大鳞鲃的人工繁殖及体色变异分析

丁辰龙，蔺玉华，王宣朋，姜爱兰，覃宝利

（江苏省农业科学院宿迁农科所，江苏 宿迁 223800）

大鳞鲃的人工繁殖及体色变异分析

丁辰龙，蔺玉华，王宣朋，姜爱兰，覃宝利

（江苏省农业科学院宿迁农科所，江苏 宿迁 223800）

为了促进引进大鳞鲃的苗种扩繁和种质资源保护，在江苏北部地区进行了3龄大鳞鲃的池塘养殖和全人工繁殖.催产药物包括4 μg/kg的促黄体释放激素、2 mg/kg的马来酸地欧酮和1.8 mg/kg的绒毛膜促性腺激素，干法人工授精.孵化桶内微流水孵化，水温23～25℃，48～70 h内受精卵破膜.3龄亲鱼的产卵量为2.81×104～5.42×104，平均授精率为93.2%，平均孵化率为80.6%.从1 d仔鱼养至30 d夏花苗，成活率约为66.1%.野生大鳞鲃引进后，从第1代至第3代个体的生长指标和体色等性状发生变化.第2代（白色）和第3代（红色）的体色变异种数量均小于群体的0.3%，第3代不同体色个体的体质量、体长和头长等均存在显著差异，依次为黑灰色＞黄色＞红色，差异具有统计学意义（P＜0.05）.

大鳞鲃；人工繁殖；养殖；体色变异

大鳞鲃（Barbus capito）属于鲤科（Cyprinidae）、鲃亚科（Barbinae）、鲃属（Barbus）.该鱼原产于乌兹别克斯坦的阿姆河，为野生种[1].与我国的鲃类鱼相比，大鳞鲃具有广温性、肉质鲜美、生长速度快、抗逆性强、耐盐碱等优良特性.鉴于我国内陆盐碱水域广阔，鱼类养殖种类单一，本课题组蔺玉华于2003年将大鳞鲃引入国内.目前，大鳞鲃的盐碱池塘养殖生物学、生理学、营养学及遗传学等方面的研究已有报道[2-9]，野生鱼的人工繁殖也有文献记载[10-11].大鳞鲃的人工繁殖和池塘养殖已取得阶段性进展，在黑龙江、天津、内蒙古、河北、山东、四川、江苏等地区均有淡、咸水池塘养殖.由于大鳞鲃以高档名贵鱼类进入市

场，因此渔民获得了较大的经济效益.大鳞鲃的人工繁殖目前尚未形成一套成熟的技术体系，在亲鱼培育、催产方法、受精卵孵化等方面仍存在诸多问题，如人工繁殖鱼苗的孵化率和苗种成活率较低，这在很大程度上困扰着大鳞鲃的规模化生产，满足不了市场需求.此外，由于大鳞鲃引进的原始种数量有限，群体的近亲繁殖将会导致种群优良性状退化.

本研究报道了淡水池塘养殖大鳞鲃的亲鱼培育、催产、孵化、苗种培育等相关技术，以及野生大鳞鲃繁殖后代的生长及体色变化.研究结果可为完善大鳞鲃人工繁殖技术、保护现有种质资源提供科学依据.

1 材料与方法

1.1 材料

亲鱼取自江苏省宿迁市农业科学院养殖基地3龄以上的大鳞鲃，该鱼为野生苗种经过池塘驯化、养殖、繁殖后的苗种培育成的亲鱼，属于第2代亲鱼.雄鱼体长34.0～43.5 cm，体质量0.50～1.26 kg；雌鱼体长42.0～46.4 cm，体质量1.00～1.85 kg.

1.2 方法

1.2.1 亲鱼挑选

4月下旬，挑选体表鳞片完整无病、成熟度较好的亲鱼.雄鱼轻压其生殖孔有乳白色精液流出，精液入水即散.雌鱼一般较雄性个体大，腹部膨大，生殖孔红润而突出，呈喇叭筒状.

