蒙药朱日很滴丸的制备工艺研究

王跃武，郭俊英，邢煜舒，那生桑，陆景坤

(内蒙古医科大学，呼和浩特 010059)

朱日很滴丸原处方系蒙医国医大师苏荣扎布老师的临床验方，具有清心热、化瘀血和补心的功效，在临床上使用多年，主治心热、心赫依、心刺痛和心慌气短等[1-4]。其处方由广枣、栀子、红花和草果等10味药材组成。目前，该复方在临床上使用主要以散剂为主，有味苦、服用量大、储存和携带不方便以及患者顺应性差等缺点。

滴丸多为舌下含服，药物通过舌下黏膜直接吸收，进入血液循环，避免了吞服时引起的肝脏首过效应以及药物在胃内的降解损失，使药物高浓度到达靶器官，迅速起效[5-6]。本研究将朱日很散剂由传统剂型改革为滴丸剂。

1 仪器与试药

1.1仪器 DWJ-SD3型实验大滴丸机(烟台润龙制药机械设备有限公司)；TAB135-s电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；HH-4型数显恒温水浴锅(金坛市江南仪器厂)；RC806溶出度测定仪(长沙捷岛科学仪器有限公司)；L-2000型高效液相色谱仪(日立高新技术公司)。

1.2试药 PEG4 000(批号FS160704211)，PEG6 000(批号FS160704311)，辽宁奥克医药辅料股份有限公司；二甲硅油(批号20160311)，天津市博迪化工有限公司；司盘-80(批号160501)，吐温-80(批号160701)，四川金山制药有限公司；卵磷脂(批号20160225)，北京索宝生物科技有限公司；栀子苷(批号110749-201610)，中国食品药品检定研究院。

2 方法与结果

2.1滴丸的制备方法 按照处方比例称取广枣等3味药材，用10倍量体积分数为70%的乙醇加热提取2次，每次1.5 h，提取液喷雾干燥，得组分一。按照处方比例称取肉豆蔻和白檀香等5味药材，用二氧化碳超临界萃取法提取挥发油，得组分二。牛黄和冰片作为组分三直接粉末入药。称取适量基质，置于烧杯中，水浴加热融化后，依次加入组分三、乳化剂、组分二和组分一，搅拌均匀后，制备200 mg滴丸。

2.2制备工艺考察

2.2.1乳化剂种类的选择 选取司盘-80、吐温-80和卵磷脂3种乳化剂，用量均为4%，其他成分比例不变，开展3组实验。称取适量基质PEG4 0003份，分别置于烧杯中，75 ℃水浴加热融化后，依次加入组分三、乳化剂、组分二和组分一，搅拌均匀后，观察滴丸药液油水分离和沉淀析出的程度，确定乳化剂对药液稳定性的影响。实验结果表明，3种乳化剂的乳化效果为：卵磷脂>吐温-80>司盘-80，综合考虑选用卵磷脂作为乳化剂，结果见表1。

表1乳化剂种类对药液稳定性的影响

Tab.1 The effect of emulsifier type on the stability of medicine liquid

种类油水分离现象沉淀现象吐温-80明显多司盘-80明显多卵磷脂不明显少

2.2.2乳化剂用量的选择 设置5种不同比例的卵磷脂：0.5%，1.0%，2.0%，3.0%和4.0%，其他成分比例不变。按照2.2.1项下方法进行操作。实验结果表明，卵磷脂5种用量对乳化效果的影响顺序依次为：4.0%>3.0%>2.0%>1.0%>0.5%，综合考虑选择卵磷脂的用量为4.0%，结果见表2。

表2乳化剂用量对药液稳定性的影响

Tab.2 The effect of emulsifier dosage on the stability of medicine liquid

卵磷脂的用量/%油水分离现象沉淀情况0.5明显多1.0明显多2.0明显多3.0略明显略多4.0不明显少

2.2.3水浴温度的选择 水浴加热温度选取70，75，80，85和90 ℃，按照2.2.1项下方法进行操作，做5组以温度为变量的实验。实验结果表明，温度对滴丸药液稳定性的影响为：在≤80 ℃的条件下，滴丸药液稳定性较好，结果见表3。

