都正常时，RSA的发生与这2个细胞因子的降低关系密切。因此，在此研究的基础上，笔者将进一步探索MIF、VEGF细胞因子在RSA发病机制中的作用，使RSA能够得到早期发现、早期治疗。

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(责任编辑：周丽萍)

ExpressionandSignificanceofMIFandVEGFinSerumandDeciduaofWomenwithRecurrentSpontaneousAbortion

XIEXiao-fang

(Department of Clinical Medicine,Heze Medical College,Heze 274000,China)

ObjectiveToexploretheexpressionandsignificanceofmacrophagemigrationinhibitoryfactor(MIF)andvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)inserumanddeciduaofwomenwithrecurrentspontaneousabortion(RSA).MethodsTheserumanddeciduaexpressionofMIFandVEGFwasmeasuredbyELISAin28RSAwomenand30normalearlypregnantwomen.TherelationshipbetweenMIFandVEGFwasanalyzedinbothgroups.ResultsComparedwithnormalearlypregnantwomen,theserumanddeciduaexpressionofMIFandVEGFsignificantlydecreasedinRSAwomen(P<0.01).SimplelinearregressionanalysisshowedthatMIFexpressionwaspositivelycorrelatedwithVEGFexpressioninbothserum(r=0.72,P<0.01)anddecidua(r=0.65,P<0.01).ConclusionThedecreasedexpressionofMIFandVEGFinserumanddeciduamayplayanimportantroleintheoccurrenceanddevelopmentofRSA.

macrophagemigrationinhibitionfactor;vascularendothelialgrowthfactor;

2015-10-18

谢晓芳(1977—)，女，硕士，讲师，主要从事围产医学的基础与临床研究。

R714.21

A

1009-8194(2016)06-0049-04

10.13764/j.cnki.lcsy.2016.06.019