HPLC测定蒙药阿如健脾散中没食子酸的含量Δ

萨仁格日乐 朝 鲁 陈红梅 奥·乌力吉 王秀兰

(1．内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028041;2．内蒙古蒙医药工程技术研究院，内蒙古 通辽 028041；3．新疆博州蒙医医院，新疆 博乐 833400;4．内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古 通辽 028041)

HPLC测定蒙药阿如健脾散中没食子酸的含量Δ

萨仁格日乐1,2朝 鲁3陈红梅1奥·乌力吉2,4王秀兰2,4

(1．内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028041;2．内蒙古蒙医药工程技术研究院，内蒙古 通辽 028041；3．新疆博州蒙医医院，新疆 博乐 833400;4．内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古 通辽 028041)

目的：建立高效液相法测定蒙药阿如健脾散没食子酸含量的方法，为建立该药物的质量标准提供科学方法。方法：采用Inertsil-ODS-35um(250L×4.6)色谱柱，甲醇-水-乙腈-磷酸(20：480：10：2.5)为流动相，流速1mL/min，柱温25℃，在273nm处测定蒙药阿如健脾散中没食子酸的含量。结果：没食子酸线性范围为60～600μg，r=0.998，平均加样回收率为98.86%，RSD=0.74%；结论：本方法简便快速、准确可靠，为该制剂的质量标准制定提供可靠依据。

HPLC法；蒙药阿如健脾散；没食子酸

蒙药阿如健脾散由诃子、五灵脂、寒水石(制)、土木香、胡黄连等5味药组成的传统蒙药制剂。具有健脾和胃，理气镇痛功效，主要用于“赫依协日”、“宝日”、“巴达干”病引起的胃腕胀满，上腹疼痛诸症[1-2]。本文中笔者以诃子中主要成分没食子酸为指标，采用HPLC法测定其含量，为建立该药物的质量标准提供科学方法。

1 仪器与材料

1.1 仪器：LC-20A型高效液相色谱仪(日本岛津)；SPD-20A型检测器；KQ-100型超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限公司)；AUX220型电子天(Max220gd=0.01mg)(日本岛津)。

1.2 试药：三批阿如健脾散：内蒙古民族大学附属医院蒙药制剂室(20160409，20160410，20160411)；没食子酸对照品()110831-201605：中国药品生物制品检定所，批号110713-200708；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余溶剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件[3]：LC-20AT泵，SPD-20A检测器，SIL-20A全自动进样器，Labsoiution工作站；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的Inertsil-ODS色谱柱(250mm*4.6)；流动相：甲醇：水：乙腈-磷酸(4：96：0.2：0.05)，流速1.0mL/min；柱温25℃；检测波长273nm；理论板数3000以上。

2.2 标准曲线的制备：精密称取没食子酸对照品适量，加甲醇制成每1mL含60ug的溶液。精密吸取没食子酸对照品溶液1.0μL、2.0μL、4.0μL、6.0μL、8.0μL、10.0μL进样，测定其峰面积。按峰面积积分值对浓度进行线型回归计算，得标准曲线回归方程为A=58156C-40977,R=0.998。结果表明没食子酸在60～600μg范围内呈良好的线性关系，结果见表1。

表1 没食子酸进样量(μg)与峰面积(A)的关系

2.3 空白干扰实验：按阿如健脾散处方比例称取除诃子以外的其它药材适量，依照供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液，在相同的色谱条件下测定，阴性对照溶液在没食子酸出峰位置上无干扰。结果见图1～3。

图1 没食子酸对照品色谱图

图2 阴性对照品色谱图 图3 阿如健脾散色谱图

2.4 精密度实验：取浓度为60μg/mL的对照品溶液及样品液各1μL，分别进样，重复5次测定峰面积。结果为对照品RSD=0.57%，样品RSD=1.11%。

2.5 重复性实验：取同一批号样品5份，按样品测定项下方法制备和测定，其RSD=1.05%。

2.6 回收率试验：精密称取已知没食子酸的样品5份，分别加入一定量的没食子酸对照品，按供试品处理方法处理后进样1μL测定，计算没食子酸回收率，结果见表2。

表2 样品回收率试验结果

3 供试品溶液的制备和测定[4]

3.1 供试品溶液的制备：称取3个批号阿如健脾散约粉末1.50g，精密称定，置加甲醇具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，过滤，加甲醇定容至50mL，摇匀，即得。

3.2 供试品溶液的测定：精密吸取供试品液1μL，注入液相色谱仪，测定峰面积，计算含量，结果见表3。

表3 阿如健脾散中没食子酸的含量(n=3)

4 讨论

诃子为阿如健脾散中的主药之一，占组方的40.0%，没食子酸为其主要活性成分之一。本文分别以水：甲醇：冰醋酸及甲醇：水：乙腈-磷酸为流动相，采用HPLC法测定没食子酸的含量，结果甲醇：水：乙腈-磷酸较好的分离效果较好，因此选定该流动相进行含量测定。实验表明本方法简便易行，重现性好，为建立该药物的质量标准研究奠定了良好基础。

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准(蒙药分册)[S]．1998：149.

[2]内蒙古自治区卫生厅.内蒙古蒙成药标准[S]．1984：337.

[3]内蒙古自治区食品药品监督管理局.内蒙古蒙药制剂规范注释(2007年版；第一册下)[S]．呼和浩特：内蒙古人民出版社，2007:125.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M]．北京：中国医药科技出版社，2015：1363.

2016年12月22日收稿

内蒙古蒙医药科技重大专项项目子课题(GLY20150710)

萨仁格日乐(1968.9-)内蒙古通辽科左后旗人，内蒙古民族大学附属医院工作， 主任蒙药师，从事蒙药制剂及质量标准研究。

R291.2

B

1006-6810(2017)04-0042-02