磷酸甘油酸变位酶-1在不同分型前列腺炎患者睾丸组织中的表达及临床意义

黄敏玉， 黄 群， 吴 军， 孟冬冬， 覃天资， 龙 毅

(右江民族医学院附属医院泌尿外科， 广西 百色 533000)

磷酸甘油酸变位酶-1在不同分型前列腺炎患者睾丸组织中的表达及临床意义

黄敏玉， 黄 群， 吴 军， 孟冬冬， 覃天资， 龙 毅

(右江民族医学院附属医院泌尿外科， 广西 百色 533000)

目的：观察磷酸甘油酸变位酶-1(PGAM1)在不同分型前列腺炎患者睾丸组织中的表达差异，并分析PGAM1表达检测的临床意义。方法：收集Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者和健康体检人群的睾丸组织标本，采用免疫组化检测PGAM1表达水平，分析不同分型前列腺炎患者PGAM1表达差异，并分析PGAM1表达与生精功能指标卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮水平的关系。结果：Ⅰ型前列腺炎患者睾丸组织标本PGAM1表达与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者睾丸组织标本PGAM1表达与健康体检人群比较有显著差异性(P<0.05)；Ⅰ型前列腺炎患者中PGAM1低表达者的卵泡刺激素、黄体生成素、T激素水平与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)，但Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者中PGAM1低表达者的卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮水平与健康体检人群比较有显著差异性(P<0.05)。结论：除Ⅰ型前列腺炎患者外，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者PGAM1呈异常的低表达，而PGAM1呈异常的低表达对患者睾丸组织生精功能产生影响，因此PGAM1检测在前列腺炎患者病情及生精功能障碍诊断中具有一定的临床价值。

磷酸甘油酸变位酶-1； 前列腺炎； 生精功能

磷酸甘油酸变位酶-1(PGAM1)作为变位酶家族的一种关键酶，在机体糖酵解反应中起到关键性的作用[1]。当前已有研究证实PGAM1在人体脑、肝、肾、睾丸等组织内可正常表达，而其异常表达可诱导这些人体组织发生癌变[2～4]。另外学者张守波[5]研究发现PGAM1异常低表达与人体睾丸老化密切相关，且参与人体睾丸的支持细胞糖酵解反应，从而对睾丸组织生精功能产生影响。鉴于前列腺炎是男性生殖系统常见疾病，且与男性睾丸组织生精功能激素分泌密切相关，因此本研究收集我院收集Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者和健康体检人群的睾丸组织标本，观察磷酸甘油酸变位酶-1(PGAM1)在不同分型前列腺炎患者睾丸组织中的表达差异，并分析PGAM1表达检测的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料：经医院伦委会同意，收集我院近1年期间(2016年1～12月)前列腺炎患者和健康体检人群的睾丸组织标本。纳入标准：①入院后患者均经病理诊断为前列腺炎；②患者同意参与研究，且签定知情同意书；③患者均行性激素六项检查，且资料完整；④患者患前列腺炎前无性功能障碍、无精子症或少精子症。按上述标准共入选123例前列腺炎患者和40例健康体检人群的睾丸组织标本。参照美国国立卫生研究院的相关前列腺炎分型标准[6]，将123例前列腺炎患者分为Ⅰ型(急性前列腺炎)、Ⅱ型(慢性细菌性前列腺炎)、Ⅲ型(慢性盆腔疼痛性前列腺炎)、Ⅳ型(无症状性前列腺炎)前列腺炎患者，其中Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者分别为40例、42例、38例、43例，上述五组一般资料比较无显著差异性(P>0.05)。

1.2 研究方法：以入选睾丸组织标本PGAM1表达水平以及患者生精功能指标(卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮)作为观察指标。生精功能指标来自患者就诊时性激素六项检查，采用免疫组化检测PGAM1表达水平。分析不同分型前列腺炎患者PGAM1表达差异，并分析PGAM1表达与生精功能指标卵泡刺激素、黄体生成素、T激素水平的关系。

1.3 PGAM1检测及判定标准：免疫组化PGAM1表达检测：所有入选睾丸组织标本均经常规脱水、组织包埋、切片等处理后，置于PGAM1抗体(1:200)以室温孵育2h，再进一步洗片后加入二抗再室温孵育1h。以DAB显色5min，然后以苏木素复染1min，然后中性树胶封片。免疫组化结果判定[7]：参照美国国立卫生研究院制定的标准，以免疫组化PGAM1检测阳性强度与阳性细胞百分比两项评分乘积值来判定，健康人群正常PGAM1表达评分值为7分，低于7分为低表达，高于7分为高表达。①阳性强度评分：按细胞染色强度判定，无色、淡黄色、棕黄色、棕褐色分别计为0分、1分、2分、3分。②阳性细胞百分比评分：百分比≤25%、25%<百分比≤50%、50%<百分比≤75%、百分比>75%分别计为0分、1分、2分、3分。

