发酵饲料替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用

李玉侠，舒丹平，张晓杰，刘化伟，朱海洋

（ 1.哈尔滨远大牧业有限公司，哈尔滨 150060；2.深圳市金新农科技股份有限公司，深圳 518106；3.长春金新农饲料有限公司，长春 130102）

近年来抗生素滥用现象越来越严重，国家对饲料行业的抗生素使用的管理也逐年严格。2017年4月硫酸粘杆菌素禁止在猪饲料中使用，标志着以促生长功能添加，无抗时代正在来临，对于可替代抗生素产品的研究迫在眉睫。发酵饲料作为抗生素的替代品在猪饲养应用研究较少，但相关研究均表明其替代抗生素是可行的，本文旨在通过发酵饲料替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用以研究其替代抗生素的具体方式，从而指导生产，为抗生素替代品的研发提供一种新的尝试。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验菌种：粪肠球菌（潍坊康地恩生物科技有限公司），枯草芽孢杆菌（广州市华元生物科技有限公司），啤酒酵母菌（东方兽药有限公司）。

1.2 试验设计

将150头体重约7 kg断奶仔猪（杜×长×大三元杂交猪）按体重大小随机分为15栏，每栏10头。分成3个处理组，每个处理组5个重复，每栏为一个重复，分别为发酵饲料组、抗生素组及对照组，饲养45 d。对照组：基础日粮；发酵饲料组：20%取代玉米豆粕（干物质计）；抗生素组：恩拉霉素20 mg·kg-1饲料。

1.3 试验饲粮

对照组饲粮营养水平参考NRC（2012）仔猪营养需要配制，对照组饲粮组成及营养水平见表1。按照对照组的玉米-豆粕型日粮按比例粉碎混合均匀，取100 kg，料水比1：1，芽孢杆菌和酵母菌的接种量为3%，乳酸菌接种量为2%，同玉米-豆粕型日粮混合均匀，填入到塑料桶中，表层用塑料薄膜密封，发酵温度为37℃，发酵时间为72 h，之后即可作为发酵饲料添加使用[1]。发酵饲料组营养为对照组饲粮中的20%玉米、豆粕进行发酵后替代相应比例原料，抗生素组营养为基础饲粮中添加（有效成分计）恩拉霉素20 mg·kg-1[2-3]。

1.4 饲养管理

试验在哈尔滨远大种猪场进行，试验前猪舍清洗消毒。按照仔猪常规管理办法进行管理，试验猪只断奶后饲养45 d试验结束。每日饲喂4次，自由采食、饮水。所有试验猪均饲养于同一栋猪舍内，各组之间相互隔开，并保证向阳面与背阳面每组栏数相等，以控制环境因素一致。

1.5 检测指标与方法

1.5.1 平均日增重

在试验开始前和试验结束后早上逐栏进行空腹称重，记录总重和均重，计算公式见式1～3。

表1 基础饲粮组成及营养水平DM

1.5.2 平均日采食量

准确记录每栏猪每天投喂量，计算公式见式4。

1.5.3 料肉比

料肉比计算公式见式5。

1.5.4 腹泻率和发病率

腹泻率和发病率计算公式见式6～7。腹泄判断标准依据为拉稀不成形状判断为腹泻。发病判断标准的依据为发病情况严重，有明显症状，需要打针用药等处理。

1.5.5 血液采集及分析

试验结束后每栏随机选3头，用真空促凝管进行前腔静脉采血获取血清后，立即置于冰盒中，5 000 r·min-1离心，取上清于新的1.5 mL离心管中，冷冻保藏，用于测定血清各指标。血清生理生化指标及免疫指标委托哈尔滨医大第一附属医院进行检测。

1.5.6 粪便采集

试验结束前，每日9:00在猪进食后2 h采集新鲜粪便放入编号的自封袋中，并加入10%盐酸，置于-20℃冷冻保藏，用以测定表观消化率。

1.5.7 饲料样品采集

取试验组和对照组饲料，放置于无菌封口袋中，置于-20℃保存，用于测定饲料中的pH、水分、粗蛋白质、铬含量、菌数等指标。

1.5.8 饲料中铬含量的测定方法

饲料中铬含量的测定采用二苯碳酰二肼比色法进行测定。

准确称取经过烘干、研磨的蛋白质0.1～0.2 g于250 mL三角瓶中，加入10 mL浓硝酸，放置过夜；电热板120℃加热至近干，取下冷却；分两次加入30%的双氧水5 mL，在电热板上加热至溶液无色，蒸干；取下加入水与三角瓶，用氨水（1/1）和浓硫酸（1/3）将pH调至中性；加0.5 mL硫酸（1/3）和0.5 mL磷酸（1/3）溶液，摇匀，加入一滴高锰酸钾（2%）溶液，然后煮沸10 min，如果紫红色退去，立即补加高锰酸钾溶液使其保持紫红色；取下加入20%尿素溶液1 mL，摇匀，滴加2%的亚硝酸钠溶液，至紫色刚好褪去；待气泡逸尽，过滤后转移到比色管，稀释至25 mL，加入1 mL显色剂立即摇匀，10 min后于540 nm处比色；标准曲线的绘制，铬储备液（1 mg·mL-1）的配制：称取2.8 289 g预先经150℃烘干1 h的重铬酸钾于250 mL烧杯中充分溶解后移入1 L容量瓶中，加水至刻度后混匀。

