妥布霉素口服液的制备及质量控制

孙庆玲

摘 要：本文制备妥布霉素口服液并研究其质量标准。采用高校液相测定了妥布霉素口服液中妥布霉素的含量，固定相为USA Agilent ZORBAXSB-C18柱（5μm，4.6mm×150mm），流动相为0.1mol·L-1三氟乙酸溶液；雾化管温度40℃，漂移管温度80℃，载气压力0.35MPa；流速1.0mL·min-1。妥布霉素对照品在50～900μg/ml范围内线性关系良好，呈良好的线性关系。妥布霉素的平均回收率为99.5%，RSD为0.91% （n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于妥布霉素口服液的质量控制。

关键词：妥布霉素口服液；制备；质量控制

妥布霉素中文别名安欣、抗普霉素、托霉素等，英文别名Brulamycin、Gernebcin、NebramycinFactor6、Obracin、Tobradistin。妥布霉素对革兰阴性菌特别是对绿脓杆菌具有高效，其作用为庆大霉素强2～4倍。妥布霉素适用于绿脓杆菌、大肠杆菌、克雷伯菌属、沙雷菌属及葡萄球菌（包括耐青霉素G与耐甲氧西林菌株）所致的新生儿脓毒症、败血症、胆道感染、腹腔感染（及腹膜炎）、骨骼感染、急性與皮肤、软组织感染（包括烧伤）、慢性中耳炎、鼻窦炎等。本文制备妥布霉素口服液并研究其质量标准。

1 仪器与试药

ZJ/FL2200高效液相色谱仪（等度）（北京中西远大科技有限公司）；HT/GDSJ-225北京交变高低温湿热试验箱（北京恒泰丰科试验设备有限公司）； 蒸发光散射检测器（北京恒奥德仪器仪表有限公司）；DBT-IV-20 DBT-IV-20高端型超纯水机（杜伯特（北京）科技有限公司）； 高低温试验箱（浙江巨为仪器股份有限公司）；超声波清洗机（上海柯祁仪器设备有限公司）；RS-EA十万分之一电子天平（上海睿珊电子科技有限公司）。自制妥布霉素口服液批号为180101，180102，180103。妥布霉素对照品（中国药品生物制品检定所提供）。乙腈（天津市康科德科技有限公司）、（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、甲醇（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、三乙胺（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、三氟乙酸（北京市津同乐泰化工产品有限公司）、醋酸（北京市津同乐泰化工产品有限公司）。

2 制备妥布霉素口服液

取妥布霉素，加入防腐剂等，调节pH至5.8，加纯化水定容至300L，滤过，灌封，灭菌，即得妥布霉素口服液。

3 质量控制

3.1 性状本品为无色液体，味甜

3.2 色谱条件

色谱柱为USA Agilent ZORBAXSB-C18柱（规格4.6mm×150mm，5μm）；流动相为0.1mol·L-1三氟乙酸溶液；雾化管温度40℃，漂移管温度80℃，载气压力0.35MPa；流速1.0mL·min-1；柱温：30℃[1-6]。

3.3 提取溶媒的选择

在供试品溶液制备中，分别选用了水、20%甲醇、甲醇进行超声提取，结果表明20%甲醇分离效果、峰形及含量均为最好，所以选择20%甲醇进行超声提取。

3.4 供试品溶液的制备

取妥布霉素口服液适量，精密量取1ml，置10mL量瓶中，加20%甲醇适量，超声处理20min使溶解，放置至室温，加20%甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。

3.5 对照品溶液的制备

精密称取妥布霉素对照品约20mg，置50mL容量瓶中，用20%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5mL至10mL容量瓶中，用20%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液中含妥布霉素200.0μg）。

3.6 阴性干扰试验

在处方中去妥布霉素，按方中比例和制备工艺方法制成阴性制剂，用供试品溶液制备的方法，制成阴性对照溶液，用以上选定的测定条件进行吸收曲线绘制，观察在与妥布霉素相同的保留时间处是否存在吸收峰，结果表明：在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与妥布霉素相同保留时间处不存在吸收峰，因此说明选定的条件测定妥布霉素无干扰，具有较强的专属性。

3.7 标准曲线的制备

将浓度为50μg/ml，100μg/ml，300μg/ml，500μg/ml，700μg/ml，800μg/ml，900μg/ml的对照品溶液分别吸取20μL注入HPLC，以进样量（μg）为横坐标，峰面积积分值A为纵坐标，绘制标准曲线。试验表明，妥布霉素对照品在50～900μg/ml范围内线性关系良好。

3.8 精密度试验

精密吸取妥布霉素对照品溶液重复进样5次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.98%。

3.9 重现性试验

分别称取同批妥布霉素口服液样品6份，按质量标准含量测定项下方法测定含量，并计算样品的RSD值为0.67%，此含量测定方法的重现性良好。

3.10 稳定性试验

取同一对照品溶液与同一供试品溶液，分别在0，4，8进样测定，样品溶液的稳定性实验表明，室温下8h内测定峰面积基本一致；将样品置棕色试剂瓶内，于4℃冷藏放置，24h内测定峰面积基本一致。

3.11 回收率试验

采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分别精密添加一定量的妥布霉素对照品，按供试品制备所述方法测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.5%，RSD为0.91%。

3.12 含量限度的确定

按本品质量标准含量测定项下方法，测定了三批样品，结果表明，样品中妥布霉素的含量差异，含量为标示量的95-105%。

4 讨论

分别考察甲醇-水-三乙胺（25∶75：0.1），甲醇-0.1mol·L-1三氟乙酸溶液（5∶95），甲醇-0.1mol·L-1三氟乙酸溶液（2∶98），甲醇-2%醋酸水溶液（18∶82），0.1mol·L-1三氟乙酸溶液不同比例的流动相，结果以0.1mol·L-1三氟乙酸溶液为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用0.1mol·L-1三氟乙酸溶液为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于妥布霉素口服液的质量控制；本制剂稳定可靠。

参考文献

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