高效液相色谱—串联质谱法测定小麦中11种有机磷农药残留

俞寅 蒋梅峰 马宏伟

【摘要】建立了小麦中11种有机磷农药残留的高效液相色谱一串联质谱测定法。样品经乙腈提取，用环乙烷一乙酸乙酯（1+1）稀释后经GPC净化，采用电化学喷雾离子源在正离子模式下测定。结果表明11种有机磷农药残留的线性关系良好，在低、中、高3个添加水平下的加标回收率在65.0%～120.0%之间，RSDs为0.24%～8.34%。该方法快速、简便、准确，可用于原粮中有机磷农药的多成分测定。

【关键词】小麦（原粮）；有机磷农药；HPLC-MS/MS

我国生产的有机磷农药绝大多数为杀虫剂。有机磷类农药对人的危害作用从剧毒到低毒不等。有机磷农药可经消化道、呼吸道及完整的皮肤和粘膜进入人体。职业性农药中毒主要由皮肤污染引起。吸收的有机磷农药在体内分布于各器官，其中以肝脏含量最大，脑内含量则取决于农药穿透血脑屏障的能力。

目前分析食品中的农残国标方法主要以气相色谱、气质联用、液质联用等方法为主，这些方法根据不同种类的农药性质而选择不同仪器设备及处理方法。随着各种高精尖仪器的成功应用，以及各国对环保、健康以及经济成本的注重，快速筛查技术、高通量的检测技术，即专属、高效、經济、快速的前处理手段，多成分同时分析的检测手段以及成功避免假阳性的技术已成为未来检测技术的发展趋势。液相色谱串联质谱法能有效地检测出粮食中有机磷农药残留含量，检测方法灵敏度高。前处理采用凝胶渗透色谱技术具有净化效果好、重现性好、可循环使用、自动化程度高等优点，该项技术在农残分析的应用上也日渐广泛。本项目采用液相色谱串联质谱法结合凝胶渗透色谱法对粮食中的有机磷农药残留进行了分析检测。建立了适用范围广、操作简便的粮食中有机磷农药残留检测分析方法。

1材料与方法

1.1材料与试剂

无水硫酸钠、乙腈（农残级）、环乙烷一乙酸乙酯（1+1）（色谱纯）、甲醇（色谱纯）、0.1%甲酸溶液。

1.2仪器与设备

液相色谱一串联质谱仪：美国Thermo；60057-60030液相色谱-TSQ-40500三重串联四级质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）；凝胶渗透色谱仪：LabTechGPC；旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪器RE-52系列；氮气吹干仪：北京斯珀特SPT-16；电子天平：奥豪斯仪器scoutSE。

1.3样品处理

1.3.1提取

准确称取10g样品，放入盛有15g无水硫酸钠的离心管中，加入35mL乙腈，均值提取1min，3800r/min离心5min，上清液通过装有无水硫酸钠的筒形漏斗，收集滤液置于梨形瓶中；残渣再用30mL乙腈提取一次，合并提取液，将收集提取液通过40℃的旋转蒸发仪浓缩至约0.5mL。

1.3.2净化

用10mL环乙烷一乙酸乙酯（1+1）溶解梨形瓶中的浓缩液，吸取5mL于凝胶渗透色谱仪上净化，收集12～24min的溶液，于60℃的旋转蒸发仪上浓缩至约0.5mL，用氮吹仪吹干。

1.3.3定容

用lmL乙腈+水（3+2）将其溶解，用0.22μm滤膜过滤，供液相色谱一串联质谱仪测定。

1.4液相色谱与质谱条件

色谱柱：hypersil GOLD-C18，1.9μm，100x2.1mm；柱温：40%；流速：200μL/min；进样量：40μL。

以三重四级杆质谱仪作为检测器，电化学喷雾离子源（ESI）；雾化气：氮气；离子喷雾电压：3 500V；离子传输管温度：350；鞘气压力：45个单位；辅助气压力15个单位。

2结果与分析

2.1有机磷农药质谱参数

11种有机磷农药为正离子采集模式，各化合物质谱参数见表1，色谱图见图1。

2.2线性回归分析

将有机磷标准品配置成标准工作液做线性回归分析，以峰面积v为纵坐标，质量浓度x为横坐标，得到回归方程和相关系数，同时以空白基质测定值的标准偏差（测定次数为20次）计算方法检出限，试验结果（见表2）。各农药对照品在0.01～1.0μg.mE-1范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数R2≥0.99，方法检出限为0.000 4～0.0141μg·mL-1。

2.3回收率试验

以小麦空白基质进行加标回收试验，添加量主要参照食品中农药最大残留限量（MRL）进行添加，添加水平为0.5MRL、1.0MRL、2.0MRL，考察方法的准确度和精密度。

准确称取10.0g若干份小麦样品，按3个添加水平分别加入相应量的农药混合标准溶液，做加标回收试验，每个添加水平为6组平行试验。按照试验方法进行提取、净化和检测，计算平均回收率和相对标准偏差（RSD），结果（见表3）。

由表3可知，小麦样品中添加11种有机磷农药的平均回收率为65.0%～120.0%，相对标准偏差为0.24%～8.34%。结果表明，该方法测定小麦中有机磷农药的准确度和精密度良好，符合有机磷农药的分析测定要求。

3结论

本文初步分析了GPC净化技术及LC-MS/MS分析技术在谷物中有机磷农药残留的应用，建立了小麦中11种有机磷农药的分析方法，方法线性回归方程的相关系数、相对标准偏差、加标回收率、方法检出限等均满足检测要求。本方法定性可靠、定量准确、灵敏度高，可应用于谷物中同时分析多种有机磷农药残留的检测工作。