泌尿生殖道支原体感染检测、鉴定及耐药性分析

王晋蜀 黄梦雅 赵明丹 周汛

摘   要：目的  探究泌尿生殖道支原體感染情况及对常用抗菌药物的耐药情况，为指导临床合理应用抗菌药物提供科学依据。方法  本研究使用支原体培养、鉴定及药敏检测试剂盒（液基型），对临床收集的489例疑似泌尿生殖道感染患者的标本进行支原体培养、鉴定及药敏检测。结果  发现在489例标本中，支原体阳性有202例，阳性率为41.30%，人型支原体单一阳性有24例，占11.88%，解脲支原体单一阳性有171例，占84.65%，混合感染有7例，占3.47%。女性、男性支原体检出率分别为52.36%、17.44%，女性明显高于男性。阳性患者以20～35岁为主，占66.83%。支原体对交沙霉素、强力霉素和美满霉素敏感性最高，敏感率分别为89.60%、88.12%和84.65%，对红霉素、司巴沙星、环丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星敏感性较低，敏感率分别为18.81%、10.40%、1.49%、6.44%和5.94%。结论  本研究证实支原体感染中主要由解脲支原体感染为主。临床应参考药敏结果合理用药，经验用药时交沙霉素、强力霉素和美满霉素最好，应避免使用司巴沙星、环丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星。

关键词：泌尿生殖道感染;解脲支原体;人型支原体;药物敏感试验;抗生素

中图分类号：R69;R446.5                             文献标识码：A                              DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.16.029

文章编号：1006-1959（2018）16-0098-03

Detection，Identification and Drug Resistance Analysis of Urogenital Mycoplasma Infection

WANG Jin-shu，HUANG Meng-ya，ZHAO Ming-dan，ZHOU Xun

（Chongqing Hospital of Traditional Chinese Medicine/Department of Skin and Beauty，Chongqing Academy of Traditional Chinese Medicine，Chongqing 400021，China）

Abstract：Objective  To investigate the infection of urogenital mycoplasma and the resistance to common antibiotics，and to provide scientific basis for guiding the rational application of antibiotics.Methods  Mycoplasma culture，identification and drug sensitivity test kits（liquid-based）were used to culture，identify and detect drug susceptibility in 489 patients with suspected genitourinary tract infections.Results  The results showed that among 489 specimens，202 were positive for mycoplasma， the positive rate was 41.30%，24 were positive for human mycoplasma，accounting for 11.88%，there were 171 cases of ureaplasma urealyticum single，accounting for 84.65%，and 7 cases of mixed infection，accounting for 3.47%.The detection rates of female and male mycoplasma were 52.36% and 17.44%，respectively，and women were significantly higher than men.Positive patients were mainly 20 to 35 years old，accounting for 66.83%.Mycoplasma is most sensitive to josamycin，doxycycline and minocycline，with sensitivity rates of 89.60%，88.12% and 84.65%， respectively，sensitivity to erythromycin，sirfloxacin，ciprofloxacin，ofloxacin and levofloxacin was low，with sensitivity rates of 18.81%， 10.40%，1.49%，6.44% and 5.94%，respectively.Conclusion  This study confirmed that mycoplasma infection is mainly caused by ureaplasma urealyticum infection.Clinical reference should be made to the rational use of drug susceptibility results.It is best to use josamycin，doxycycline and minocycline when using drugs.Sparfloxacin，ciprofloxacin，ofloxacin and levofloxacin should be avoided.

Key words：Urogenital infection;Ureaplasma urealyticum;Human mycoplasma;Drug sensitivity test;Antibiotic

支原体（mycoplasma）是一类缺乏细胞壁、形态上呈高度多变性，能通过除菌器，在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞型生物，能形成有分支的长丝。支原体中的解脲支原体（ureaplasma urealyticum，UU）和人型支原体（mycoplasma hominis，Mh）可寄居于人的泌尿生殖道，并在一定的条件下引起非淋病性尿道炎（nongonococcal urethritis，NGU），主要通过性途径传播，其中有30%的NGU是由UU所致[1]。由于抗菌药物的广泛使用以及滥用使得支原体的耐药率逐渐提高，为了解支原体感染及耐药情况，指导临床合理利用抗菌素，本文分析了共计489例支原体培养及药敏试验结果，报道如下。

1对象与方法

1.1 研究对象  收集2015年11月～2017年10月重庆市中医院皮肤美容科门诊疑似支原体感染患者共489例，其中男性172例，女性317例，年龄19～70岁，平均年龄（34.57±1.56）岁。

1.2 仪器与试剂  仪器为电热恒温培养箱，型号为HH.BLL.420B5，试剂为迪尔生物科技有限公司生产的Uu和Mh分离鉴定药敏试剂盒。该试剂盒包含的抗菌药物有四环素、左氧氟沙星、红霉素、交沙霉素、强力霉素、环丙沙星、氧氟沙星、美满霉素、罗红霉素、阿奇霉素、克拉霉素和司巴沙星共12种药物。

