外周血内基质金属蛋白酶-7、糖类抗原242在直肠癌诊断及术后评估中的价值

于海涛 曲义坤 于海波 赵 斌 李 晶 赵晓莲

(佳木斯大学第一附属医院,黑龙江 佳木斯 154002)

一般根治性手术切除是治疗直肠癌的主要手段，但手术只能切除局部肿瘤病灶，但清除不了血液里的癌细胞即残癌，术后极容易转移和复发。而提高直肠癌生存率的关键在于早期预测、早期发现、早期诊断与早期治疗〔1〕。因此，寻找有效的早期诊断标志物是提高患者生存率的重要手段。近年来，以糖类抗原(CA)、癌胚抗原为代表的肿瘤标志物以其高效、无创的特点，在直肠癌的早期诊断及术后评估中受到广泛关注和应用〔2〕。由肿瘤细胞产生的基质金属蛋白酶(MMP)-7具有灭活丝氨酸蛋白酶抑制剂及活化其他MMPs成员的作用。CA242 是一种黏蛋白型唾液酸化糖脂类抗原，一般多见于胰腺、卵巢、大肠组织的恶性肿瘤中，是近年来应用于临床较新的一种肿瘤标志物。通常单个标记物的敏感性或特异性往往偏低，不能满足临床要求，本研究联合检测外周血血清MMP-7、CA242的表达水平，分析其在直肠癌诊断中作用。

1 资料与方法

1.1一般资料 佳木斯大学第一附属医院肛肠外科2016年1～8月收治住院和门诊复查的直肠癌(经过组织病理诊断证实、术前未经任何放化疗)患者60例为病例组，病程(2.98±1.17)年，男34例、女26例，年龄35～77〔平均(53.9±13.04)〕岁，中位年龄56岁。对照组为门诊体检健康者60例，男31例、女29例，年龄33～75〔平均(54.37±14.13)〕岁，中位年龄54岁。肠镜检查结果无异常者，无肿瘤史，血清肿瘤标志物在正常参考范围内。两组一般临床资料差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经伦理委员会批准并签署了知情同意书。

1.2纳入及排除标准 病例组术前未经过放疗、化疗等其他辅助治疗，术后均经组织病理学确诊为直肠溃疡型癌、浸润型癌及交界性癌等(Ⅰ期9例、Ⅱ期17例、Ⅲ期23例、Ⅳ期11例)。对照组无烟酒不良嗜好，各项常规检查心电图(ECG)、血、尿常规、肝肾功能、腹部B超等均正常，排除其他系统恶性肿瘤、糖尿病及精神神经系统疾病，能够配合研究者。

1.3标本采集及检测 两组晨起空腹(隔夜空腹8 h以上)肘静脉采非抗凝血5 ml装于真空试管中，室温下离心10 min(3 000 r/min)，抽取上层血清，-80℃冰箱保存备用。血清MMP-7检测用酶联免疫吸附试验(ELISA)，以放射免疫分析法检测血清CA242，并严格按试剂盒说明书进行所有操作。

1.4统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行t、χ2检验和方差分析。

2 结 果

2.1两组血清CA242、MMP-7水平比较 血清CA242、MMP-7水平病例组明显高于对照组(P<0.05)，见表1。

2.2血清CA242、MMP-7诊断直肠癌的敏感度、特性度及准确性 两指标联合检测可显著提高直肠癌的诊断效能和敏感性(P<0.05)，见表2。

2.3直肠癌患者不同病理分期CA242、MMP-7水平比较 血清CA242、MMP-7水平均表现为Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期，差异有统计学意义 (P<0.05)，见表3。

表1 两组血清CA242、MMP-7水平比较

表2 血清CA242、MMP-7诊断直肠癌的敏感度、特异度及准确性(%)

与联合检测比较：1)P<0.05

表3 直肠癌患者不同病理分期CA242、MMP-7水平比较

3 讨 论

根据肿瘤标志物生化或免疫特性可以识别或诊断肿瘤。肿瘤标志物存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中，能够用免疫学、生物学及化学的方法检测到。通常单个标记物的特异性或敏感性普遍偏低，因而在实践上和理论上都建议两种或以上标志物一次同时测定，借以提高对肿瘤诊断的特异性和敏感性。〔3，4〕。

