自体浓缩生长因子治疗男性雄激素源性脱发的临床应用20例

Tan Pohching 周双白 吴巍 刘凯 谢芸 李青峰

雄激素源性脱发 （Androgenetic alopecia，AGA）为临床上常见的进行性脱发，男性患者表现为前额发际线后移及（或）顶部毛发稀疏。AGA发病原因复杂，涉及二氢睾酮（Dihydrotestosterone，DHT）代谢障碍、5α还原酶活性以及遗传易感性等原因，使DHT诱导毛囊微型化至毛囊消失，缩短毛发生长期，最终导致终毛转变为毳毛后脱发。流行病学调查显示，中国男性人群AGA发病率低于欧美国家，为21.3%，而发病人群中29.7%有一级亲属阳性家族史[1]。

依据2014年发布的中国雄激素源性秃发诊疗指南，推荐治疗AGA的方法包括毛囊单位移植术、口服非那雄胺片及局部应用米诺地尔[2]。相对有创且昂贵的毛囊单位移植术，一般优先使用药物治疗，但上述两种药物都有局限性。非那雄胺治疗可能引起勃起、射精障碍[3]；外用米诺地尔则易引起接触性皮炎且需长期使用[4]。近年来，血浆提取物作为自体生长因子被应用于脱发治疗中[5-6]。研究发现，AGA的发病机制与毛囊周围血管化和生长因子失衡有关，体内、外实验也证实有许多生长因子参与毛囊生长发育和毛发周期的调节，如VEGF、IGF-1、EGF及FGFs等[7-10]。血浆提取物制备是由血小板经离心激活α-颗粒成倍释放丰富的生长因子[11]，具有促血管化、促组织再生作用。体外实验证实，血浆提取物能促真皮乳头细胞的增殖及分化；体内实验证明，其可促进毛囊的局部血管化及调节毛发生长周期[12-13]。自体浓缩生长因子 （Concentrated Growth Factors，CGF）是一种新型血浆提取物，提取方法便捷、无需外源性添加剂，且活性生长因子比例更高[14-15]，但是目前还未有CGF应用于治疗AGA的研究。本研究回顾了20例CGF治疗男性AGA的临床病例，探讨头皮局部注射CGF治疗AGA的可行性，报道如下。

1 资料与方法

1.1 入组标准

入组标准：病程大于2年的原发性脱发的男性患者；符合BASP（The basic and specific classification system）分类法[16]中轻度或中度类型；具有4个雄激素源性脱发疾病特点的3个或以上 （①双侧对称；②缓慢进展的模式化脱发；③皮肤镜下毛发直径异质性大于20%，可见毳毛增多，终毛:毳毛≤2∶1；④三代直系亲属中有雄激素源性脱发症状）。

本组共20例，年龄22～45岁（平均34.2岁），脱发病程2～15年（平均6.3年），所有患者血小板计数均正常。本治疗方案经医院伦理委员会审核，患者及其家属知情同意。

排除标准：既往6个月内接受过局部性或系统性雄激素源性脱发治疗；继发于其他疾病的脱发症状；注射区域存在不宜注射的问题；血小板计数异常；患有血液系统疾病或血液传播性传染病。

1.2 治疗方案

治疗前检验血小板数量，确保患者血小板处于正常范围。

制备CGF时，采用含有肝素钠抗凝剂的真空采血管抽取静脉血9 mL，通过Medifuge离心系统（Silfradent S.R.L.公司，意大利）离心。 Medifuge离心系统为程序化、不间断变速离心，全血经过离心后，按不同比重分离为底部红色的细胞层、棕黄的血沉层以及黄色的血浆层。从血浆层及血沉层交界处收集3 mL血浆，这部分血浆为血小板释放的全部生长因子CGF。

使用2%利多卡因行眶上神经和滑车上神经阻滞麻醉。根据无毛区域的范围，使用1 mL注射器、30号针在额部或顶部头皮皮下注射CGF，注射量0.05 mL/cm2。治疗后每4周随访一次，随访至少12周（3 次）。

1.3 观察指标

于治疗前（V0）及治疗后 4 周（V1）、8 周（V2）、12周（V3）在相同发型、固定位置观察并拍摄照片。在治疗后12周时，根据总体美观改善（GAIS）量表进行评分。GAIS分为5级：+3，脱发情况显著改善，无需再次治疗；+2，脱发情况明显改善，但建议选择进一步治疗；+1，脱发情况稍有改善，但必须继续治疗；0，治疗无效，脱发情况与治疗前基本相同；-1：治疗后恶化，脱发较治疗前加重。

皮肤镜观察治疗区域，统计毛发密度（根/cm2）和终毛毳毛比例（T/V率）变化。

患者通过满意度调查问卷进行自我评估。分为4级：+2，非常满意头发整体外观；+1，对于头发整体外观基本满意；-1，不满意头发整体外观；-2，不满意头发整体外观且症状较前明显加重。

在12周随访期间，记录注射部位反应（如发红、压痛、肿块和疼痛）及全身症状。

1.4 统计分析

以Graphpad Prism 7用于数据的统计分析，结果以（±s）表示，采用双尾配对样本 t检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

患者注射CGF后头发覆盖率显著增加，脱发外观改善。治疗后12周GAIS量表评价平均1.47±0.65分（明显改善），提示CGF治疗AGA有效。

皮肤镜检查显示，患者整体毛发密度及终毛/毳毛比例 （T/V率）增加：治疗前的平均毛发密度为（39.9±14.2）根/cm2，治疗 12 周后为（50.7±18.9）根/cm2（P＜0.05）；治疗前 T/V 率为（44.5%±15.2%），治疗 12周后增至（58.1%±32.1%）（P＜0.05）（图 1、2）。