1.4 统计学方法：采用SPSS20.0进行数据分析。卵泡刺激素、黄体生成素、T激素等计量资料以均数±标准差表示，采用组间t检验分析差异。PGAM1表达例数等计数资料采用百分比表示，采用组间χ2检验分析差异。若P<0.05，则表示组间比较差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 不同分型前列腺炎患者PGAM1表达差异比较：免疫组化检测结果可知，不同分型前列腺炎患者PGAM1高表达主要存在于睾丸组织生精小管中(图1A)，而在睾丸组织间质细胞中无明显高表达。同时不同分型前列腺炎患者PGAM1高表达主要存在于生精小管精原细胞(图1B)，精母细胞(图1C)和细胞胞质(图1D)中。Ⅰ型前列腺炎患者睾丸组织标本PGAM1表达与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者睾丸组织标本PGAM1表达与健康体检人群比较有显著差异性(P<0.05)，见表1。

表1 不同分型前列腺炎患者PGAM1表达差异比较n(%)

注：与健康体检人群比较，*P<0.05

图1 不同分型前列腺炎患者PGAM1表达的免疫检测结果(×40)

注：A：前列腺炎患者生精小管中的PGAM1表达的免疫检测结果；B：前列腺炎患者精原细胞中的PGAM1表达的免疫检测结果；C：前列腺炎患者精母细胞中的PGAM1表达的免疫检测结果；D：前列腺炎患者细胞胞质中的PGAM1表达的免疫检测结果

2.2 不同分型前列腺炎患者PGAM1表达与卵泡刺激素水平的关系分析：Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者中的睾丸组织标本PGAM1高表达者的卵泡刺激素水平与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)。Ⅰ型前列腺炎患者中的睾丸组织标本PGAM1低表达者的卵泡刺激素水平与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)，但Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者中的睾丸组织标本PGAM1表达者的卵泡刺激素水平与健康体检人群比较有显著差异性(P<0.05)，见表2。

表2 不同分型前列腺炎患者PGAM1表达与卵泡刺激素水平的关系±s)

注：与健康体检人群比较，*P<0.05

表3 不同分型前列腺炎患者PGAM1表达与黄体生成素水平的关系±s)

注：与健康体检人群比较，*P<0.05

表4 不同分型前列腺炎患者PGAM1表达与睾酮水平的关系±s)

注：与健康体检人群比较，*P<0.05

2.3 不同分型前列腺炎患者PGAM1表达与黄体生成素水平的关系分析：Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者中的睾丸组织标本PGAM1高表达者的黄体生成素水平与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)。Ⅰ型前列腺炎患者中的睾丸组织标本PGAM1低表达者的黄体生成素水平与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)，但Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者中的睾丸组织标本PGAM1表达者的黄体生成素水平与健康体检人群比较有显著差异性(P<0.05)，见表3。

2.4 不同分型前列腺炎患者PGAM1表达与睾酮水平的关系分析：Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者中的睾丸组织标本PGAM1高表达者的睾酮水平与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)。Ⅰ型前列腺炎患者中的睾丸组织标本PGAM1低表达者的睾酮水平与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)，但Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者中的睾丸组织标本PGAM1表达者的睾酮与健康体检人群比较有显著差异性(P<0.05)，见表4。

3 讨 论

在男性不育因素中，生精功能障碍是其中最重要的因素，约占全部男性不育因素的50%左右[8]。而男性生精功能障碍除与生殖器内分泌、生殖器创伤、生殖器发育等因素相关外，亦与前列腺炎对患者睾丸组织生精功能激素分泌相关[9]。国外研究，在Ⅰ型(急性前列腺炎)、Ⅱ型(慢性细菌性前列腺炎)、Ⅲ型(慢性盆腔疼痛性前列腺炎)、Ⅳ型(无症状性前列腺炎)前列腺炎患者的多次重复睾丸取精术中，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者的取精成功率明显低于Ⅰ型前列腺炎患者和健康人群，其原因在于Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎为慢性或无症状前列腺炎症，作用时间较长，从而对患者生精功能相关基因PGAM1表达产生影响[10～12]。