铬标准液（10.0 μg·mL-1）的配制：移取10 mL铬储备液于1 L容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液1 mL含10 μg铬。

分别于一组25 mL的比色管中分别加入三氧化二 铬 标 准 溶 液 0、 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、9 mL，加硫酸 0.5 mL（1/3），磷酸 0.5 mL（1/3）稀释至25 mL，加入显色剂立即摇匀，10 min后于540 nm处以水为参比进行比色，以吸光度为纵坐标，Cr2O3含量为横坐标，绘制工作曲线。

1.6 统计分析

试验数据采用SPSS 20.0软件One Way ANOVA进行统计分析，并进行Duncan's多重比较，结果以“平均值±标准误”表示。

2 试验结果

2.1 生长性能

发酵饲料对猪生长性能的影响见表2。

由表2可知，各试验组猪初始体重、平均日采食量无显著差异。抗生素组各项生长指标与对照组相比无显著差异。发酵饲料组的结束体重和平均日增重显著高于对照组，料肉比显著低于对照组（P＜0.05）。试验组与对照组相比，腹泻率明显减少，其中发酵饲料组腹泄率降低了52.7%，抗生素组降低了36.4%，但对于猪的发病率影响作用不大。

表2 发酵饲料对猪生长性能的影响

2.2 血清生化指标

发酵饲料对猪血清生化及免疫指标的影响见表3。

血液指标可以反映出动物体的健康状况和营养代谢状况。由表3可知试验组猪的IgG和IgM均高于对照组，但差异不显著（P＜0.05），抗生素组血糖含量显著低于对照组（P＜0.05），发酵饲料组血清球蛋白、尿素氮显著高于对照组（P＜0.05）。

2.3 粗蛋白质表观消化率

发酵饲料对猪粗蛋白质表观消化率的影响见表4。

通过饲料中粗蛋白质含量的分析，可知饲喂发酵饲料可略微提高饲料的粗蛋白质含量。由表4可见，发酵饲料组和抗生素组的粗蛋白表观消化率均比对照组高，分别提高3.7%和2.58%，但差异不显著（P＞0.05），发酵饲料组比抗生素组提高更多。

表3 各处理组对试验猪血清生化及免疫指标的影响

表4 各处理组对试验猪粗蛋白表观消化率的影响%

3 讨论

从试验结果可知，无论是生长性能、日采食量、腹泻率还是表观消化率，发酵饲料组都优于抗生素组。这可能与饲料中的益生菌数量有关[4-5]。

球蛋白可以反映机体的抵抗力水平[6]。从血清生化指标结果可知，发酵饲料组的猪血清中球蛋白和抗体（IgG和IgM）的含量均高于对照组，表明饲喂发酵饲料在一定程度上可以提高猪的免疫能力[7]。

血清中的尿素氮浓度可以比较准确地反映动物体内氨基酸和蛋白质代谢之间的平衡状况[8]。研究表明，日粮中的含氮物质增加，机体的氨基酸代谢随之加强，血清中的尿素无法排出时则血清尿素氮浓度增高[9]。血清中尿素氮含量升高表明蛋白质分解代谢增强[10]。试验可知发酵饲料组血清尿素氮显著高于对照组（P＜0.05），表明发酵饲料组猪的分解代谢增强。

血糖为血液中的糖分，绝大多数情况下都是葡萄糖，血糖含量降低（在生理正常值范围内）则表示肠道对于葡萄糖的消化吸收能力有所减弱[11]。由试验数据可知抗生素组猪血糖含量显著低于对照组（P＜0.05），表明饲喂抗生素会影响猪对于葡萄糖的吸收。

4 结论

饲喂发酵饲料可以提高断奶仔猪的生长性能和消化能力，降低猪的腹泻率和料肉比，增强猪健康状况。本试验研究表明，发酵饲料组血清尿素氮显著高于对照组，表明猪的分解代谢增强。发酵饲料组的血清中的IgG、IgM、球蛋白的含量高于对照组，表明发酵饲料在一定程度上可以提高猪的免疫能力。

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