目前直肠癌的治疗模式为多学科综合治疗模式，即从单纯的手术切除转变为以手术为主，联合放、化疗和靶向治疗〔5〕。肿瘤发生时，其血清中一些标志物会不同程度地升高，可能是由于肿瘤细胞中糖蛋白、脂蛋白等表达异常造成的〔6〕。肿瘤标志物在肿瘤的诊断中，尤其是早期诊断中有着重要价值〔7〕。

多数情况下，肿瘤的发生、发展是多种因素参与、多个步骤发展的较为复杂的过程，而一般恶性肿瘤最重要的生物学特征就是浸润和转移，这两个过程相对复杂，其机制也不是很清楚。其中，MMPs通过对基底膜在肿瘤的浸润和转移中发挥重要作用及降解细胞外基质等作用。MMP-7是由肿瘤细胞产生并且能够活化其他MMPs成员(一般都是以酶原形式分泌的，比如MMP-2、MMP-9等)及发挥灭活丝氨酸蛋白酶抑制剂的作用。通常MMPs家族的作用就是通过蛋白水解酶去除氨基末端而激活，从而对特定的细胞外基质进行消化，其催化机制依赖于锌离子的催化结构，它是一组锌依赖肽链内切酶。一般MMPs可以降解基质的一种成分，可以在血管再生、伤口愈合、胚胎发育等生理过程及肿瘤、心血管疾病、风湿性关节炎等疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。MMP-7即基质溶素，是 MMPs 家族中分子量最小的并且以 28 kD酶原形式分泌，活性酶分子量 19 kD，定位于11号染色体 q21。其具有广泛的底物特异性和高度蛋白溶解能力及消化特定细胞外基质的作用，同时参与肿瘤新生血管的形成、远处转移、周围浸润等过程〔8〕，其在多种肿瘤的发生发展中发挥双重作用(具有血管生成和抗血管生成的作用)。本研究提示，直肠癌时糖蛋白、脂蛋白等表达异常，从而使MMP-7不同程度地升高；说明MMP-7可用于对直肠癌的诊断。

CA242是近年来应用于临床较新的一种肿瘤标志物，其对大肠癌的敏感性可达60%～72%；也是一种唾液酸化的鞘糖脂抗原，和CA50共同表达；其生化本质为唾液酸化的糖类结构，属于黏蛋白。在正常胰腺、结肠黏膜中存在，但表达极低。黏蛋白型CA也是一种糖蛋白，多数对肿瘤诊断价值较高的血清标志物是分泌入血液循环中的黏蛋白。肿瘤标志物水平与肿瘤负荷有关，随病情加重、临床分期升高、肿瘤体积增大，肿瘤标志物水平增高。直肠癌发生时，血清CA242升高的原因可能是由于CA242逸入癌灶周围的基质中，进而流入血液中造成的。CA242对直肠癌的早期诊断及临床预后判定具有参考价值，可评价直肠癌治疗效果和疾病进展〔9〕。本研究发现MMP-2、CA242联合检测对直肠癌诊断的准确性、特异性、敏感度明显均优于各自单项检测。这就充分证明二者联合检测可以提高肿瘤的筛选、诊断的灵敏性和有效性。

4 参考文献

1李元青，孙 红.替吉奥单药三线治疗老年晚期胰腺癌 1 例报道〔J〕.实用肿瘤杂志，2014；29(1)：90-2.

2朱洪权，李 琳，徐传和，等.联合检测血清 CA19-9，CA242，CEA 对胰腺癌的诊断价值〔J〕.中国实验诊断学，2015；19(12)：2060-2.

3王传新.肿瘤标志物的临床应用与研究进展〔J〕.中华检验医学杂志，2014；17(9)：641-4.

4张海英.血清肿瘤标志物联合检测在常见恶性肿瘤筛查中的应用价值〔J〕.中国实验诊断学，2014；18(8)：1352-4.

5汪建平.中国结直肠癌治疗现状-进步与局限并存〔J〕.中华胃肠外科杂志，2012；15(10)：989-92.

6李 策，聂彩辉，张力君，等.肿瘤标志物的应用及其筛选技术研究进展〔J〕.药学进展，2014；38(1)：1-13.

7王柳倩，马 为.肿瘤标志物在肺癌的早期诊断及预后评估中的研究进展〔J〕.现代肿瘤医学，2014；22(12)：3004-7.

8张平峰，蔡 军，吴安涛，等.MMP-7在肿瘤中的研究进展〔J〕.实用临床医学，2014；15(2)：131-3.

9孔祥旭.直肠癌术前放化疗的临床研究进展〔J〕.临床医药文献杂志，2017；4(50)：9886-7.