1.2.2 人工催产和受精

5月初，当水温稳定在20～22℃时，从暂养池中挑选亲鱼进行人工催产.注射药物为宁波生物制药三厂生产的促黄体释放激素类似物（LRH-A2）、马来酸地欧酮（DOM）和绒毛膜促性腺激素（HCG），3种药物混合注射.注射剂量为：4 μg/kg的LRH-A2+2 mg/kg的DOM+1.8 mg/kg的HCG.雌鱼采用胸鳍腹腔2次注射，第1次仅注射1 μg/kg的LRH-A2，10～12 h后注射第2针（3种药物混合）.雄鱼注射剂量减半，仅1次.亲鱼催产后将雌、雄鱼分开，放在暂养圆槽内待产，圆槽直径2.0 m，高0.5 m.以水泵循环流水刺激催产亲鱼和增氧，利用加热装置循环水调试水温为23～25℃.催产后，在药物效应时间为10～18 h时检查待产亲鱼.

采用干法授精：亲鱼催产后，在药物效应时间10～18 h时，每隔1～2 h检查雌鱼生殖孔，轻轻挤压腹部，发现有卵粒流出，立即干法授精.人工授精后，立即将受精卵倒入孵化桶，微流水孵化.

1.2.3 受精卵孵化过程

圆柱孵化桶孵化：受精卵倒入圆柱孵化桶内，每桶放置约1.5万粒卵.孵化桶直径15 cm，高40 cm，置于装满清水的孵化槽中，使用过滤器反冲式微流水孵化.孵化槽内的水每天更换2～3次.孵化水温为23～25℃，48～70 h破膜孵化出鱼苗.当孵化桶内有10% 的鱼苗出膜时，将桶内鱼胚倒入平面槽.

椎体孵化桶孵化：将受精卵放入椎体孵化桶内，每桶放置约6～10万粒卵.椎体孵化桶的体积为109.4 L（外径95.0 cm，内径66 cm，高96.0 cm），使用微流水孵化.孵化水温也是23～25℃，56 h左右时有鱼苗出膜.将孵出的仔鱼不断移出孵化桶，倒入圆槽内，继续进行鱼苗培育.

1.2.4 怀卵量、成熟系数计算方法

随机取8尾雌鱼和5尾雄鱼，分别测定体长和体质量.对测定鱼体进行解剖，称量性腺质量.取性腺中段1 g，放在培养皿内计数，计算总怀卵量和雌、雄鱼的成熟系数，即性腺质量与体质量之比.

1.2.5 数据分析

采用SigmaPlot 11.0对实验数据进行分析处理.用One-way ANOVA分析数据差异是否具有统计学意义，数据采用算术平均值±SD.

2 结果与分析

2.1 大鳞鲃产卵量及孵化率

大鳞鲃3龄亲鱼的生长和性腺发育状况如表1所示，产卵量和孵化率等如表2所示.

表1 大鳞鲃亲鱼的生长和性腺发育情况Tab.1 Conditions of growth and gonad of parental Barbus capito

由表1可以看出，苏北地区池塘养殖的大鳞鲃3龄时，雌性和雄性的性腺均已成熟.雌鱼的怀卵量达

到（7.54±5.35）万粒，成熟系数为11.3%；雄鱼的性腺质量也达到了（15.2±5.02）g，成熟系数为1.55%.雌鱼的体质量、全长均大于雄鱼，性腺质量更是远远超过雄鱼.

表2 大鳞鲃产卵量、受精率与孵化率Tab.2 Fecundity，fertilization rate and hatching rate of Barbus capito

由表2可以看出，3龄大鳞鲃雌鱼的受精率能够达到93.2%；孵化率达到80.6%.

2.2 仔鱼培育及生长

孵出第1天的仔鱼沉卧于水底，体色为银灰色，全长（0.69±0.07）cm，靠卵黄囊的内源性营养物质生存.第4天仔鱼上浮，此时为混合性营养，每天投喂1～2次豆浆.第4～6天时每天投喂蛋黄2～3次，投喂量1个蛋黄/10万尾.第6天仔鱼体内卵黄囊消失，此时仔鱼完成前期发育.仔鱼第7天下塘，每天泼洒豆浆2次.鱼苗下塘1周后，开始投喂人工颗粒饵料.土池培育15～20 d后，仔鱼完成乌仔发育阶段，随后进入夏花苗阶段.鱼种培育按照15尾/m2的密度进行放养.