本研究不同分型前列腺炎患者睾丸组织PGAM1表达免疫组化检测结果表明，Ⅰ型前列腺炎患者睾丸组织标本PGAM1表达与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者睾丸组织标本PGAM1表达与健康体检人群比较有显著差异性(P<0.05)。提示，PGAM1异常表达异常与前列腺炎病密切相关。且不同分型前列腺炎患者PGAM1高表达主要存在于睾丸组织生精小管中，而在睾丸组织间质细胞中无明显高表达，同时不同分型前列腺炎患者PGAM1高表达主要存在于生精小管精原细胞，精母细胞和细胞胞质中，提示PGAM1高表达与男性睾丸组织生精过程密切相关。上述研究结果证实了学者John.A[13]的研究结果：PGAM1参与男性睾丸组织生精细胞分化、形成过程。Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎导致PGAM1呈异常的低表达，可能与Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎均是慢性或无症状前列腺炎症，作用时间较长，从而对患者生精功能相关基因PGAM1表达产生影响有关，而PGAM1低表达抑制慢性前列腺患者的糖代谢活动，从而对睾丸组织内生精细胞分化、形成过程产生影响[14,15]。

相关研究证实，睾丸组织一些激素水平与睾丸组织的生精功能密切相关，刘柳等[16]研究显示，生精功能障碍男性的卵泡刺激素和黄体生成素表达水平显著高于正常健康男性，而睾酮水平则显著低于正常健康男性。江凡等[17]发现，无精症生精功能障碍男性的卵泡刺激素和黄体生成素表达水平也高于正常健康男性，同时睾酮水平也显著低于正常健康男性。同时亦有国外研究发现，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者的卵泡刺激素和黄体生成素表达水平低于正常健康男性，睾酮水平显著低于正常健康男性[18]。综合上述学者研究结果，本研究尝试分析了不同分型前列腺患者PGAM1表达异常与生精功相关激素的相关性。结果证实，Ⅰ型前列腺炎患者中PGAM1低表达者的卵泡刺激素、黄体生成素、T激素水平与健康体检人群比较无显著差异性(P>0.05)，但Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者中PGAM1低表达者的卵泡刺激素、黄体生成素、睾酮水平与健康体检人群比较有显著差异性(P<0.05)。提示，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者生精功能障碍与患者PGAM1低表达导致卵泡刺激素、黄体生成素、T激素等生精功能激素表达异常密切相关[19,20]。因此，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎PGAM1表达检测在诊断前列腺炎患者生精功能障碍中有一定的临床价值。

综上所述，除Ⅰ型前列腺炎患者外，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型前列腺炎患者PGAM1呈异常的低表达，而PGAM1呈异常的低表达对患者睾丸组织生精功能产生影响，因此PGAM1检测在前列腺炎患者病情及生精功能障碍诊断中具有一定的临床价值。

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The Clinical Significance and Expression of Phosphoglycerate Mutase-1 in the Testis Tissues of Patients with Different Types of Prostatitis

HUANGMinyu,HUANGQun,WUJun,etal

(TheAffiliatedHospitalofYoujiangMedicalCollege,GuangxiZhuangAutonomousRegion,GuangxiBaise533000,China)

Objective:To observe the phosphoglycerate mutase (PGAM1)-1 expression in testicular tissue of patients with different types of prostatitis, to analyze the clinical significance of detecting PGAM1 expression. Methods: Type I,II,III and IV prostatitis patients and healthy population of the testicular tissue specimens were collected. The level of PGAM1 expression was detected by immunohistochemical. The difference of PGAM1 expression in patients with different types of prostatitis was analyzed. The relationship between the expression of PGAM1 and the levels of follicle stimulating hormone, luteinizing hormone and testosterone was analyzed. Results: There was no significant difference in the expression of PGAM1 in the testis tissue of patients with typeⅠ(P>0.05). The expression of PGAM1 in testis tissues of patients with type II, III and IV prostatitis was significantly different from that in healthy people (P<0.05). There was no significant difference in the levels of follicle stimulating hormone, luteinizing hormone (LH) and T hormone (P>0.05) in patients with type Ⅰ prostatitis (PGAM1). However, there were significant differences in the levels of follicle stimulating hormone, luteinizing hormone and testosterone in patients with type PGAM1, type III and type IV prostatitis (P<0.05). Conclusion: In addition to the patients with type Ⅰ prostatitis, the expression of PGAM1 of patients with type II, III and IV prostatitis was lower. The abnormal expression of PGAM1 had an effect on spermatogenesis in patients with testicular tissue. Therefore, the detection of PGAM1 has a certain clinical value in the diagnosis of patients with prostatitis.

Phosphoglyceromutase-1; Prostatitis; Spermatogenic function

1006-6233(2017)05-0719-05

广西壮族自治区百色市科学研究与技术开发计划项目，(编号：20160615)；广西壮族自治区卫生厅重点科研课题，(编号：重2012082)

A

10.3969/j.issn.1006-6233.2017.05.005