老年腮腺病变性质鉴别诊断及COX-2、cyclinD1的表达

王　斌

(海口市第三人民医院放射影像科，海南　海口　570208)



老年腮腺病变性质鉴别诊断及COX-2、cyclinD1的表达

王斌

(海口市第三人民医院放射影像科，海南海口570208)

目的采用MR敏感加权成像(SWI)鉴别诊断老年腮腺良、恶性病变，分析COX-2、cyclinD1在腮腺恶性病变肿瘤组织中的表达情况。方法首诊未接受任何治疗和病理检查的腮腺疾病老年患者行MR-SWI扫描，比较良、恶性病变各MR-SWI扫描观察指标；以病理为诊断金标准，受试者工作特征(ROC)曲线分析MR-SWI鉴别诊断老年腮腺病变性的效能。采用免疫组化S-P法检测腮腺恶性病变肿瘤组织、预留的正常腮腺组织(源于腮腺外伤老年患者)中环氧合酶(COX)-2、细胞周期蛋白(cyclin)D1表达情况。结果老年腮腺良性病变以周边分布为主，占89.47%(17/19)，恶性病变以静脉中央分布为主，占84.62%(11/13)，两者差异显著(χ2=19.771，P<0.01)；将静脉中央分布为诊断恶性病变标准，诊断恶性病变的敏感性为84.61%，特异度89.47%，准确度87.50%。最大静脉直径(dmax)诊断恶性病变的敏感性为84.61%，特异度94.74%，准确度90.63%；磁敏感信号强度(ITSS)分级诊断恶性病变的敏感性为84.61%，特异度84.21%，准确度84.38%。腺泡细胞癌中COX-2、cyclinD1阳性表达率分别为54.55%、63.64%；低分化鳞癌中COX-2、cyclinD1阳性表达率分别为62.50%、50.00%；多形性腺瘤中COX-2、cyclinD1阳性表达率均为71.43%；COX-2、cyclinD1在腮腺恶性病变组织中阳性表达率均明显高于腮腺正常组织(P<0.01)。结论MR-SWI提供的肿瘤内组织静脉分布、dmax、ITSS分级可用于老年腮腺良恶性病变的鉴别诊断，其中dmax的应用价值最高；COX-2、cyclinD1在老年腮腺恶性病变组织中高表达，与肿瘤的发生、发展可能有关。

敏感加权成像；环氧合酶-2；细胞周期蛋白1

目前，仅凭MRI动态增强和多层CT(MSCT)扫描在鉴别诊断腮腺肿瘤方面仍存在较大难度〔1〕。MR敏感加权成像(SWI)对肿瘤组织内的静脉血管结构和血液代谢物有较强的敏感性，有利于肿瘤性质的鉴别诊断。环氧合酶(COX)-2是一种诱导酶，可促进肿瘤血管生成和细胞增殖，在肿瘤形成、侵袭、转移中发挥重要作用。细胞周期蛋白(cyclin)D1是一种细胞周期调控蛋白，在细胞周期G1～S期转变中发挥关键作用，cyclinD1表达异常多出现在肿瘤细胞中，可促进细胞增殖〔2〕。本研究分析腮腺恶性病变患者肿瘤组织中COX-2、cyclinD1表达情况，为老年腮腺疾病的临床诊治提供参考。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2013年10月至2015年10月本院收治的经手术病理证实的腮腺疾病老年患者64例。入组条件：①首诊为腮腺病，未接受过任何相关治疗；②来本院就诊前未接受穿刺活检等病理检查；③自愿参与本次研究并签署知情同意书。术前均行CT和MRI常规序列扫描以及SWI序列扫描，其中男17例，女15例；年龄60～87〔平均(72.15±12.08)〕岁。

1.2影像学检查采用德国西门子NOVUS 1.5T 超导MRI仪，行腮腺区和上颈部横断面T1WI、T2WI平扫及T1W动态增强、SWI扫描。对各序列图像进行分析，内容包括：病灶内静脉分布情况，最大静脉直径(dmax)，静脉数量，肿瘤磁敏感信号强度(ITSS)；本次研究依据Kim等标准将ITSS分为四级：0级：瘤体组织内无低信号；1级：1～5个点状样或细线样低信号；2级：6～10个点状样、细线样低信号；3级：11个及以上点状样或细线样低信号。SWI图：瘤内静脉表现为粗细不均，直线或迂曲走行的管状结构，或连续层面能够追踪的低信号点，边界清晰。

1.3病理检查入选患者均手术切除患侧腮腺病灶肿物，10%甲醛溶液固定过夜，常规行石蜡包埋，0.4 μm连续切片，苏木素-伊红(HE)染色，光学显微镜下观察病变组织中血管大小、分布和形态。