鱼苗养殖期间的体长增加率和质量增加率如表3所示.

表3 大鳞鲃鱼苗生长情况Tab.3 Growth of Barbus capito larvae

由表3可以看出，鱼苗培养第3天时全长仅为（0.86±0.04）cm，7天时放入土池饲养，全长达到（1.06± 0.07）cm，培养第30天时全长达到了（3.28±0.13）cm，即鱼苗在培育的第1个月内全长增加了3.7倍，尤其是在后期，体长增加率和质量增加率都远远超过前期.鱼苗在1～3 d的死亡率超过10%；3～7 d的死亡率小于11.3%；7～30 d的死亡率小于12.6%.从1 d仔鱼养至30 d的夏花苗，鱼苗成活率约为66.1%.

2.3 不同体色大鳞鲃的生长

在同池鱼塘饲养条件下，大鳞鲃在继代培养中体色会出现变化，如图1和图2所示.

图1 大鳞鲃体色的比较Fig.1 Comparison of body color of Barbus capito

图2 大鳞鲃体色变异注释图Fig.2 Annotated map of body color genetic phenotypes of Barbus capito

由图1和图2可以看出，野生大鳞鲃雌鱼和雄鱼的体色有黑灰和黄色2种体色；人工繁殖的第1

代体色仍为黑灰和黄色；第2代出现了3种体色，即黑灰、黄和白色，白色为变异个体，出现率不超过群体的0.3%；第3代的1龄鱼中出现了黑灰、黄和红色3种体色，红色为变异个体，出现率不超过群体的0.3%.

3种体色大鳞鲃的生长状况如表4所示.

表4 不同体色大鳞鲃生长状况Tab.4 Growth of juveniles and broodstock of Barbus capito with different body color

由表4可以看出，1龄大鳞鲃的3种体色中，黑灰色的大鳞鲃生长状况最好，其次是黄色大鳞鲃，红色大鳞鲃的体质量和体长等方面均显著小于其他2种体色的大鳞鲃，差异具有统计学意义（P＜0.05）.4龄大鳞鲃中，白色大鳞鲃的长势最好；其次是黑灰色；黄色大鳞鲃的长势最差.

3 讨论与结论

野生大鳞鲃从国外引进后，在北京房山地区水泥池的流水中进行驯化和养殖，个体的性成熟时间为5～6 a[10-11].本研究的亲鱼全部为苏北地区纯人工繁殖的第2代大鳞鲃，在土池中养殖，个体性成熟为3 a，比野生鱼的性成熟提早2 a.由于野生鱼引进时数量有限，因此以往对大鳞鲃的研究中未出现亲鱼怀卵量的数据，也未对人工繁殖技术的关键点进行详细报道.本研究在大鳞鲃亲鱼的催产药物剂量、注射方法、孵化设备等方面进行了全面阐述.

耿龙武等[10]和徐伟等[11]的研究中，大鳞鲃仔鱼在培养的第4天开始吃食时直接下塘培育，鱼苗的成活率未做详细报道.本课题组近年来的养殖实践发现，上浮后的仔鱼应在室内继续培育，第7天下塘培育为宜.因为大鳞鲃不同于青、草、鲢、鳙4大家鱼，其亲鱼怀卵量仅为家鱼的1/10～1/5，同家鱼比较，大鳞鲃的游动缓慢，仔鱼体质弱，抗逆能力差，若过早进入池塘，成活率很低.本研究中大鳞鲃鱼苗在不同生长阶段的死亡率为：1～3 d内，＞10%；3～7 d内，＜11.3%；7～30 d内，＜12.6%.从1 d仔鱼培养至30 d的夏花苗，大鳞鲃的成活率约为66.1%，在养殖鱼类中处于偏低水平，如低于云南光唇鱼苗77.1%的成活率[12].

