黑米花青苷复方软胶囊生产工艺研究

◎ 李 雯，韩惠敏，赵天煜，王志男，李新生,2,3，沈正扬

（1.陕西理工大学生物科学与工程学院，陕西 汉中 723000；2.陕西省资源生物重点实验室，陕西 汉中 723000；3.陕南秦巴山区生物资源综合开发协同创新中心，陕西 汉中 723000）

黑米花青苷是一种天然的食用色素资源，具有极高的药用价值。研究表明，黑米花青苷能调节血脂、保肝护肝、抗癌抗肿瘤等作用[1]。目前市场上有关黑米的保健产品较多，如黑米酒黑米醋、黑米保健茶、黑米粉条等，但黑米花青苷产品在国内市场上还不多见。随着黑米及其花青苷保健食品的开发与热销，黑米花青苷的市场前景将十分广阔[2]。

黑米花青苷复方软胶囊是陕西省资源生物重点实验室依据口服黑米营养液专利（专利号CN92115313.9）配方为基础研发的一种保健品，目前正在研发试生产阶段。该复方软胶囊内容物是由黑米花青苷及西洋参、何首乌、灵芝3种中药材中的有效成分构成。本研究旨在通过优化黑米花青苷复方软胶囊生产工艺，从而为黑米花青苷复方软胶囊的生产提供工艺参数。

1 材料

HSR-100 型轧囊机（北京东方慧神科技有限公司），JM50型胶体磨（上海环龙实业公司），高效液相色谱仪（安捷伦），紫外可见分光光度计UV-1750（岛津公司），智能崩解仪（ZBS-6E 天津天大天发），黑米购自洋县周大黑，西洋参、何首乌、灵芝均购自汉中市中药药材市场，大豆油（PEG400医药级，陕西乐博生化科技有限公司），矢车菊素-3-O-葡萄糖苷标品（陕西乐博生化科技有限公司，批号为7084-24-4，纯度≥98%），2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷标准品（上海源叶生物科技有限公司，批号为Z110844，纯度≥98%）、人参皂苷Re（上海源叶生物科技有限公司，批号为B21055，纯度≥98%）。

2 方法

2.1 黑米花青苷复方软胶囊内容物的制备

黑米花青苷用60%乙醇溶液，60 ℃水浴条件下提取3次，每次1 h，合并提取液，浓缩至适量，干燥得黑米花青苷浸膏；西洋参皂苷用70%的乙醇溶液，90 ℃水浴条件下提取2次，每次3 h，合并提取液浓缩至适量，干燥得西洋参皂苷浸膏[3]；二苯乙烯苷用60%乙醇提取，40 ℃水浴条件下提取2次，每次66 min，合并提取液浓缩至适量[4]，干燥得何首乌浸膏；灵芝多糖用水提取[5]，98 ℃水浴条件下提取2次，每次2.5 h，合并提取液浓缩至适量，干燥得灵芝多糖浸膏。

2.2 内容物处方确定

2.2.1 内容物基本处方的确定

依据口服黑米营养液专利（专利号CN92115313.9）配方，黑米∶西洋参∶灵芝∶何首乌=15∶8∶5∶4，在该配方基础上，通过计算配方量中各药材中有效成分含量进行换算，得到黑米花青苷复方软胶囊中4种浸膏的比例。

2.2.2 稀释剂和助悬剂的选择及用量确定

本实验选择大豆油和PEG400为分散剂，蜂蜡为助悬剂，通过检测内容物沉降系数，来确定这两种助悬剂的最佳用量。

（1）流动性。取一定量的内容物，加入不同量的稀释剂，加热搅拌使混合均匀，冷却后通过观察其流动性（以药匙取适量混合液，药匙与水平面成45°，观察混合液从药匙上滴下的情况）[6]。

（2）沉降系数。沉降体积比取供试品，充分振摇使混悬物分散均匀，迅速用具塞量筒量取50 mL至同一内径的50 mL具塞量筒中，密塞，用力振摇1 min，记下混悬液的初始高度H0，再将其放入25 ℃恒温水浴锅，3 d后观察其沉降情况，并记下沉降面的高度H1，计算沉降体积比F（F=H1/H0）。F值越接近1，说明药液越稳定[7]。

2.3 有效成分含量测定

取出2粒制备出的胶囊，分别剥开取出内容物，精密称取0.5 g，分别置于具塞试管中，加入试剂50 mL称重，回流提取30 min，称重加相应试剂补至初始重量。其中黑米花青苷采用60%乙醇、西洋参皂苷提取采用70%乙醇、灵芝多糖采用水、二苯乙烯苷采用56%乙醇。

