PD-L1在非小细胞肺癌中的表达及意义

郭志强,钱正宇,米小芳,郑绘霞

(1山西医科大学基础医学院病理教研室,太原 030001;2大同市第五人民医院麻醉科;3大同市第三人民医院生殖医学科;4临汾市人民医院病理科;5山西医科大学第一医院病理科;*通讯作者,E-mail:huixiazheng62@126.com)

程序性死亡配体1(programmed death ligand-1,PD-L1)是B7家族成员,在肿瘤免疫逃逸机制中发挥作用而备受关注[1],并成为肿瘤免疫治疗的研究热点[2,3]。近年来有研究表明,PD-L1蛋白通过参与肿瘤免疫逃逸促进肿瘤的发生与发展[4]。本文研究PD-L1在非小细胞肺癌中的表达,旨在探讨其在非小细胞肺癌中的作用及对肺癌预后的影响。

1 材料与方法

1.1 组织标本

选择2008-01～2017-01山西医科大学第一医院病理科存档的原发性非小细胞肺癌石蜡标本105例。其中男性65例,女性40例,年龄≤60岁的32例,>60岁的73例。根据WHO肺癌分型标准及UICC国际肺癌分期标准进行分型、分期:其中鳞癌70例,腺癌35例;Ⅰ-Ⅱ期63例,Ⅲ-Ⅳ期42例。选取60例癌旁组织作为对照组,所有患者术前均无放化疗史及治疗史。

1.2 试剂

兔抗人PD-L1单克隆抗体购自武汉博士德生物技术有限公司。

1.3 免疫组织化学

所有石蜡标本,切片厚度4 μm。采用SP法检测PD-L1蛋白的表达情况。加入兔抗人PD-L1单克隆抗体(浓度1 ∶100)。4 ℃冰箱过夜后滴加50 μl的辣根过氧化物酶HRP标记的二抗,DAB显色。

结果判定:PD-L1以胞质染成黄棕色或黄褐色均匀颗粒状为阳性。400倍显微镜下随机观察5个视野,每个视野计数100个细胞计算百分比,阳性细胞1%-25%为1分,26%-50%为2分,51%-75%为3分,76%-100%为4分。阳性强度:无色为0分,淡黄色为1分,黄色为2分,棕黄色为3分。二者相乘>3分为阳性,≤3分为阴性,PD-L1阳性的评判标准为:以阳性50%为临界点,≥50%为阳性,<50%为阴性[5]。

1.4 统计学分析

采用SPSS 19.0统计学软件进行处理,组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PD-L1蛋白在肺癌组织中的表达情况

PD-L1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(52.4%vs5.0%,P<0.05，见表1);PD-L1在肺鳞癌与肺腺癌中高表达,在癌旁组织中低表达(见图1)。

2.2 PD-L1蛋白表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系

PD-L1在肺癌组织中的表达与病理分型无关,差异无统计学意义(P>0.05),PD-L1蛋白在肺癌组织中的表达与TNM分期和淋巴结转移情况有关,差异有统计学意义(P<0.05),而与性别、年龄、分化程度和肿瘤直径无关(P>0.05,见表2)。

表1PD-L1在非小细胞肺癌组织中的表达情况

Table1TheexpressionofPD-L1inNSCLC

组织类型nPD-L1+-χ2P癌旁组织6035737.6030.001肺癌组织1055550

A. 癌旁组织 B. 腺癌 C. 鳞癌图1 PD-L1蛋白免疫组化法在非小细胞肺癌中的表达 (SP,×100)Figure 1 Expression of PD-L1 in non-small cell lung cancer (SP,×100)

3 讨论

PD-L1,也称B7-H1、CD274,是PD-1的配体之一,是CD28/细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4)家族的免疫抑制受体,由Cd274基因编码,包含290个氨基酸[6]。PD-L1传导抑制信号给T细胞表面的PD-1,从而导致免疫耐受[7]。PD-L1表达于活化的T细胞、B细胞、NK细胞。DCs、巨噬细胞、肥大细胞[8]。有研究表明PD-L1在多种人类肿瘤中高表达,比如卵巢癌[9]、胃癌[10]、前列腺癌[11]、乳腺癌[12]等。近年来有研究表明[13]PD-L1蛋白通过参与肿瘤免疫逃逸机制促进肿瘤的发生发展。

李义等[14]通过流式细胞术和免疫组织化学方法检测PD-L1在淋巴瘤组织中的表达,通过构建荷瘤小鼠模型,观察肿瘤的生长情况,并检测PD-L1对化疗药顺铂的杀伤作用的反应。结果表明PD-L1在淋巴瘤组织中高表达,PD-L1可以促进肿瘤的生长,并能通过抗凋亡抵制顺铂对肿瘤的杀伤作用。吴圣等[15]通过收集151例胃癌患者的肿瘤组织标本,采用免疫组织化学法检测其中PD-L1蛋白表达,结果PD-L1在胃癌细胞及癌间质淋巴细胞表达较癌旁组织明显升高,癌旁组织不表达PD-L1。表明PD-L1可能成为预测胃癌进展和预后的新分子标志物,阻断PD-L1/PD-1信号通路有望成为胃癌免疫治疗的新策略。

本研究表明在非小细胞肺癌中PD-L1蛋白在肺癌组织中的阳性表达率为52.4%,明显高于癌旁组织阳性表达率5.0%;PD-L1蛋白在肺癌组织中的表达与性别、年龄、分化程度、组织学分型和肿瘤直径无关,与TNM分期和淋巴结转移情况有关,PD-L1阳性表达率在TNM Ⅲ-Ⅳ期为83.0%(35/42),高于Ⅰ-Ⅱ期患者的32.0%(20/63),62例有淋巴结转移患者中阳性表达者有50例,阳性率高达81.0%,而43例无淋巴结转移患者中阳性表达者仅有5例,提示PD-L1可能参与外周T淋巴细胞免疫活性,促进肿瘤浸润和转移。

表2PD-L1在非小细胞肺癌组织中与临床参数的比较(例)

Table2RelationshipbetweentheexpressionofPD-L1andclinicopathologicparametersinNSCLC(cases)

临床病理特征nPD-L1+-χ2P性别2.6530.103 男653035 女402515年龄0.0100.919 ≤60岁321715 >60岁733835分化程度2.9920.084 中/高854837 低20713组织学分型0.0190.890 鳞癌703733 腺癌351817TNM分期26.8860.001 Ⅰ-Ⅱ期632043 Ⅲ-Ⅳ期42357肿瘤直径1.5580.212 ≤3 cm502327 >3 cm553223淋巴结转移48.4880.001 有625012 无43538

综上,非小细胞肺癌PD-L1高表达,促进肿瘤的侵袭和转移,并参与肿瘤免疫逃逸。PD-L1成为肿瘤研究的热点,也为针对性的分子靶向治疗提供了新的思路。

参考文献：

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