本课题组蔺玉华于2003年引进野生大鳞鲃1龄鱼种100尾，体色为黑灰色和黄色2种.继代养殖表明，大鳞鲃的子1代为黑灰色和黄色.鲁翠云等[13]采用微卫星标记法分析了大鳞鲃养殖群体第1代的遗传结构，发现第1代群体尚未受到选择的影响，保持了丰富的稀有等位基因，第1代群体处于中度多态性水平，PIC为0.428 1，大于0.25而小于0.50，遗传多样性较好，具备进一步生产及选育优良种质的潜力.第2代除了黑灰色和黄色外，出现了白色鱼，其数量小于的群体0.3%，3种体色鱼之间的生长状况略有差异，但不具有统计学意义（P＞0.05），白色鱼是自然选择繁殖群体的变异.第3代除了黑灰色和黄色外，还出现了红色鱼，其数量也小于群体的0.3%.通过F检验发现，红色鱼的生长指标显著低于其他2种体色的大鳞鲃，差异具有统计学意义（P＜0.05），说明遗传性状出现了退化.产生这一现象的原因可能是近亲繁殖、等位基因发生变化，也可能是杂合基因发生重组，具体原因还需要利用现代分子生物学手段进行检测和分析.

[1]尼科里斯基L B.分门鱼类学[M].北京：高等教育出版社，1958. НИКОЛЬСКИЙ L B.Appointed for Ichthyology[M].Beijing：China Higher Education Press，1958（in Chinese）.

[2]蔺玉华，王信海，耿龙武，等.大鳞鲃（Barbus capito）的含肉率及肌肉营养成分分析[J].天津师范大学学报：自然科学版，2008，28（3）：1-4．LIN Y H，WANG X H，GENG L W，et al.Analyses nutritional components and dressed fish in Barbus capito[J].Journal of Tianjin Normal University：Natural Science Edition，2008，28（3）：1-4（in Chinese）．

[3]蔺玉华，耿龙武，王信海，等．池塘驯养大鳞鲃某些生物学特性研究[J].天津师范大学学报：自然科学版，2009，29（2）：72-75．LIN Y H，GENG L W，WANG X H，et al.Some biological characteristics of Barbus capito bred in ponds[J].Journal of Tianjin Normal University：NaturalScienceEdition，2009，29（2）：72-75（inChinese）．

[4]SHAJIEE H，VOSSUGHI G H，ORYAN S，et al.Biological charac-

teristics of growth and reproduction in Barbus capito in south coasts of the Caspian Sea-Gilan Province[J].Iranian Journal of Marine Science，2002，1（4）：85-98.

[5]葛彦龙，徐伟，耿龙武.大鳞鲃鱼同工酶的研究[J].水产学杂志，2011，24（4）：59-61. GEYL，XUW，GENGLW.TheanalysisofisozymesinBarbuscapito[J]. Chinese Journal of Fisheries，2011，24（4）：59-61（in Chinese）.

[6]耿龙武，徐伟，金国雄，等.4种常用水产药物对大鳞鲃的急性毒性试验[J].江西农业大学学报，2011，33（3）：568-572. GENG L W，XU W，JIN G X，et al.Acute toxicity test of 4 common drugs on Barbus capito[J].Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis，2011，33（3）：568-572（in Chinese）.

[7]耿龙武，徐伟，李池陶，等.盐碱对大鳞鲃血清渗透压、离子含量及鳃丝Na＋/K＋-ATP酶活力的影响[J].中国水产科学，2011，18（2）：458-465. GENG L W，XU W，LI C T，et al.Influence of salinity and alkalinity on serum ion concentrations，serum osmosis and gill Na+/K+-ATPase activity of Barbus capito[J].Journal of Fishery Sciences of China，2011，18（2）：458-465（in Chinese）.