黑米花青苷含量的测定以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为标品，参照王艳龙[8]的紫外-可见分光光度计法测定；西洋参皂苷含量测定以人参皂苷Re为标品，参照曲正义等[9]的紫外-可见分光光度法测定；多糖含量测定参照周吴萍[5]等的蒽酮硫酸法测定；何首乌中二苯乙烯苷含量以2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为标准品，参照2015版药典的高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。

2.4 胶囊崩解时限测定

参照2015版药典附录Ⅻ A方法对胶囊崩解时限进行测定。

3 结果与分析

3.1 内容物处方确定

3.1.1 稀释剂PEG400与大豆油用量确定

由于黑米花青苷不溶于油脂，并且黑米花青苷为极性物质易与囊壳发生互溶现象，故本研究的稀释剂选择大豆油和PEG400。将浸膏依据配方混合后，以流动性为指标初步确定浸膏与稀释剂的比例为1∶5。在此比例下，以沉降系数为指标确定大豆油与稀释剂的用量，结果见表1。

表1 大豆油与PEG400不同比例内容物稳定性检测表

由表1可知，PEG400的含量越高内容物越稳性越好，但是PEG400用量过大会影响胶皮的崩解，故选择PEG400与大豆油的比例为3∶2。

3.1.2 助悬剂蜂蜡用量确定

由于内容物稳定性并未达到最佳，因而通过添加一定蜂蜡来提高内容物稳定性。以流动性和沉降系数为指标确定蜂蜡的用量，结果见表2。

表2 蜂蜡不同用量内容物稳定性检测表

由表2结果可知，蜂蜡用量为2%时，制备得到的混合液的流动性及稳定性最佳，故蜂蜡用量选择2%。通过对稀释剂PEG400与大豆油及助悬剂蜂蜡用量的研究，最终确定内容物配方为浸膏∶PEG400∶大豆油=1∶3∶2，蜡用量选择2%。

3.2 囊壳配方中遮光剂及色素用量确定

黑米花青苷复方软胶囊的前期囊壳配方为明胶∶甘油∶遮光剂∶水∶=1∶0.4∶0.03∶1，后期实验过程中发现黑米花青苷极不稳定，见光易分解，故需添加一定量色素，提高黑米花青苷的稳定性。由于色素用量应使囊壳色泽深于胶囊内药液，并且与内容物及明胶之间无配伍问题，故综合以上并参照食品添加剂标准，选择色素为焦糖色素，遮蔽剂为二氧化钛（TiO2）作为囊壳辅料，并对其用量进行考察，结果见表3。

表3 色素及遮光剂用量筛选表

TiO2用量在0.3%～0.7%、焦糖色素在0.3%～0.5%时遮蔽效果较好，但色素及遮光剂用量太大，可能会影响崩解，综合考虑，采用TiO20.5%、色素0.3%。

3.3 胶囊中四种成分含量测定

依据上述方法检测，矢车菊素的标准曲线方程为Y=0.172 6X-0.001 7（R2=0.999），人参皂苷标准曲线方程为Y=0.099 9X-0.053 7（R2=0.997 3），多糖标准曲线方程为Y=0.140 6X-0.013（R2=0.998 8），二苯乙烯苷标准曲线方程为Y=1 176.2X-9.464 8（R2=0.995 5）。经检测，每粒胶囊中黑米花青苷含量为1.125 mg、西洋参皂苷含量为0.31 mg、灵芝多糖含量为0.58 mg、二苯乙烯苷含量为0.29 mg。

3.4 胶囊崩解时限测定

依据药典附录Ⅻ A方法，测定崩解时限，检测黑米花青苷复方软胶囊在人工胃液和人工肠液中的崩解时间，实验结果见表4。

表4 软胶囊崩解时限检测表

由表4可知，黑米花青苷复方软胶囊符合药典规定60 min内完全崩解的要求。

4 结论

（1）通过实验确定黑米花青苷复方软胶囊内容物配方为浸膏∶PEG400∶大豆油=1∶3∶2，蜡用量选择2%。囊壳配方为明胶∶水∶甘油=1∶1∶0.4，TiO20.5%，色素0.3%。

（2）所得黑米花青苷复方软胶囊均在30 min以内崩解，符合药典规定。胶囊中黑米花青苷含量为1.125 mg/粒、西洋参皂苷含量为0.31 mg/粒、灵芝多糖含量为0.58 mg/粒、二苯乙烯苷含量为0.29 mg/粒。

（3）该胶囊外表光滑为深褐色，内容物为紫黑色浸膏，微苦。且符合生产工艺及质量控制方面的要求，所得工艺参数可为后期该胶囊的生产实践提供依据。

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