1.4COX-2、cyclinD1水平检测采用免疫组化染色(S-P法)检测，取腮腺恶性病变患者病灶组织石蜡切片和预留的20个正常腮腺组织石蜡切片(源于腮腺外伤老年患者)，常规脱蜡、水化，高压热修复抗原，3%小牛血清封闭，滴加兔抗人COX-2多克隆抗体(1∶200)、兔抗人cyclinD1单克隆抗体(1∶200)，滴加辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉卵白素，SP复合物、二氨基联苯胺(DAB)显色、复染，磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作阴性对照，已知腮腺恶性病变组织切片为阳性对照。染色结果采用Image Pro Plus 6.0软件分析。每张切片200倍放大下观察5个视野，计算阳性细胞占总细胞数的比值，分级标准：阴性为<10%，弱阳性为≥10%、阳性为≥30%、强阳性为≥50%。

1.5统计学方法应用SPSS15.0软件，计量资料行两组间的t检验；计数资料进行χ2检验；MR-SWI鉴别诊断的效能采用受试者工作特征(ROC)曲线分析。

2　结　果

2.1MR-SWI与病理检查情况32例患者经病理证实良性病变38例，其中多形性腺瘤26例、腺淋巴瘤6例，结核、肉芽肿性炎、木村病各2例。其中比例最高的多形性腺瘤SWI图像，可见低信号走行于瘤体周围，与小动脉伴行。病理图片可观察到肿瘤细胞呈条索状排列，周边肌上皮细胞呈梭形，排列成一层，可见小静脉，肿瘤中央无粗大脉管。经病理证实恶性病变26例，其中腺泡细胞癌11例、低分化鳞癌8例、多形性腺瘤7例。其中腺泡细胞癌SWI图像可见瘤体中央区域有低信号静脉，直径约为3.8 mm；病理图片可见导管样排列的肿瘤细胞，细胞质偏酸性，瘤体中央区域存在大小不一的静脉和最大静脉。低分化鳞癌SWI图像可见瘤体中央区域有低信号静脉；病理图片中癌细胞成团排列，可见癌珠、细胞间桥，瘤体中央有较大静脉。多形性腺瘤SWI图像可见瘤体边缘有低信号静脉走行，直径约1.0 mm；病理图片中肿瘤细胞排列成管状或腺样，可见其周围有肌上皮细胞围绕，瘤体边缘有较大静脉，为多形性腺瘤改变。

2.2腮腺良恶性病变影像学指标比较腮腺恶性病变静脉直径明显大于良性静脉直径(P<0.01)；腮腺恶性病变ITSS分级多为2～3级，良性病变ITSS分级多为1级，良恶性病变ITSS分级之间差异有显著统计学意义(P<0.01)；良、恶性病变单位面积内静脉数量之间差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1　腮腺良恶性病变影像学指标比较±s)

2.3MR-SWI鉴别诊断腮腺良恶性病变效能腮腺良性病变中，静脉中央分布4例，周边分布34例；恶性病变中，静脉中央分布22例，周边分布4例；两者有统计学差异(χ2=19.771，P<0.01)；将腮腺病灶静脉中央分布为诊断恶性病变标准，诊断恶性病变的敏感性为84.61%(22/26)，特异度为89.47%(34/38)，准确度为87.50%(56/64)。

以病理为诊断金标准，绘制dmax、ITSS分级的ROC曲线，见图1，得到dmax、ITSS的最佳临界值为1.75 mm、1.5级，鉴别诊断效能见表2。以约登指数最大作为标准，其鉴别诊断腮腺病变性质的ROC曲线下面积(AUC)值分别为0.935、0.867。

图1　腮腺恶性病变最大静脉内径、ITSS鉴别诊断的ROC曲线分析

检测指标灵敏度特异性准确度dmax84.61%(22/26)94.74%(36/38)90.63%(58/64)ITSS分级84.61%(22/26)84.21%(32/38)84.38%(54/64)

2.4COX-2在腮腺恶性病变组织中的表达情况见图2。COX-2阳性切片中，可见呈棕黄色的阳性颗粒，多分布于胞质。10例正常腮腺组织标本中仅1例(10.00%)存在部分上皮细胞胞质中COX-2阳性表达。腺泡细胞癌中COX-2阳性表达率54.55%(6/11)，低分化鳞癌中COX-2阳性表达率62.50%(5/8)，多形性腺瘤中COX-2阳性表达率71.43%(5/7)。COX-2在腮腺恶性病变组织中阳性表达率明显高于腮腺正常组织(P<0.01)。

A.正常腮腺组织阴性表达；B.腺泡细胞癌中阳性表达；C.低分化鳞癌中阳性表达；D.多形性腺瘤中阳性表达；下图同图2　COX-2在正常腮腺组织及恶性病变组织中表达(DAB，×400)