[8]徐伟，耿龙武，李池陶，等.北方寒地池养大鳞鲃生长和越冬成活[J].淡水渔业，2012，42（1）：68-71. XU W，GENG L W，LI C T，et al.The growth and overwintering survival of Barbus capito in northern China[J].Freshwater Fisheries，2012，42（1）：68-71（in Chinese）.

[9]耿龙武，徐伟，李池陶，等.大鳞鲃耗氧率和窒息点的测定[J].上海水产大学学报，2012，21（3）：363-367. GENG L W，XU W，LI C T，et al.Study on oxygen consumption rate and suffocation point of Barbus capito[J].Journal of Shanghai Fisheries University，2012，21（3）：363-367（in Chinese）.

[10]耿龙武，徐伟，蔺玉华，等.大鳞鲃人工繁育技术初报[J].吉林农业大学学报，2010，32（2）：218-220. GENG L W，XU W，LIN Y H，et al.Technique of artificial reproduction of Barbus capito[J].Journal of Jilin Agricultural University，2010，32（2）：218-220（in Chinese）.

[11]徐伟，耿龙武，李池陶，等.大鳞鲃的人工繁殖、胚胎发育和耐盐碱测定[J].水产学报，2011，35（2）：255-260. XU W，GENG L W，LI C T，et al.The artificial propagation，embryonic development and saline-alkali tolerant experiment of Barbus capito[J].Journal of Fisheries of China，2011，35（2）：255-260（in Chinese）.

[12]华泽祥，石永伦，陈俊.云南光唇鱼仔鱼暂养与苗种培育试验[J].云南农业，2014（6）：35-36. HUA Z X，SHI Y L，CHEN J.Experiment of temporary culture and seeding cultivation of Acrossocheilus yunnanensis[J].Yunnan Agriculture，2014（6）：35-36（in Chinese）.

[13]鲁翠云，耿龙武，李超程，等.微卫星标记分析大鳞鲃养殖群体的遗传结构及生长性状[J].水产学报，2013，37（8）：1121-1128. LU C Y，GENG L W，LI C C，et al.Analysis of genetic structure and growth traits in Barbus capito using microsatellite markers[J].Journal of Fisheries of China，2013，37（8）：1121-1128（in Chinese）.

（责任编校 纪翠荣）

Complete artificial propagation and analysis on variation of body color in Barbus capito

DING Chenlong，LIN Yuhua，WANG Xuanpeng，JIANG Ailan，QIN Baoli
（Suqian Institute of Agricultural Sciences，Jiangsu Academy of Agricultural Sciences，Suqian 223800，Jiangsu Province，China）

To promote the seedling propagation and germplasm resources protection of introduced Barbus capito，the complete artificial propagation of 3-year-old Barbus capito in ponds in Northern Jiangsu was conducted.The hormones adopted as oxytocin drugs included 4 μg/kg LRH-A2，2 mg/kg DOM and 1.8 mg/kg HCG.Artificial dry fertilization was used and fry incubated by incubation barrels with low speed running water.When the water temperature ranged between 23-25℃，the embryonic development took 48-70 h.The spawning of 3-year-old individual ranged from 2.81×104to 5.42×104，and the fertilization rate and hatching rate were about 93.2% and 80.6% respectively.The surviving rate was about 66.1% when the 1-dayold larvas were cultivated to be the 30-day-old summer fingerlings.After the wild Barbus capito was introduced，the phenotypes such as growth indexes and body color changed since the first generation to the third generation of the artificial propagation.The second generation（white）and third generation（red）had mutants on body color，both of which accounted for less than 0.3% of the group.The body weight，the body length and the head length of third generation appeared significant differences among individuals of three body colors（P＜0.05），i.e.black grey＞yellow＞red.

Barbus capito；artificial propagation；breeding；variation of body color

Q178.1

A

1671-1114（2016）05-0060-05

2016-03-10

江苏省农业科技自主创新资助项目（CX（15）1015）.

丁辰龙（1977—），男，副研究员，主要从事水产养殖方面的研究.

蔺玉华（1950—），女，研究员，主要从事鱼类生理和毒理方面的研究.