表3水浴温度对药液稳定性的影响

Tab.3 The effect of heating temperature on the stability of medicine liquid

水浴温度/℃油水分离现象沉淀情况70不明显少75不明显少80略明显略多85明显多90明显多

2.2.4组分加入顺序的选择 称取适量基质PEG4 0002份，分别置于烧杯中，75 ℃水浴加热融化后，依次按照顺序一(组分三，卵磷脂，组分二和组分一)和顺序二(组分三，组分二，卵磷脂和组分一)混合各组分，观察滴丸药液油水分离和沉淀析出的程度，确定加入顺序对药液稳定性的影响。实验结果表明，组分加入的顺序对药液稳定性的影响无差别，油水分离现象均不明显，沉淀较少。

2.3正交实验优选滴丸制备工艺

2.3.1因素水平的选择 根据单因素实验结果及文献报道[7-9]，在水浴温度、滴距、冷凝剂温度和滴速4个参数固定的条件下，选取基质种类、中间体与基质比例和乳化剂的加入量3个因素作为考察因素，各因素设计3个水平，见表4。

表4正交实验因素与水平

Tab.4 The factors and levels of the orthogonal test

水平因素A,基质B,中间体∶基质/g∶gC,乳化剂量/%1PEG4 0001∶132PEG 4 000∶PEG6 000=1∶11∶1.543PEG 6 0001∶25

2.3.2正交实验结果 为减少滴丸质量评价时的主观误差，将硬度、色泽和圆整度由好到差分别记为1，2和3 分，加和后的得分作为滴丸的外观质量标准。以溶散时限、丸质量差异和外观质量为评价指标，采用L9(34)正交实验设计，从基质种类(A)、中间体与基质比例(B)和乳化剂的加入量(C)3个因素考察滴丸成型工艺。正交实验结果见表5和表6。其中，丸质量差异和溶散时限按照《中国药典》2015年版二部附录项下进行操作。外观质量的评分为色泽、硬度和圆整度3项指标考核结果直接相加。综合评分=(溶散时限/最大溶散时限)+(丸质量差异变异系数/最大丸质量差异变异系数)+(外观质量分数/最大外观质量分数)。综合评分分数越低则滴丸质量越好[10-12]。

表5正交实验结果

Tab.5 Results of the orthogonal test

实验号列号1(A)2(B)3(C)4(D)结果溶散时限/min丸质量差异/%外观质量综合评分11111215.692.821222195.842.131333187.762.542123206.862.552231184.931.862312207.472.773132187.382.783213194.962.293321215.452.2K17.37.97.66.8K26.96.06.87.4K37.17.46.97.1R0.41.90.90.6

表6正交实验方差分析结果

Tab.6 Results of variance analysis of the orthogonal test

离差来源平方和自由度 均方 FP因素A0.023 5 2.000 0 0.011 8 0.4>0.05因素B0.606 7 2.000 0 0.303 3 9.2 >0.05因素C0.138 7 2.000 0 0.069 3 1.9>0.05误差0.065 8 2.000 0 0.032 9 1.0

2.3.3成型工艺结果分析 由直观分析可知，各因素作用大小顺序为B>C>A，因综合分数越低，滴丸质量越好，故最佳工艺组合为A2B2C2，即PEG4 000∶PEG4 000为1∶1，中间体∶基质为1∶1.5，乳化剂的加入量为4%；方差分析结果表明，基质种类、基质与中间体的比例和乳化剂的用量3个因素各水平之间对滴丸的质量差异均无统计学意义。

2.4滴丸溶出度测定

2.4.1色谱条件 根据参考文献及预实验[13-15]，选择栀子苷作为溶出度的考察指标，其色谱条件为：Diamonsil C18色谱柱；乙腈-水(15∶85)为流动相；流速为1.0 mL·min-1；检测波长为238 nm；柱温为30 ℃。