2.5cyclinD1在腮腺恶性病变组织中的表达情况cyclinD1阳性切片中可见呈棕褐色的阳性颗粒，主要分布于胞核中，少数分布于胞质中。正常腮腺组织中基本无cyclinD1表达，腺泡细胞癌中cyclinD1阳性表达率63.64%(7/11)，低分化鳞癌中cyclinD1阳性表达率50.00%(4/8)，多形性腺瘤中cyclinD1阳性表达率71.43%(5/7)。cyclinD1腮腺恶性病变组织中阳性表达率明显高于腮腺正常组织(P<0.01)。见图3。

图3　cyclinD1在正常腮腺组织及恶性病变组织中表达(DAB，×400)

3　讨　论

SWI与传统MRI成像不同，主要运用分别收集强度和相位数据的方式，通过后期处理将相位信息与强度信息相互叠加，可更加突出病灶组织间的磁敏感性差异。因此，SWI能够较好地反映出肿瘤组织中的引流静脉、微血管生成、并发微出血等情况，有助于对瘤体性质的鉴别诊断〔3〕。COX-2是一种可诱导型酶，体内多数组织在正常生理情况下检测不到其存在，在细胞外多种刺激因子作用下才可诱发表达。相关研究显示，多种癌前病变和恶性肿瘤中存在COX-2高表达，而COX-2可促进肿瘤组织内血管生存，刺激肿瘤细胞增殖，抑制凋亡，提升肿瘤细胞转移风险〔4〕。cyclinD1在具有增殖活性的正常细胞中呈周期性表达，而其过度表达会引发多种细胞周期相关因子表达紊乱，诱导细胞过度增殖产生肿瘤〔5〕。

本次研究显示，老年腮腺良性病变的静脉分布以周边为主，恶性病变以中央为主，且SWI检查与病理结果一致。主要与肿瘤生长、增殖方式有关，良性肿瘤生长缓慢且病程长，以膨胀性方式生长，病灶对周围组织表现为推压、移位，因此静脉可随机分布在肿瘤组织边缘；恶性肿瘤多为浸润性生长，增殖速度快，对周围组织和血管多表现为包埋、破坏，因此静脉多分布于肿瘤中央〔6〕。本次研究中SWI检查显示，老年腮腺良性病变的dmax明显小于恶性病变，与病理表现一致。ITSS能够较为直观地反映出瘤体中静脉或微出血，本次研究中老年腮腺良恶性病变的ITSS分级之间有明显差异，良性病变的ITSS分级以1级为主，恶性病变以2～3级为主。ITSS分级直接反映出瘤体内静脉和微血管病灶的分布数量。

在鉴别诊断老年腮腺良恶性病变效能方面，ITSS分级鉴别诊断敏感性、特异性和准确度与病理诊断基本相当，而dmax指标在鉴别诊断效能要优于静脉分布和ITSS分级。因此MR-SWI提供的肿瘤内组织静脉分布、dmax、ITSS分级可用于老年腮腺良恶性病变的鉴别诊断，其中以dmax的应用价值最高。

本次研究中COX-2与cyclinD1表达率总体上呈正相关，恶性肿瘤组织中COX-2表达率上升时，cyclinD1表达率也跟着增加，提示COX-2可能诱导cyclinD的协同表达，进而促进腮腺组织细胞异常增殖、分化、癌变，但其机制仍需要深入研究。

1Kashiwagi N，Murakami T，Chikugo T，etal.Carcinoma ex pleomorphic adenoma of the parotid gland〔J〕.Acta Radiol，2012，53(3)：303-6.

2Goyauit L，Riehm S，Neuville A，etal.Interest of diffusion-weighted and gadolinium-enhanced dynamic MR sequences for the diagnosis of parotid gland tumors〔J〕.J Neuroradiol，2011；38(2)：77-89.

3Yeung DK，Bhatia KS，Lee YY，etal.MR elastography of the head and neck：Driver design and initial results〔J〕.Magn Reson Imag，2013；31(4)：624-9.

4Ishibashi M，Fujii S，Kawamoto K，etal.The ability to identify the intraparotid facial nerve for locating parotid gland lesions in comparison to other indirect landmark methods：evaluation by 3.0 T MR imaging with surface coils〔J〕.Neuroradiology，2010；52(11)：1037-45.

5Lee FK，King AD，Kam MK，etal.Radiation injury of the parotid glands during treatment for head and neck cancer：assessment using dynamic contrast-enhanced MR imaging〔J〕.Radiat Res,2011；175(3)：291-6.

6Zhu L，Wang P，Yang J，etal.Non-Hodgkin lymphoma involving the parotid gland：CT and MR imaging findings〔J〕.Dentomaxillofaci Radiol，2013；42(9)：150-62.

〔2015-12-17修回〕

(编辑袁左鸣)

王斌(1975-)，男，主治医师，主要从事放射影像方面研究。

R455

A

1005-9202(2016)18-4564-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.081