图1 各时间点治疗区域毛发密度（*：P＜0.05）

满意度调查显示，6例患者非常满意（30%），11例患者满意（50.5%），3例患者不满意（15%），满意度为85%。

本组患者均无治疗相关不良反应发生，5例患者在注射过程中出现轻微疼痛感，注射后自行缓解。

3 典型病例

患者，男，36岁，脱发3年，诊断为雄激素源性脱发，符合BASP分类法中F2型，采用自体CGF进行脱发区头皮皮下注射治疗，治疗后随访15周。随访期间可见治疗前与治疗后8周相比，毛发密度显著增加，T/V比例明显增加，GAIS评分为2分，满意度自评为1分。治疗后15周可见新生毛发持续生长为终毛，头皮毛发覆盖率增加（图3）。

图3 典型病例Fig.3 Typical case

4 讨论

雄激素源性脱发（AGA）又称脂溢性脱发，青春期后发病，特征为缓慢进展的模式化脱发，表现为男性两侧额角开始脱发且逐渐进展至头顶，前发际线向顶部上移或从头顶向前延伸至前额，不累及后枕部及两侧颞部，呈“马蹄形”头发分布[16]。AGA的主要原因是代谢物DHT异常，DHT是由睾酮中的5-α还原酶转化而来[1]，可使毛囊微小化，并影响毛发生长周期，导致生长期缩短、休止期延长，最终终毛被细软毳毛取代[17]。另外，DHT也影响毛囊真皮乳头（Dermalpapilla，Dp）生长因子的合成，导致 Dp 细胞中释放TGF-β1、TGF-β2和IL-6，作为负性介质抑制毛发生长[18]。

目前，AGA的治疗方法主要有口服非那雄胺、外用米诺地尔和自体毛发移植。非那雄胺是Ⅱ型5α还原酶的选择性抑制剂，可抑制睾酮转化为DHT，改善毛囊DHT代谢情况并减少DHT诱导的毛囊微小化，但仅适用于男性患者，且影响性功能，使其应用受到限制[3]。米诺地尔作为钾通道开启剂，增加毛囊的血液供应，抑制真皮乳头的凋亡[19]，主要不良反应包括面部多毛症和用药区域瘙痒、皮炎等，且疗效需长期用药维持，一旦停药则毛囊进入休止期[20]。自体毛发移植见效快、移植后毛发可自行生长，但具有侵入性，可导致供区损伤、疼痛和出血等，且术后毛囊存活率与临床经验、技术等密切相关[21]，术后仍需配合用药，以控制AGA的疾病进展[22]。

研究发现，头发生长发育、生发周期与毛囊周围血流情况密切相关。因此，治疗AGA的药物都以促进毛囊周围血管化为作用机制[23]。Mecklenburg等[24]证实，生长期有大量毛囊周血管形成，毛囊周围血管化促进了毛囊由休止期向生长期发育，抑制血管形成则导致毛发生长发育受阻。生长期毛囊周围血管形成主要由VEGF诱导，VEGF促进毛发生长速度加快及毛囊增大[8]。此外，多种生长因子与毛囊生长发育及毛发周期的调控有关，如EGF、IGF-1、FGFs等[9，10，25]。 这些生长因子在 AGA 的发生、发展中具有重要作用。AGA患者中毛囊VEGF表达减少[26]，体外实验也证实DHT抑制IGF-1的生成[27]。上述研究证明，头皮局部补充生长因子可作为AGA的一种治疗方式，但是单一生长因子的应用无法覆盖整个毛发生长周期，而联合多种生长因子则相关剂量难以把握，增加了不良反应的发生概率，且外源性生长因子体内降解快，以上不足限制了其临床应用。

血小板提取物是一种通过全血离心后获得的高浓度生长因子血浆，能提供自体来源、符合生理配比的多种生长因子，不存在免疫排斥反应，能最大程度地协同发挥作用[28-31]。富血小板血浆（Platelet-rich plasma，PRP）是应用较广泛的血浆提取物，PRP为全血经过离心处理后得到富含高浓度血小板的浓缩血浆，血小板经离心激活α-颗粒成倍释放丰富的VEGF、IGF-1、PDGF 及 TGF-β1 等[11]。 体外研究证实，PRP促进头皮局部血管化，诱导毛囊真皮乳头增殖，并调控毛囊由休止期进入生长期[12-13]。Meta分析亦支持PRP治疗AGA的有效性[32-33]。

随着血液提取物获得方法的改良，可通过变速离心方法提取出CGF。CGF作为新型血浆提取物，提取方法更为便捷，且无需外源性添加剂。CGF含有更多的活性生长因子，如 TGF-β1、VEGF和PDGF-BB，体外研究表明CGF能刺激多种类型的细胞生长、增殖和代谢[14－15，34]。 临床应用已经证实 CGF可增加体内植入物周围的移植血管生成，并促进伤口愈合[35-36]。

本研究直接将自体生长因子注射到脱发区域，以促进头皮局部血供、改善毛囊周围微环境，并提供多种生长因子诱导毛发再生及调控毛发生长周期。结果显示，CGF治疗男性AGA可取得满意疗效，可显著促进头发再生并增加头发覆盖率，新发长成完全着色的终末发，头发外观显著改善。本组中未发生局部性或系统性不良反应，治疗安全性高。此外，部分病例中发现CGF可通过调节皮脂腺的分泌，减少头皮油腻感及瘙痒、灼热感。值得注意的是，虽然在治疗前进行了眶上神经和滑车上神经的阻滞麻醉，但部分患者仍在注射过程中有疼痛感，降低了患者的满意度和依从性，这一问题有待解决。

综上所述，头皮局部注射CGF治疗男性患者AGA安全有效，且CGF制备简单、易于掌握，可作为AGA的新型治疗方法。