2.4.2对照品溶液的制备 精密称取栀子苷对照品3.2 mg，置于100 mL量瓶中，用甲醇定容，得质量浓度为32 μg·mL-1的对照品溶液。

2.4.3供试品溶液的制备 精密称取朱日很滴丸粉末1.0 g，加入50 mL甲醇，称定质量，超声处理 30 min，放置冷却后，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，振荡至溶液均匀，过滤。精密吸取续滤液10 mL，置于25 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

2.4.4线性关系考察 精密吸取2.4.2项下制备的对照品溶液1，2，5，10和15 μL，按照2.4.1项下色谱条件进行测定。以栀子苷的进样量为横坐标(x)、栀子苷峰面积为纵坐标(y)，绘制标准曲线，得到栀子苷的回归方程为：y=1 411.4x-660.54(r=0.999 9)。实验结果表明，栀子苷在32.0～480.0 ng范围内线性关系良好。

2.4.5精密度实验 精密吸取供试品溶液10 μL，连续进样5次，在2.4.1项色谱条件下，测定峰面积的RSD值为0.38%，结果表明，该仪器精密度良好。

2.4.6稳定性实验 精密吸取同一供试品溶液，在2.4.1项色谱条件下，于 0，2，4，6，8，12和24 h分别进样 10 μL，测定，考察其稳定性。测得RSD值为 0.68%，结果表明，供试品溶液在24 h内稳定。

2.4.7重复性实验 精密称取6份样品，按照2.4.1项下色谱条件测定，测得RSD值为1.52%，结果表明，该方法重复性良好。

2.4.8加样回收率实验 精密称取样品0.5 g，3份，置于具塞锥形瓶中，分别精密加入栀子苷对照品0.25 mg，再加入50 mL甲醇，称定质量，超声处理 30 min，待溶液冷却后，再称定锥形瓶及溶液的质量，用甲醇补足减失的质量，振荡至溶液均匀。精密吸取续滤液10 mL，置于25 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取10 μL，测定，计算回收率。该方法测得栀子苷的加样回收率为101.02%，RSD值为1.61%，结果表明，该方法回收率良好。

2.4.9溶出曲线的测定 根据相关文献[16-17]，量取蒸馏水300 mL，超声30 min，倒入溶出仪的量杯中，加热保持37 ℃，设置溶出仪转速为100 r·min-1。称取朱日很滴丸3份，每份2 g，加入到溶出仪的量杯中，记录时间。为了避免取样时间耽搁，出现误差，3份样品投入时间每份间隔3 min。分别在2，5，10，15，20，25，30，40和50 min时取样10 mL，随后补充10 mL预热蒸馏水。将取出的样品蒸干，残渣中加入10 mL甲醇，0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液2 mL，精密吸取10 μL，在2.4.1项色谱条件下测定峰面积，计算平均累积溶出度，以平均累积溶出度为纵坐标、溶出时间为横坐标，得到溶出曲线，见图1。实验结果表明，朱日很滴丸在30 min内可达到最大累积溶出度。

图1朱日很滴丸累积溶出度曲线

Fig.1 The cumulative dissolution curve of Zhurihen Dropping Pills

3 讨论

本课题研究开发的朱日很滴丸是对蒙医国医大师医药知识的挖掘，是蒙药现代化研究的重要探索。

本实验采用二氧化碳超临界萃取技术提取处方中5味药材的有效成分，得到的萃取物是半固体油脂，呈淡黄色，加热融化后成液体油脂，与PEG混合后出现油水分离现象。为了克服这种情况，加入4%的乳化剂卵磷脂，通过高速搅拌，使PEG与油脂形成乳化物，避免油水分离，增加药液的稳定性。

本实验成功制备了200 mg的滴丸。目前，滴丸制剂的丸质量一般在70 mg以下。小滴丸存在服用粒数多、载药量小和中药处方适用范围小等问题[18-19]；而大滴丸可以针对性地解决小滴丸的诸多缺点，有广阔的发展前景。