精子DNA损伤与试管婴幼儿结局的相关性分析

屈宗银

（重庆医科大学附属第二医院 生殖医学中心，重庆 400010）

0 引言

随着科技的发展，辅助生殖技术（ART）在全世界得到广泛的应用，给不孕不育男性开创了新的局面[1]。有研究表明，在不孕不育夫妇中，有50%均由于男性精子DNA损伤，染色体畸变感染性疾病、基因突变等因素导致[2]。随着ART技术的发展，试管婴儿的成功率不断的提高，给不孕不育家庭带去了新的希望。在试管婴儿技术中，精子的质量及其完整性对人工受孕与胚胎及胎儿的发育起着至关重要的作用[3]。通过多精子质量的筛选、精子DNA损伤情况的监测提高体外受精的成功率。本研究实施试管婴儿包括体外受精（IVF）和精子卵浆内注射技（ICSI），进行精子质量的对比，旨在分析男性精子损伤对试管婴儿结局的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾分析2015年3月至2017年12月我院生殖专科的62例进行试管婴儿辅助生殖者，按DNA损伤情况分为损伤组与正常组，每组各31例，其中观察组年龄为24-44岁，平均（35.26±5.69）岁；其中学历有中专10例，大专14例和本科及以上7例。对照组年龄为26-45岁，平均（37.25±4.39）岁；其中学历有中专12例，大专11例和本科及以上8例。患者上述一般资料差别无统计学意义，具有可比性（P＞0.05）。纳入标准：①年龄均＞23岁；②本研究经医院伦理委员会批准，患者均签署知情同意书；③入选人员配偶卵子质量均正常，双侧输卵管通畅，无排卵异常等。排除标准：①伴有严重肝、肾、脑、肺等脏器等严重功能不全者；②合并血液系统疾病或免疫力严重缺陷者；③一般资料不齐全者。

1.2 方法

采用精子核染色质发散法（SCD）检测精子损伤率。

1.3 观察指标

对比两组精子浓度、精子活力、精子正常形态、顶体酶、IVF受精率、ICSI受精率、优质胚胎率、活产率与流产率。①受精率：受精卵数/获得卵子数×100%；②优质胚胎率：优质胚胎数/受精卵数×100%；③活产率：活产数/本组总病例数×100%；④流产率：胎儿于孕周＜28周流产例数/本组总例数×100%。

1.4 统计学分析

采用SPSS 18.0统计软件包处理。计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料采用卡方检验。P＜0.05表示有差异且具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组精子情况比较

损伤组精子浓度、精子活力、精子正常形态、顶体酶、IVF受精率、受精率、优质胚胎率均明显高于损伤组（P＜0.05），正常组ICSI受精率明显低于损伤组（P＜0.05），见表1。染色质结构在去浓缩过程中，纤维蛋白通过重新排列形成更加稳定的超浓缩结构，提高了精子染色质原核的形成的难度，增加IVF受精失败率；②在精子与受精卵的结合过程中，精子须穿过卵子透明带才得以成功与卵子结合形成受精卵，受损的精子多由于能量不足，活动能力弱，难以穿过卵子透明带；③受损精子成功穿过透明带后与卵子结合，但由于DNA受损且难以自我修复导致结构的不完整性，受精卵难以正常发育，形成质量不佳的胚胎[7-8]。本研究数据表明，受损组优质胚胎率明显低于对照组，且活产率较正常组低。表明在精子DNA受损状况下，可阻碍受精卵的形成[9]，在体外受精技术中可作为有效参考指标。但精子DNA受损是否导致劣质胚胎、降低活产率以及流产率任存在较大争议[10-11]。在本研究中，损伤组ICSI受精率高于正常组，可能与研就范围太小有关，需进一步研究。

综上所述，精子DNA损伤监测可作为评估实施试管婴儿前重要的一项指标，采取适当的方式减少精子DNA的损伤，可提高试管婴儿的成功率。

表1 两组精子情况比较（±s）

表1 两组精子情况比较（±s）

优质胚胎率（%）损伤组（n=31） 66.25±7.56 42.26±3.09 10.89±0.88 66.26±5.76 71.26±5.57 72.13±3.56 45.36±4.76正常组（n=31） 92.32±6.69 56.52±1.85 13.10±0.84 82.79±5.26 81.26±4.26 58.96±5.26 53.26±3.89 t 14.378 22.045 10.114 11.798 8.361 11.545 7.155 P＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001组别精子浓度/（×106/mL）精子活度（A+B）/% 正常形态（%） 精子顶体酶（μIU/106） IVF受精率（%）ICSI受精率（%）

2.2 两组妊娠结局比较

正常组活产率为（61.29%）明显高于对照组（32.25%）（P＜0.05），两组流产率无明显差异（P＞0.05），见表 2。

表2 两组妊娠结局比较[n（%）]

3 讨论

精子主要成份为核蛋白与DNA，精子DNA损伤或精子未成熟直接影响受精卵与胚胎的发育，在受精卵发育过程中起着尤为重要的作用，是受精成功与否的关键[4]。有研究表明，精子DNA损伤可导致编码Na+-K+-ATP酶的基因改变，引起ATP酶的变性，导致其不能水解，减少能量的释放，降低精子的活动力[5]。本研究中数据显示，受损组精子活力明显低于正常组，精子的活动能力与正常形态等是精子染色体稳定的指标，染色体稳定性降低，表明精子质量的下降，从而降低受精成功率[6]。本研究数据中，正常组IVF受精率明显高于受损组，表明DNA受损精子受精率低于正常精子。有学者报道，受精失败的原因诸多：①由于精子染色体的不稳定，其