1.3 方法  必须在用药前采取标本，支原体对细胞表面有很强的亲和力，应尽可能多收集细胞，标本采集后应尽快接种，不可在室温或普通冰箱内久存，以免拭子干燥而致使支原体活力降低甚至死亡。男性：用男性无菌拭子由尿道口1～2 cm处取尿道口分泌物，根据病情需要，也可取前列腺按摩液、精液，采集尿道口分泌物的患者，应于取样前2 h内未进行排尿。女性：采集宫颈分泌物，标本采集时应先用生理盐水擦去宫颈口多余粘液，再用另一个拭子在宫颈管内1～2 cm处取宫颈分泌物。用拭子取材时，要在宫颈（或尿道）内旋转并至少停留20 s，以便获得较多细胞。如果必须用尿液做支原体培养，可留取清晨中段尿液10～20 ml，高速离心后，取沉淀物接种，但尿液支原体的阳性率明显低于尿道口（或宫颈）分泌物。将标本置于35～37 ℃敷箱培养，在24 h和48 h分别观察结果。

2结果

2.1 216例患者感染类型构成比例分析  分析489例患者感染情况，共检出202例支原体感染患者，占比41.30%，其中感染类型有解脲支原体、人型支原体及混合感染3种类型，见表1。

2.2 支原体阳性患者不同年龄分布情况  将支原体感染患者分为≤20、20～35、35～50和≥50岁4个年龄段，其中20～35年龄段阳性率最高，占66.83%，见表2。

2.3 患者支原体感染的耐药率分析   支原体对四环素、交沙霉素、强力霉素和美满霉素的敏感性较高，敏感性均高于74%，但对左氧氟沙星、红霉素、环丙沙星、氧氟沙星和司巴沙星的敏感性均低于20%，其中对环丙沙星的敏感性仅为1.5%。支原体药物敏感性实验结果，见表3。

3讨论

支原体属是一类大小介于细菌与病毒之间的原核微生物，没有细胞壁，形态呈多样性，大多为球形。支原体感染以Uu和Mh最为常见，好寄生于人体的生殖泌尿道中，属于条件致病菌，当支原体达到一定的数量，导致菌群失调，人体免疫力下降，比如发病部位分泌的嗜中性粒细胞数量减少和功能障碍，才会致病。其感染不侵入人体血液和组织，但会通过吸收宿主细胞养料，从而引起非淋菌性尿道炎、女性输卵管炎、子宫内膜炎、宫颈糜烂及男性前列腺炎、附睾炎、精液质量下降、不孕不育等[2-4]。其致病作用主要是由于支原体可产生具有细胞毒性的磷脂酶和尿素酶，影响宿主细胞生物合成。近年来，支原体感染发生率呈逐年上升趋势[5]，并由于抗菌药物的治疗不规范以及发病率的增加，造成了支原体耐药菌株的不断增多，大部分研究也发现了支原体对喹诺酮以及大环内酯类药物敏感性增加[6，7]，因此，有效防治支原体感染非常重要。泌尿生殖道支原体感染的检测、鉴定以及药敏试验已成为皮肤性病实验室的常规检测项目之一。

本研究结果显示，在489例标本中，支原体感染患者为202例，阳性率为41.30%，其解脲支原体单一阳性有171例（84.65%），人型支原体单一阳性有24例（11.88%），混合感染有7例（3.47%）。说明支体感染主要以解脲支原体为主。在不同的地区报道的支原体感染阳性率不尽相同，可能与检测方法、操作人员、地区差异有关[8，9]。在不同年龄段中阳性患者以20～35岁为主，占48.21%，20岁以下年龄发病率最低（7.92%），50岁以上发病率次之（9.41%）。在同等年龄段女性的发病率仍大于男性。女性的发病率与其性生活开始以及是否闭经密切相关。在我们的观察的50岁以上的患者中其對抗生素的耐药性明显高于其它年龄段，可能是由于这些患者反复感染及不规范使用抗生素有关。数据显示支原体对交沙霉素、强力霉素和美满霉素敏感性最高，敏感率分别为89.60%、88.12%和84.65%，同时发现强力霉素和美满霉素的耐药率都大于5%，与贾双荣[10]等报道的相比耐药率明显增加，可能与滥用抗菌药物逐渐增多有关。支原体耐药性比较强，敏感性会随着时间推移而变化。实验结果提示我们应当定期检测支原体药敏性改变。支原体对红霉素、司巴沙星、环丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星敏感性较低，敏感率分别为18.81%、10.40%、1.49%、6.44%和5.94%，其中对环丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星的敏感率低于10%，与邓世昌[11]等人报道的相符。克拉霉素、阿奇霉素、罗红霉素、四环素敏感率分别为56.93%、48.02%、32.67%、74.26%。红霉素、环丙沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星这些药物耐药率较高可能是因为这些药物为临床常用的经验用药、滥用、出售时间长以及在药店随意购买导致，这提示我们临床用药时应避免使用这些药物。根据得出的数据显示治疗支原体感染应优先应用交沙霉素、美满霉素、强力霉素，避免使用红霉素、司巴沙星、环丙沙星、氧氟沙星以及左氧氟沙星。

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收稿日期：2018-6-12;修回日期：2018-6-22

编辑/李桦