大网膜乳斑中肿瘤相关性巨噬细胞数量与胃癌的关系

洪良

430400湖北省武汉市新洲区中医院

大网膜乳斑中肿瘤相关性巨噬细胞数量与胃癌的关系

洪良

430400湖北省武汉市新洲区中医院

目的：探讨大网膜乳斑中肿瘤相关性巨噬细胞(TAMs)数量与胃癌的关系。方法：收治胃癌患者100例，选择同期良性胃部疾病患者100例为对照组，比较两组大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞表达情况，探讨大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞与T分期相关性。结果：不同组别大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞表达情况比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞与T分期相关性分别为-0.759(P＜0.05)，0.693(P＜0.05)。结论：大网膜乳斑中TAMsCD206+高表达及CD68+/CD206-低表达与肿瘤分期密切相关。

大网膜乳斑；肿瘤相关性巨噬细胞；胃癌

我国是胃癌高发国家，胃癌患者确诊时多处于中晚期，由于根治性手术难以达到生物学上的肿瘤根除，造成术后复发率居高不下[1]。目前有研究发现巨噬细胞在肿瘤中浸润，称为肿瘤相关性巨噬细胞(TAMs)。有研究指出TAMs与胃癌患者预后、肿瘤浸润程度等有关[2]。2013年1月-2015年2月收治胃癌患者，分析大网膜乳斑中TAMs的测定价值，现报告如下。

资料与方法

2013年1月-2015年2月选择我院胃癌患者，疾病肿瘤部位为胃窦部、胃体部、胃底贲门，分化程度为高分化、中分化、低分化，共计100例。以同期我院进行胃镜检查，诊断为良性胃部疾病的患者100例为对照组。研究组中，男49例，女51例，平均年龄(54.6±19.5)岁。对照组中，男45例，女55例，平均年龄(55.7±18.1)岁。两组性别、年龄等一般资料差异无统计学意义(P＞0.05)。

入选标准：①初次诊断为胃癌，未接受放化疗。②性别不限。③排除：合并其他恶性肿瘤者。

主要试剂及器材：①试剂：TBS缓冲液、无支原体胎牛血清、瑞氏染液、台盼蓝染料、EDTA抗原修复液、胰酶。②器材：光学显微镜、循环水浴箱、深低温冰箱、低温离心机、培养箱、流式细胞仪、全白动酶联免疫分析仪。

试验方法：①改良三步培养法制备大网膜乳斑巨噬细胞悬液。②Ficoll密度梯度离心法纯化和培养大网膜乳斑巨噬细胞。③观察大网膜乳斑巨噬细胞形态。④瑞氏染色法鉴定大网膜乳斑巨噬细胞形态。⑤免疫荧光染色鉴定大网膜乳斑CD68+巨噬细胞。⑥FCM检测大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞的表达。

观察指标：对比不同组别大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞表达情况，探讨大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞与T分期相关性。

统计学方法：采用SPSS中文版进行统计，计量资料采用t检验，采用χ2检验，P＜0.05差异有统计学意义。

结果

大网膜乳斑巨噬细胞形态：呈圆形或者椭圆形，部分细胞钝圆形突起，伸出伪足。胞核小，卵圆形，着色深，核仁不明显。

免疫荧光染色鉴定大网膜乳斑CD68+巨噬细胞：40×视野下，呈现黄绿色荧光，平均数量(16.2±1.2)个/HP。

不同组别大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞表达情况：不同组别大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞表达情况比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞与T分期相关性：大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞与T分期相关性分别为-0.759(P＜0.05)，0.693(P＜0.05)。

表1 不同组别大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞表达情况(±s)

表1 不同组别大网膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬细胞表达情况(±s)

组别 CD68+/CD206-CD206+对照组 8.26±0.16 0.15±0.21研究组(T1～3) 7.26±0.11 1.25±0.23研究组(T4) 2.63±0.35 5.43±1.58 t 5.12 5.47 P＜0.05 ＜0.05

讨论

胃癌是胃肠道最常见的恶性肿瘤，发病率及致死率高，大部分患者死于腹膜转移。到目前为止，手术仍然是胃癌首选的治疗方式，手术是胃癌患者唯一可得到治愈的选择，胃癌的手术方案要求充分切除肿瘤、淋巴结和转移可能的大网膜[3]。

有学者分析T1～3者，肿瘤未侵犯浆膜乳斑中巨噬细胞表达CD206+的M2型较少，仍以M1型为主，发展到晚期以M2型为主，高表达膜分子CD206+。还有研究指出TAMs在胃癌的发展中有双重作用。在早期TAMs激活成M1型，发挥杀肿瘤作用，手术中不建议行网膜全除术。晚期的免疫逃逸期，胃癌细胞编辑改变巨噬细胞表型，使M1型向M2型转变，乳斑成为滋养肿瘤细胞的位点，手术应该积极将其切除[4]。还有学者通过对不同分期的胃癌患者进行对比，结果发现网膜全除术只能提高T4期患者的生存期，早期胃癌患者中接受网膜部分切除者的生存期高于网膜全切者。

乳斑主要由巨噬细胞组成，有学者对18例胃癌患者进行分析，结果发现乳斑的细胞数640/个，其中巨噬细胞占有45%～48%。肿瘤聚集于网膜乳斑的机制主要有：①乳斑含有丰富血液供应；②乳斑间皮细胞内血管内皮细胞生长因子高表达[5]。

综上所述，本文认为大网膜乳斑中TAMsCD206+高表达及CD68+/CD206-低表达与肿瘤分期密切相关。

[1]李继承.人与小鼠腹膜乳斑的研究[J].解剖学报,2014,27(1):88-91.

[2]吴霞.肿瘤免疫编辑[J].现代免疫学,2012,4 (6):518-521.

[3]安伟德,胡祥,梁品,等.腹膜乳斑与胃癌细胞在腹膜播散中的关系[J].中国胃肠外科杂志,2000,3(3):172-174.

[4]Dunn GP,Bruce AT,Ikeda H,et al.Cancer immunoediting:from immunosurveillance to tummorescape[J].Nat Immunol,2012,3(11):991-998.

[5]HagiwaraA,TakahashiT,SaiaiK,et al.Milky spots astheim-plantationsite for malignant cells in peritoneal dissemination in mice[J]. Cancer Res,2014,53(3):687-692.

Relationship between tumor associated macrophages and gastric cancer in the greater omentum milky spot

Hong Liang
The Traditional Chinese Medicine Hospital of Xinzhou District,Wuhan City,Hubei Province 430400

Objective:To explore the relationship between tumor associated macrophages(TAMs)and gastric cancer in the greater omentum milky spot.Methods:100 patients with gastric cancer were selected.100 patients with benign gastric disease were selected as the control group.We compared the expression of greater omentum milky spot CD68+/CD206-and CD206+macrophages of the two groups,and investigated the correlation between the greater omentum milky spot CD68+/CD206-and CD206+macrophages and the T stage.Results:In different groups,the expression of greater omentum milky spot CD68+/CD206-and CD206+macrophages were different(P＜0.05).The correlation between the greater omentum milky spot CD68+/CD206-and CD206+macrophages and the T stage was-0.759(P＜0.05),0.693(P＜0.05).Conclusion:The high expression of TAMs CD206+and low expression of CD68+/CD206-in the greater omentum milky spot were closely related with tumor stage.

Greater omentum milky spot;Tumor associated macrophages;Gastric cancer

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.3.68